Page 161 - 《精细化工》2020年第5期
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第 5 期                    王   松，等:  液液微萃取分析不同层酒醅原酒的挥发性成分                                 ·1011·


                 白酒是中国传统文化的重要组成部分，如今，                          基吡嗪（色谱纯，质量分数 99%），滕州香料有限公
            风味与健康双导向已成为白酒发展的新趋势                     [1-2] ，白   司；2-乙基-3,5-二甲基吡嗪（色谱纯，质量分数
            酒中的活性成分也受到更多研究者的关注                    [3-5] 。      99%），上海麦克林生化科技有限公司；亚麻酸乙酯
                         [6]
                 冯海燕等 对芝麻香不同层酒醅所产原酒的理                          （色谱纯，质量分数 98%），上海阿拉丁生化科技股
            化性质、风味成分、感官差异性进行分析，结果表                             份有限公司；无水硫酸钠（分析纯，120  ℃烘箱中
            明，在白酒蒸馏过程中，由于不同层酒醅所处窖内                             烘烤 5 h，干燥器中冷却备用）、氯化钠、二氯甲烷，
            位置不同，发酵产物存在差异，在蒸酒时采用分层                             国药集团化学试剂有限公司。
            蒸馏，所得原酒的风味和口感也具有明显的差异性。                                标准溶液的配制：将标准化合物溶解在色谱级
                     [7]
            孙金沅等 对同一窖池不同层酒醅中 39 种挥发性生                          无水乙醇和超纯水配制的体积分数 60%的乙醇溶液
            物活性成分进分析，不同层酒醅中化合物质量浓度                             中，制备已知质量浓度的混合标准储备液，然后梯
            差异明显。然而，针对同一窖池不同层酒醅所产原                             度稀释成一系列混合标准液。
            酒中挥发性活性物质差异的研究还鲜有报道。                                   Agilent GC 7890-5975 MSD 气相色谱-质谱联用
                 目前应用到白酒挥发性成分分析的前处理方法                          仪，美国安捷伦公司；DF-101S 集热式恒温加热磁
            种类繁多     [8-10] 。LLME 根据相似相溶原理，利用有机                力搅拌器，巩义市予华仪器有限责任公司；XYJ80-1
            溶剂将目标化合物从样品中萃取出来，同时具有高                             电动离心机，金坛市恒丰仪器厂；Vortex  2 涡旋仪，
            效、快速、低溶剂消耗等特点，有效地避免了传统液                            德国 IKA 公司；BL-2200H  电子分析天平，岛津国
            液萃取有机溶剂用量大、样品使用量大、操作复杂、                            际贸易（上海）有限公司；N-Evap 系列氮吹仪，上
            耗时等缺点     [11-12] ，已成功地应用于白酒分析中         [12-13] 。   海思伯明仪器设备有限公司。
                 本文拟采用液液微萃取前处理方法结合 GC-MS                       1.2   方法
            对同一窖池中 5 种不同层酒醅所产的原酒进行分                            1.2.1    液液微萃取法
            析，并对其中酚类、呋喃类、吡嗪类、萜烯类以及                                 参考文献[12]优化结果：取一定量酒样于 50  mL
            亚麻酸乙酯和亚油酸乙酯等 25 种文献报道有生物                           离心管中，加入 50 µL 质量浓度为 10 mg/L 的 2-乙酰
            活性的化合物进行定量分析，同时结合主成分分析，                            基吡嗪作为内标，加入适量的超纯水将酒样中乙醇体
            探究同一窖池不同层酒醅所生产原酒的差异性和相                             积分数稀释为 15%，加适量氯化钠至过饱和，涡旋振
            关性，为了解不同层酒醅酒中的生物活性物质差异                             荡后，加入 2 mL 二氯甲烷，涡旋萃取 1 min，8000 r/min
            提供数据支持。                                            条件下离心 5 min，收集下层有机相。重复萃取 3 次，
                                                               合并萃取液并使用氮吹至 0.5 mL，进行 GC-MS 分析。
            1    实验部分
                                                               1.2.2    色谱条件
            1.1    试剂与仪器                                           色谱柱：DB-FFAP 型毛细管柱（60 m×250 µm×
                 酒样由安徽古井贡酒股份有限公司提供，同一                          0.25 µm）；载气为 He，流速为 1 mL/min；不分流模
            窖池酒醅从上到下分为 5 层，分层蒸馏后所产原酒                           式，进样量：1 µL，进样口温度 250  ℃；柱子流速
            编号为 A、B、C、D、E；同一层酒醅蒸完酒后，在                          1 mL/min；升温程序：起始温度 40  ℃；以 5  ℃/min
            容器中混合均匀并取样，取样后放入 4  ℃冰箱保存，                         升温至 90  ℃；以 1  ℃/min 升温至 94  ℃，保持
            保证所取样品对每一种酒样的代表性。                                  0.5 min；以 3  ℃/min 升温至 205  ℃，保持 2 min；
                 2-乙酰基呋喃、2-乙酰基-5-甲基呋喃、糠醇、                      以 5  ℃/min 升温至 250  ℃，保持 3 min。
            4-乙基愈创木酚、三甲基吡嗪、四甲基吡嗪（均为                            1.2.3    质谱条件
            色谱纯，质量分数 98%），5-甲基呋喃醛、愈创木酚、                            电子轰击离子源，电子能量 70  eV；离子源温
            4-甲基愈创木酚、苯酚、4-甲基苯酚、乙酸糠酯、                           度 230  ℃；四极杆温度 150  ℃；传输线温度 250  ℃。
            糠酸乙酯、香兰素（均为色谱纯，质量分数 99%），                          定性采用全扫描模式（Full  Scan），扫描范围：m/Z
            2,4-二叔丁基苯酚（色谱纯，质量分数 99.5%）、2-                      45.00~350.00；定量采用选择离子扫描模式（SIM）。
            乙基吡嗪、3-甲硫基丙醇（均为色谱纯，质量分数                            1.2.4    定性方法
            98%），百灵威科技有限公司；2-丙酰呋喃、香叶基                              采用 NIST  11 谱库检索（化合物匹配度大于
            丙酮（均为色谱纯，质量分数 97%），阿法埃莎（天                          80）、标准品比对定性。
            津）化学有限公司；4-乙基苯酚、亚油酸乙酯（色                            1.2.5    定量方法
            谱纯，质量分数 97%）、二甲基三硫（色谱纯，质量                              标准曲线的建立：采用选择离子扫描模式（SIM）
            分数 98%），日本东京化成工业株式会社；2,5-二甲                        进行定量分析，具体定量离子见表 1。取 1.1 节中配
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