Page 162 - 《精细化工》2021年第4期
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·796·                             精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 38 卷

                 汉麻（Cannabis sativa）又称作火麻、线麻、寒                 利用方面提供理论依据。
            麻，属荨麻目双子叶植物纲，起源于中亚，属雌雄
                                                               1   实验部分
            异株植物，具有“国纺源头，万年衣祖”之称，有吸
            湿、散热、抑菌、透气等多种功能。随着科技进步，
                                                               1.1   材料与仪器
            汉麻中已经被发现具有 120 余种活性成分，称为大                              汉麻叶，黑龙江（孙吴）汉麻产业园，THC 质
            麻素，其中以四氢大麻酚（THC）和大麻二酚（CBD）                         量分数低于 0.3%，符合国家相关规定。柱料 A
                             [1]
            等为主要活性成分 。THC 具有致幻成瘾作用，这                           （Seplite  LX-100B，典型粒径范围 0.4~1.2 mm）、柱
                                                                      ®
            是许多国家禁种大麻的惟一原因，而 CBD 是工业大                          料 B（Seplite  LXB-C02，典型粒径范围 50~100 μm），
                                                                         ®
            麻中的无毒非成瘾致幻性活性物质，被称为“反毒                             西安蓝晓科技新材料股份有限公司；氟西汀，礼来
                       [2]
            品化合物” 。中国工业大麻产业已从刚开始的食                             苏州制药有限公司；甲醇、无水乙醇（分析纯）、
            品生产加工逐渐向工业大麻花叶提取 CBD 等有效                           CBD 标准品，美国 SIGMA-ALDRICH 公司；3 周龄
            成分的综合开发利用方向迈进。                                     C57BL/6 雄性小鼠（合格证：No.1103241911），西
                 目前，对大麻素提取的常用方法包括有机溶剂                          安交通大学医学实验动物中心；mRNA 提取试剂盒、
                                                 [5]
                [3]
                                   [4]
            浸提 、超临界 CO 2 萃取 、膜分离技术 等。郝红                        反转录试剂盒（SYBR green PCR）、RT-PCR 试剂盒，
                [6]
            江等 利用 7 倍量体积分数 60%乙醇热回流提取汉                         中国宝生物工程有限公司；一级水由实验室制备。
            麻叶 3 次，2 h/次，得到 CBD 最佳工艺，此时大麻                          APPS MV 全自动色谱纯化系统，利穗科技（苏
            素浸膏得率 0.134%，CBD 占浸膏含量 2.89%；                      州）有限公司；AR1140 电子分析天平，Sartorius
                        [7]
            MORENO 等 通过超临界 CO 2 技术，萃取压力 130                    公司；NDB10 580 mL 色谱柱，无锡天演生物技术
            MPa、乙醇作共溶剂，从新西兰工业大麻花蕾中获                            有限公司；BXK 16/100 色谱柱，博格隆（上海）生
            得 CBD 最高含量为 449 mg/g 的提取物；郑玲等                [8]   物技术有限公司；HA121-50-01 超临界 CO 2 设备，
                                                               江苏华安科研仪器有限公司；RET 型磁力搅拌器，
            采用膜分离技术优化 CBD 工业提取，通过甲醇提
                                                               IKA 德国公司；Scientific Sorvall Legend Micro 17
            取、水沉、醇水系统 50 ℃热回流提取 5 h，水沉结
                                                               离心机，赛默飞世尔科技（中国）有限公司；1100
            晶后可以得到纯度高于 60%的 CBD 粗品。虽然获得
                                                               Series HPLC 仪，Agilent 公司；Quant Studio 3D  型
            大麻素的方式较多，但 CBD 纯度均约 60%。目前，
                                                               数字 PCR 仪，美国 Life technologies 公司；XR-XG201
            中国对 CBD 提取和功能研究较少，多用树脂吸附方
                                                               高架十字迷宫，上海欣软信息科技有限公司。
            法，然后通过减压浓缩得到 CBD 粗品，其含量在
                                                               1.2    方法
            60%以下，也有利用膜分离技术获得 CBD 含量超过
                                                               1.2.1   汉麻浸膏的粗提取及预处理
            60%的大麻二酚粗品         [9-11] 。临床研究表明，CBD 可
                                                                   将汉麻叶在 120 ℃下烘干 2 h，粉碎后过 100 目
            快速透过血脑屏障，可作为一种由压力引起的神经
                                                               筛；取 500 g 粉末于萃取釜中，萃取压力 20 MPa，
            系统疾病治疗药物，可有效地治疗关节炎、多发性                             分离压力 8 MPa，温度 60 ℃，提取 1.5~2.0 h，得到
            硬化症、慢性疼痛、精神分裂症和癫痫                [12-16] 。SARTIM   汉麻浸膏    [19-20] 。以 10 倍体积量加入冰水对浸膏进行
            等 [17] 通过小鼠强迫游泳实验表明，CBD 能降低小鼠
                                                               洗涤，去除水溶物质，反复洗涤 3 次；倒出水后，加
            静止不动的时间，进而证明 CBD 可能具有抗抑郁作
                                                               入 10 倍体积量无水乙醇溶解浸膏，超声辅助（功率
            用。LINGE 等    [18] 探究 CBD 对不同种鼠抑郁模型的                300 W）溶解；最后用滤纸过滤醇溶液除去固体杂质，
            影响，并探究可能激活 BDNF-TrkB 的信号通路使突                       得到浅黄色的 CBD 待上样醇溶液（简称处理液）。
            触可塑性发生。随着 CBD 各种生物活性和医用价值                          1.2.2  CBD 的初步纯化
            逐渐呈现出来，获取高纯度 CBD 成为研究的热点。                              柱料 A 使用无水乙醇浸泡 2 h 后，用纯水冲洗
                 本研究建立从汉麻叶中高效提取高纯度 CBD                         至无醇味，采用湿法将柱料 A 灌入 NDB10 580 mL
            的方法，以慢性不可预测的轻度应激（CUMS）模                            柱（柱长 200 mm，内径 60 mm），以 10 BV/h（96 mL/min）
            型小鼠为受试对象，通过连续灌胃给予小鼠氟西汀                             的流速用纯水洗涤 3 个柱体积。取 1.2.1 节处理液
            （Fluoxetine）及 CBD 8 周，观测小鼠的焦虑症状，                   50 mL 上样，以 0.3 BV/h（3 mL/min）速度上样。
            以及检测肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1                          流动相 A为水、B为乙醇，流速 2 BV/h（20 mL/min），
            （IL-1β）和一氧化氮合酶（iNos）的 mRNA 水平，                     检测波长 220 nm，洗脱程序参照表 1。当 UV（220 nm）
            探究 CBD 对小鼠的抑郁行为和神经系统炎症反应                           数值大于 20 mAU 收集洗脱峰并检测其 CBD 含量，
            的影响，为含有 CBD 成分的食品在药食同源开发和                          对较大洗脱峰采用前部、中部和后部的方式收集。
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