Page 81 - 《精细化工》2021年第6期
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第 6 期 郑 磊,等: 等离子体引发 PS 微孔板接枝 SMCC 及蛋白吸附性能 ·1143·
1.2.4 蛋白吸附 PS-g-SMCC 与 PS-g-NH 2 相比,在 1224、1005、974
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将 BSA 用 PBS 缓冲液(pH=7.4)配制成质量 cm 处出现了新的吸收峰,1224 cm 处为新生成基
浓度为 5 mg/L 的溶液,浸泡改性后的微孔板,每孔 团 O==C—NH—C==O 中 C—N 的伸缩振动峰,1005
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100 μL,37 ℃培养 1 h。用含有质量分数 0.05%吐 和 974 cm 处为 SMCC 中六元环上的 C—C 骨架振
温-20 的 PBS 缓冲液(pH=7.4)洗涤微孔板 5 次以 动峰。结果表明,PS 在接枝丙烯酰胺后,通过氨基
上,拍干后,取 BSA-HRP〔V(BSA-HRP)∶V(PBS) 与 SMCC 的反应接枝上了 SMCC。
=1∶1000。其中,BSA-HRP 0.1 mL〕抗体加到微孔
板中,每孔 100 μL,在 37 ℃下温育 30 min,用含
有质量分数 0.05%吐温-20 的 PBS 缓冲液洗涤 5 次。
每孔加入 TMB 显色液 100 μL,37 ℃避光显色 15 min
后,每孔再加入 50 μL 浓度 2 mol/L 的 H 2 SO 4 终止
液。取出 PS-g-SMCC 微孔板测其在波长 450 nm 下
的 OD 值后,与标准曲线对比得到样品表面吸附蛋
白的质量,根据式(1)计算 PS-g-SMCC 微孔板的
蛋白吸附量。
V
q (1)
S 图 1 PS(a)、PS-g-NH 2 (b)、PS-g-SMCC(c)和 SMCC
2
式中:q 为蛋白吸附量,ng/cm ; 为每孔吸附蛋白 (d)的 FTIR 谱图
的质量浓度,mg/L;V 为每孔蛋白溶液体积,取值为 Fig. 1 FTIR spectra of PS (a), PS-g-NH 2 (b), PS-g-SMCC
2
100 μL;S 为 96 孔板的孔底面积,取值为 0.32 cm 。 (c) and SMCC (d)
1.3 结构表征与性能测试 2.2 表面润湿性分析
水接触角:以去离子水为测试液,在室温大气
等离子体处理不同时间及不同功率对应的
环境下进行静态水接触角测试,每个样品选取 3 个
PS-g-NH 2 微孔板水接触角(WCA)的变化曲线如图
孔,在孔底内表面中心进行水接触角测试,取平均值。
2 所示。
FTIR:采 用 溴化钾压片法对 PS 、 PS-g-NH 2 与
PS-g-SMCC 进行 FTIR 测试,波数范围 4000~400
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cm ,分辨率 4 cm ,扫描次数 32 次。EDS:加速
电压 20 kV,测试前样品用离子溅射仪喷金 30 s。
XPS:X 射线源为 Al Kα微聚集单色器,样品区域
60 mm×60 mm,离子枪能量范围 100~4000 eV,功率
72 W,分辨率 0.4 eV。OD 值测试条件:波长 450 nm。
2 结果与讨论
2.1 FTIR 分析
通过 FTIR 分析了接枝前后 PS 微孔板表面的结
构变化,PS、PS-g-NH 2 、PS-g-SMCC 和 SMCC 的
FTIR 谱图如图 1 所示。
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未经处理的 PS 微孔板在 3025 cm 处的峰对应
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苯环中 C—H 键的伸缩振动,1601 和 1492 cm 处
的谱带是苯环骨架的伸缩振动特征峰。与未处理的
PS 相比,经等 离子体处理 后接枝氨基 的样品
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PS-g-NH 2 在 3436 cm 处出现了较宽的吸收峰,为
O—H 与 N—H 的伸缩振动峰,同时在 1638 和
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1562 cm 处也出现了新的吸收峰,1638 cm 处为
酰胺Ⅰ带的 C==O 伸缩振动、N—H 弯曲振动以及 C— 图 2 不同等离子体处理时间(a)和处理功率(b)的
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N 伸缩振动的耦合谱带,1562 cm 处为酰胺Ⅱ带的 PS-g-NH 2 水接触角
Fig. 2 Water contact angles of PS-g-NH 2 for different
N—H 弯曲振动与 C—N 伸缩振动的耦合谱带。由此 plasma treatment time (a) and different plasma
可见,丙 烯 酰胺已经 接 枝 到 PS 微孔板上。 treatment powers (b)