Page 156 - 《精细化工》2020年第5期
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·1006·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 37 卷

            了酪氨酸酶二酚酶的活性            [21] 。各种盐溶液对酪氨酸             表 4    植物盐对 B16 细胞增殖活性的影响(增殖率,%,
            酶二酚酶的抑制率如图 2 所示。                                         X  SD )
                                                               Table 4    Effect of plant salts on the proliferation activity of B16
                                                                      cells (proliferation rate, %,  X   SD )
                                                                                   (试样)/(g/L)
                                                               样品种类
                                                                          2.5       5.0      7.5      10.0
                                                                                                  bc
                                                                                        e
                                                                 原盐    77.91±0.73 e  25.57±0.37   19.58±0.74   5.26±0.51 d
                                                                                        c
                                                                 松盐    80.02±0.98 d  45.71±0.78   17.48±0.88   d  7.77±0.88 c
                                                                                        b
                                                                 竹盐    89.72±0.78 a  65.45±0.85   19.98±0.61   b  9.68±0.49 b
                                                                                                  bc
                                                                 梅盐    83.01±0.73 c  36.49±1.01   19.42±0.64   7.85±0.51 c
                                                                                        d
                                                                                        e
                                                               韩国竹盐 86.89±1.21 b  25.89±0.61   18.53±0.37   c  9.71±0.24 b
                                                                               f        a         a        a
                                                                熊果苷    72.49±0.37  71.44±0.28   68.85±0.37   72.01±0.85
              **表示与原盐比较,实验组存在极显著差异(p<0.01),n=3
                                                                   注:不同字母表示在相同浓度下差异显著(p<0.05),n=6。
              图 2    植物盐水溶液对体外酪氨酸酶二酚酶的抑制率
            Fig.  2    Inhibition rates of  tyrosinase  diphenolase  by plant
                   salt solutions in vitro                     2.4   植物盐对 B16 细胞内酪氨酸酶活性的影响
                                                                   酪氨酸酶是 B16 细胞合成黑色素的关键限速
                 由图 2 可知,与对酪氨酸酶单酚酶抑制率相比,
                                                               酶,其酶活是黑色素生成的重要影响因素,是衡量
            原盐和烤盐对酪氨酸酶二酚酶抑制率明显增强,并
                                                               功能因子美白功效的重要指标              [24] ,B16 细胞在各试
            且有一定的浓度效应关系,但最大抑制率不超过
                                                               样作用下胞内酪氨酸酶活性见表 5。
            30%。松盐、竹盐对酪氨酸酶二酚酶的抑制与对单

            酚酶的抑制效果相似,高浓度(50.0、100.0  g/L)                     表 5    植物盐对 B16 细胞内酪氨酸酶活性的影响(胞内酪
            的梅盐溶液的二酚酶抑制率与相同浓度的松盐和竹                                  氨酸酶活性,%, X       SD )
            盐溶液差别不大,松盐、竹盐、梅盐质量浓度 50.0 g/L                      Table 5    Tyrosinase activity of B16 cells under different samples
            时对二酚酶抑制率分别可达 99.9%、93.0%、92.0%。                           (Intracellular tyrosinase activity, %,  X  SD )
            植物盐与原盐相比,钾、锰等金属元素含量较多,                                                  (试样)/(g/L)
                                                                样品种类
            可能会对酪氨酸酶的蛋白质结构有一定影响;                                              2.5         5.0         7.5
                                                                                  d
            MUNJAL 等   [22] 发现,随着反应液的 pH 由 7.0 增加                 原盐       42.96±0.50    11.49±0.25   c  2.10±0.10   d
                                                                                  a
            到 8.5,酪氨酸酶活性从 90%降低到 30%左右,因                          松盐       60.34±0.43    32.76±0.43   b  11.70±0.10   b
                                                                                  c
            此,推测植物盐使得反应溶液变为碱性从而抑制了                                竹盐       56.90±0.43    32.47±0.25   b  11.74±0.17   b
                                                                                  e
            酪氨酸酶的活性。                                              梅盐       31.03±0.43    8.76±0.25   d  1.18±0.20   e
                                                                                  d
            2.3   植物盐对 B16 细胞增殖活性的影响                            韩国竹盐       42.96±0.50    11.55±0.15   c  4.68±0.07   c
                                                                                  b
                 黑色素是由黑色素细胞产生的,一般来说抑制                            熊果苷       57.90±0.50    46.70±0.50   a  38.36±0.43   a
            黑色素细胞的增殖可以减少黑色素的生成                    [23] 。小鼠         注:不同字母表示在相同浓度下差异显著(p<0.05),n=6。

            B16 黑色素细胞在不同浓度的样品中的增殖率如表
                                                                   由表 5 可知,在研究浓度范围内,各试样对 B16
            4 所示。由表 4 可知,B16 细胞在熊果苷的作用下
                                                               细胞的酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,酪氨酸
            其增殖率约为 70%,且在研究范围内无明显变化;
                                                               酶活性均显著降低,且呈一定的浓度效应关系。与
            质量浓度 2.5  g/L 以上的各种盐溶液均会抑制 B16
                                                               原盐相比,松盐、竹盐、韩国竹盐各组细胞酪氨酸
            细胞的生长,并且随着盐浓度的增加,细胞增殖率
                                                               酶活性均较高,说明原盐对 B16 细胞内酪氨酸酶的
            降低;5.0 g/L 以上植物盐对细胞增殖的抑制作用均
                                                               抑制作用强于这 3 种植物盐,而梅盐组在每个浓度
            优于熊果苷;7.5 g/L 以上的盐浓度会严重影响细胞
            的生长。在低质量浓度(2.5、5.0 g/L)范围内,松                       下细胞酪氨酸酶活性都最小,5.0 g/L 的梅盐组的细
            盐、竹盐、梅盐以及韩国竹盐中的 B16 细胞的增殖                          胞内酪氨酸酶活性仅有 8.76%,说明梅盐可以显著
            率均不低于原盐,因此与原盐相比,植物盐对 B16                           降低 B16 细胞内酪氨酸酶活性,且效果优于原盐和
            细胞没有明显的额外的细胞毒性,并且 5.0 g/L 的松                       阳性对照组熊果苷,可能是因为梅盐中的钾、铝元
            盐、竹盐、梅盐中细胞的增殖率远大于原盐,说明                             素含量丰富,且钙含量较低,影响了胞内酪氨酸酶
            这几种植物盐对盐环境的 B16 细胞有一定的保护作                          的活性。植物盐对胞内外酪氨酸酶活性影响的差异
            用,可能是植物盐中重金属铅含量较低,且含有丰                             可能是因为植物盐无法直接作用于 B16 细胞内的酪
            富的微量元素,从而对细胞的生长起到了保护与促                             氨酸酶,而是通过对细胞的不同作用,调节细胞生
            进作用。                                               长与蛋白表达从而影响酪氨酸酶的活性。
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