Page 153 - 《精细化工》2020年第5期
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第 5 期                       严雅丽，等:  新型功能性植物盐美白功效的体外评价                                   ·1003·


                                                                                          [5]
                 竹盐是一种传统的植物盐，它起源于中国，民                          高 [15] 。本课题组通过专利方法 得到了新型植物盐
                                                  [1]
            间常用竹盐来治疗消化不良、止血消毒等 。竹盐                             松盐、梅盐、竹盐，并且将其作为研究对象，探究
            的传统生产方式是以普通海盐为原料，将其装入新                             它们对酪氨酸酶单酚酶及二酚酶活性的抑制效果，
            鲜竹筒中，用黄泥封口，在土窑中进行煅烧。在                              并且观察其对 B16 黑素瘤细胞各项指标的影响，包
            800~1400 ℃高温作用下，竹筒有机质燃烧，竹筒中                        括增殖率、胞内酪氨酸酶活、细胞迁移和细胞周期
            的一些无机成分进入海盐中，从而影响盐的性质。                             变化，为植物盐作为一种体外及胞内的无机酪氨酸
            一次煅烧后竹盐呈灰白色，反复煅烧 9 次后可以得                           酶抑制剂提供理论和实验依据，为植物盐在美白中
            到精品紫竹盐。目前，关于竹盐的研究主要集中在                             的应用提供参考。
            其健康功效，例如：消炎、抗过敏、抗氧化、抗癌等                    [2-4] ，
            而美白方面的研究较少。新型功能性植物盐是指从                             1   实验部分
            植物体中提取的有效成分与普通海盐经过特殊烤制
                                                               1.1   材料、试剂与仪器
            工艺后形成的含有丰富矿物质的一种功能盐，它对
                                                                   植物功能盐，本课题组参考文献[5]方法，利用
            人体微量元素平衡、机能调节及健康具有一定促进
                                                               竹、梅、松的提取物与普通海盐，通过高温烤制后
            作用，它的生产方式与传统竹盐不同，可利用不同
                                                               得到紫色的竹盐、蓝色的梅盐以及粉色的松盐；竹
            的植物提取物种类、通过不同的配方工艺得到具有                             叶提取物（竹叶黄酮），浙江圣氏生物科技有限公司
                             [5]
            不同特性的植物盐 ，如：利用松提取物或梅提取
                                                               （安吉）；松针提取物，陕西清雅生物科技有限公司；
            物与盐在高温下共同烤制得到松盐与梅盐。
                                                               梅枝提取物，杭州尤美特生物科技有限公司；原盐，
                 酪氨酸酶是一种金属氧化还原酶，是黑色素生
                                                               日晒海盐，江苏金桥制盐有限公司；烤盐，经高温
            成的主要限速酶。酪氨酸和多巴都可以在酪氨酸酶
                                                               （850 ℃）烤制过的日晒海盐；韩国紫竹盐，仁山
            的作用下氧化生成多巴醌，多巴醌可通过两条独立                             竹盐有限责任公司；-熊果苷、Triton X-100、二甲
                                 [6]
            的路径最后生成黑色素 。酪氨酸酶广泛分布于动
                                                               基亚砜（DMSO），AR，上海阿拉丁试剂有限公司。
            植物、微生物及人体中，在微生物及动物体内一般
                                                                   小鼠 B16 黑素瘤细胞，中国科学院上海细胞生
            称为酪氨酸酶，而在植物体中称为多酚氧化酶。酪
                                                               物所；RPMI-1640 培养液，美国 Gibco 公司；胎牛
            氨酸酶的活性影响着果蔬的褐变和人体 B16 细胞黑
                       [7]
            色素的形成 ，对果蔬保鲜、加工及人体肤色有着                             血清，美国 ThermoFisher 公司；胰蛋白酶、青霉素
                                                               -链霉素溶液、磷酸缓冲液（PBS），AR，杭州科易
            重要影响。
                                                               生物科技有限公司；DNA 含量检测试剂盒（细胞周
                 目前，酪氨酸酶抑制剂的研究主要集中在天然
                                                               期）、左旋多巴（L-DOPA）、酪氨酸、酪氨酸酶（25 kU，
            提取物和有机合成物方面，其中竹叶黄酮、肉豆蔻
                                                               ≥500  U/mg），AR，北京索莱宝科技有限公司；四
            提取物、柑橘纯露等天然产物对酪氨酸酶活性有显
            著的抑制作用       [8-10] ，一些人工合成的黄酮衍生物、                 甲基偶氮唑蓝（MTT，染色液质量浓度为 5  g/L），
            查尔酮衍生物等也能高效抑制酪氨酸酶活性                     [11-12] 。  北京雷根生物技术有限公司。
                                                                   QSH-VTF-1400T 管式电阻炉，上海全硕电炉有
            酪氨酸酶抑制剂的研究大多集中于有机物，而对无
            机抑制物研究甚少。芶琳等             [13] 发现，硫代硫酸钠能            限公司；PB-10 标准型酸度计，德国赛多利斯集团；
            显著抑制酪氨酸酶活性，IC 50 为 8.80 mmol/L，推测                  Eon 酶标仪，美国 BioTek 公司；LDZX-50KBS 立式
            其与酶结合后可能导致酶分子构象的改变，从而降                             高压灭菌锅，上海申安医疗器械厂；CP-ST50A 型
            低了酶的活性。邢蕊          [14] 研究了多金属氧酸盐对蘑菇               二氧化碳培养箱，长沙长锦科技有限公司；SW-CJ-F
            酪氨酸酶的抑制作用和机理，发现它们对酪氨酸酶                             超净工作台，上海博迅实业有限公司；CKX41 倒置
            均有明显的抑制效果，同时过渡金属取代的磷钼酸                             显微镜，日本 OLYMPUS 光学工业株式会社；BD
            盐 PMo 11 Cu 和 PMo 11 Fe 还可以抑制 B16 细胞的增             FACSCalibur 流式细胞仪，美国 BD 公司。
            殖、胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成。除此之外，                             1.2   方法
            PMo 11 Fe 还可以显著地减缓莲藕切片的褐变度，抑                       1.2.1    新型功能性植物盐的制备
            制多酚氧化酶（PPO）的活性，增强过氧化物酶                                 新型竹盐的制备：将竹叶黄酮提取物与原盐按
            （POD）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性，对果                           质量比 20∶100 混合后放入刚玉坩埚，置于管式电
            蔬保鲜有一定作用。                                          阻炉中，在常压下以 10 ℃/min 的速率升温，升至
                 竹盐具有长久的食用习惯，一些泡菜制品和酱                          950 ℃后保温 2 h，然后取出坩埚自然降温冷却，得
            油常添加竹盐作为辅料。与普通食盐相比，竹盐具                             到紫色的新型竹盐。
            有更加丰富的元素组成，其中钾、镁等元素含量较                                 新型松盐的制备：将松针提取物与原盐按质量
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