Page 156 - 《精细化工》2020年第5期
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·1006· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷
了酪氨酸酶二酚酶的活性 [21] 。各种盐溶液对酪氨酸 表 4 植物盐对 B16 细胞增殖活性的影响(增殖率,%,
酶二酚酶的抑制率如图 2 所示。 X SD )
Table 4 Effect of plant salts on the proliferation activity of B16
cells (proliferation rate, %, X SD )
(试样)/(g/L)
样品种类
2.5 5.0 7.5 10.0
bc
e
原盐 77.91±0.73 e 25.57±0.37 19.58±0.74 5.26±0.51 d
c
松盐 80.02±0.98 d 45.71±0.78 17.48±0.88 d 7.77±0.88 c
b
竹盐 89.72±0.78 a 65.45±0.85 19.98±0.61 b 9.68±0.49 b
bc
梅盐 83.01±0.73 c 36.49±1.01 19.42±0.64 7.85±0.51 c
d
e
韩国竹盐 86.89±1.21 b 25.89±0.61 18.53±0.37 c 9.71±0.24 b
f a a a
熊果苷 72.49±0.37 71.44±0.28 68.85±0.37 72.01±0.85
**表示与原盐比较,实验组存在极显著差异(p<0.01),n=3
注:不同字母表示在相同浓度下差异显著(p<0.05),n=6。
图 2 植物盐水溶液对体外酪氨酸酶二酚酶的抑制率
Fig. 2 Inhibition rates of tyrosinase diphenolase by plant
salt solutions in vitro 2.4 植物盐对 B16 细胞内酪氨酸酶活性的影响
酪氨酸酶是 B16 细胞合成黑色素的关键限速
由图 2 可知,与对酪氨酸酶单酚酶抑制率相比,
酶,其酶活是黑色素生成的重要影响因素,是衡量
原盐和烤盐对酪氨酸酶二酚酶抑制率明显增强,并
功能因子美白功效的重要指标 [24] ,B16 细胞在各试
且有一定的浓度效应关系,但最大抑制率不超过
样作用下胞内酪氨酸酶活性见表 5。
30%。松盐、竹盐对酪氨酸酶二酚酶的抑制与对单
酚酶的抑制效果相似,高浓度(50.0、100.0 g/L) 表 5 植物盐对 B16 细胞内酪氨酸酶活性的影响(胞内酪
的梅盐溶液的二酚酶抑制率与相同浓度的松盐和竹 氨酸酶活性,%, X SD )
盐溶液差别不大,松盐、竹盐、梅盐质量浓度 50.0 g/L Table 5 Tyrosinase activity of B16 cells under different samples
时对二酚酶抑制率分别可达 99.9%、93.0%、92.0%。 (Intracellular tyrosinase activity, %, X SD )
植物盐与原盐相比,钾、锰等金属元素含量较多, (试样)/(g/L)
样品种类
可能会对酪氨酸酶的蛋白质结构有一定影响; 2.5 5.0 7.5
d
MUNJAL 等 [22] 发现,随着反应液的 pH 由 7.0 增加 原盐 42.96±0.50 11.49±0.25 c 2.10±0.10 d
a
到 8.5,酪氨酸酶活性从 90%降低到 30%左右,因 松盐 60.34±0.43 32.76±0.43 b 11.70±0.10 b
c
此,推测植物盐使得反应溶液变为碱性从而抑制了 竹盐 56.90±0.43 32.47±0.25 b 11.74±0.17 b
e
酪氨酸酶的活性。 梅盐 31.03±0.43 8.76±0.25 d 1.18±0.20 e
d
2.3 植物盐对 B16 细胞增殖活性的影响 韩国竹盐 42.96±0.50 11.55±0.15 c 4.68±0.07 c
b
黑色素是由黑色素细胞产生的,一般来说抑制 熊果苷 57.90±0.50 46.70±0.50 a 38.36±0.43 a
黑色素细胞的增殖可以减少黑色素的生成 [23] 。小鼠 注:不同字母表示在相同浓度下差异显著(p<0.05),n=6。
B16 黑色素细胞在不同浓度的样品中的增殖率如表
由表 5 可知,在研究浓度范围内,各试样对 B16
4 所示。由表 4 可知,B16 细胞在熊果苷的作用下
细胞的酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,酪氨酸
其增殖率约为 70%,且在研究范围内无明显变化;
酶活性均显著降低,且呈一定的浓度效应关系。与
质量浓度 2.5 g/L 以上的各种盐溶液均会抑制 B16
原盐相比,松盐、竹盐、韩国竹盐各组细胞酪氨酸
细胞的生长,并且随着盐浓度的增加,细胞增殖率
酶活性均较高,说明原盐对 B16 细胞内酪氨酸酶的
降低;5.0 g/L 以上植物盐对细胞增殖的抑制作用均
抑制作用强于这 3 种植物盐,而梅盐组在每个浓度
优于熊果苷;7.5 g/L 以上的盐浓度会严重影响细胞
的生长。在低质量浓度(2.5、5.0 g/L)范围内,松 下细胞酪氨酸酶活性都最小,5.0 g/L 的梅盐组的细
盐、竹盐、梅盐以及韩国竹盐中的 B16 细胞的增殖 胞内酪氨酸酶活性仅有 8.76%,说明梅盐可以显著
率均不低于原盐,因此与原盐相比,植物盐对 B16 降低 B16 细胞内酪氨酸酶活性,且效果优于原盐和
细胞没有明显的额外的细胞毒性,并且 5.0 g/L 的松 阳性对照组熊果苷,可能是因为梅盐中的钾、铝元
盐、竹盐、梅盐中细胞的增殖率远大于原盐,说明 素含量丰富,且钙含量较低,影响了胞内酪氨酸酶
这几种植物盐对盐环境的 B16 细胞有一定的保护作 的活性。植物盐对胞内外酪氨酸酶活性影响的差异
用,可能是植物盐中重金属铅含量较低,且含有丰 可能是因为植物盐无法直接作用于 B16 细胞内的酪
富的微量元素,从而对细胞的生长起到了保护与促 氨酸酶,而是通过对细胞的不同作用,调节细胞生
进作用。 长与蛋白表达从而影响酪氨酸酶的活性。