Page 80 - 《精细化工》2021年第10期
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·2010· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷
场位置移动,表明 Zn-L 与氨基葡萄糖分子之间确实
存在氢键的相互作用 [30-31] ,这可以归因于氨基葡萄
糖分子进入 Zn-L 空腔内部,与金属-有机笼状化合
物 Zn-L 上的多个酰胺基团形成了氢键,进而导致荧
光显著淬灭。
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图 9 氨基葡萄糖的 HNMR 谱图(a);在 Zn-L 中加入
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两倍量的氨基葡萄糖的 HNMR 谱图(b);Zn-L
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的 HNMR 谱图(c)
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Fig. 9 HNMR spectra of glucosamine (a), Zn-L with
addition of 2-fold glucosamine (b) and Zn-L (c)
2.4 Zn-L 应用于细胞成像
为了考察 Zn-L 在细胞内对氨基葡萄糖分子识
别的荧光成像效果,采用 AlamaBlue 细胞毒性试剂
盒检测了不同浓度 Zn-L 对 Hela 细胞的细胞毒性 [32] ,
以确定所需探针浓度下细胞存活的可持续性。分别
在含有浓度为 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、5.0 和
10.0 μmol/L 的 Zn-L 培养液中进行 1 h 的细胞毒性
(MTT)实验,结果见图 10。
图 11 Zn-L(1.0 μmol/L)分别与浓度为 0、1.0、10.0、
100.0 和 1000.0 μmol/L 的氨基葡萄糖孵育的 Hela
细胞相互作用 1 h 后的荧光成像图
Fig. 11 Fluorescence imaging pictures of Hela cells treated
with Zn-L (1.0 μmol/L) incubation with different
concentrations of glucosamine (0, 1.0, 10.0, 100.0
and 1000.0 μmol/L) for 1 h, respectively
如图 11 所示,在分别含有 0、1.0、10.0、100.0
和 1000.0 μmol/L 的氨基葡萄糖培养基孵化后的
图 10 金属-有机笼状化合物 Zn-L 的 MTT 图
Fig. 10 MTT diagram of metal-organic cage Zn-L Hela 细胞中加入 1.0 μmol/L 的 Zn-L,结果显示,1 h
后随着 Hela 细胞中氨基葡萄糖浓度的增加,细胞中
如图 10 所示,Zn-L 浓度低于 10.0 μmol/L 时, Zn-L 的荧光强度逐渐降低。在含有 10.0 μmol/L 氨
细胞活性均大于 90%,表明在此条件下 Zn-L 的细胞 基葡萄糖培养基中孵化后的 Hela 细胞荧光强度已经
毒性较小。因此,本文选取 1.0 μmol/L 为无毒剂量 显著下降,在含有 1000.0 μmol/L 氨基葡萄糖培养基
探究 Zn-L 在活细胞中荧光成像的浓度,并采用双光 中孵化后的 Hela 细胞已基本观察不到荧光。细胞成
子激光共聚焦显微镜考察其与氨基葡萄糖在 Hela细 像实验结果表明,Zn-L 可以渗透进细胞膜,并且能
胞中的相互作用,结果见图 11。 够在细胞中有效地识别氨基葡萄糖分子。