Page 81 - 《精细化工》2021年第6期
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第 6 期                 郑   磊,等:  等离子体引发 PS 微孔板接枝 SMCC 及蛋白吸附性能                            ·1143·


            1.2.4   蛋白吸附                                       PS-g-SMCC 与 PS-g-NH 2 相比,在 1224、1005、974
                                                                                               –1
                                                                 –1
                 将 BSA 用 PBS 缓冲液(pH=7.4)配制成质量                  cm 处出现了新的吸收峰,1224 cm 处为新生成基
            浓度为 5 mg/L 的溶液,浸泡改性后的微孔板,每孔                        团 O==C—NH—C==O 中 C—N 的伸缩振动峰,1005
                                                                       –1
            100 μL,37 ℃培养 1 h。用含有质量分数 0.05%吐                   和 974 cm 处为 SMCC 中六元环上的 C—C 骨架振
            温-20 的 PBS 缓冲液(pH=7.4)洗涤微孔板 5 次以                   动峰。结果表明,PS 在接枝丙烯酰胺后,通过氨基
            上,拍干后,取 BSA-HRP〔V(BSA-HRP)∶V(PBS)                  与 SMCC 的反应接枝上了 SMCC。
            =1∶1000。其中,BSA-HRP 0.1 mL〕抗体加到微孔
            板中,每孔 100  μL,在 37 ℃下温育 30 min,用含
            有质量分数 0.05%吐温-20 的 PBS 缓冲液洗涤 5 次。
            每孔加入 TMB 显色液 100 μL,37 ℃避光显色 15 min
            后,每孔再加入 50  μL 浓度 2 mol/L 的 H 2 SO 4 终止
            液。取出 PS-g-SMCC 微孔板测其在波长 450 nm 下
            的 OD 值后,与标准曲线对比得到样品表面吸附蛋
            白的质量,根据式(1)计算 PS-g-SMCC 微孔板的
            蛋白吸附量。
                                    V
                                q                    (1)
                                    S                          图 1  PS(a)、PS-g-NH 2 (b)、PS-g-SMCC(c)和 SMCC
                                       2
            式中:q 为蛋白吸附量,ng/cm ; 为每孔吸附蛋白                           (d)的 FTIR 谱图
            的质量浓度,mg/L;V 为每孔蛋白溶液体积,取值为                         Fig. 1    FTIR spectra of PS (a), PS-g-NH 2  (b), PS-g-SMCC
                                                        2
            100 μL;S 为 96 孔板的孔底面积,取值为 0.32 cm 。                      (c) and SMCC (d)

            1.3   结构表征与性能测试                                    2.2    表面润湿性分析
                 水接触角:以去离子水为测试液,在室温大气
                                                                   等离子体处理不同时间及不同功率对应的
            环境下进行静态水接触角测试,每个样品选取 3 个
                                                               PS-g-NH 2 微孔板水接触角(WCA)的变化曲线如图
            孔,在孔底内表面中心进行水接触角测试,取平均值。
                                                               2 所示。
            FTIR:采 用 溴化钾压片法对 PS 、 PS-g-NH 2 与
            PS-g-SMCC 进行 FTIR 测试,波数范围 4000~400
                             –1
               –1
            cm ,分辨率 4 cm ,扫描次数 32 次。EDS:加速
            电压 20 kV,测试前样品用离子溅射仪喷金 30 s。
            XPS:X 射线源为 Al Kα微聚集单色器,样品区域
            60 mm×60 mm,离子枪能量范围 100~4000 eV,功率
            72 W,分辨率 0.4 eV。OD 值测试条件:波长 450 nm。

            2   结果与讨论


            2.1  FTIR 分析
                 通过 FTIR 分析了接枝前后 PS 微孔板表面的结
            构变化,PS、PS-g-NH 2 、PS-g-SMCC 和 SMCC 的
            FTIR 谱图如图 1 所示。
                                              –1
                 未经处理的 PS 微孔板在 3025 cm 处的峰对应
                                                       –1
            苯环中 C—H 键的伸缩振动,1601 和 1492 cm 处
            的谱带是苯环骨架的伸缩振动特征峰。与未处理的
            PS 相比,经等 离子体处理 后接枝氨基 的样品
                                –1
            PS-g-NH 2 在 3436 cm 处出现了较宽的吸收峰,为
            O—H 与 N—H 的伸缩振动峰,同时在 1638 和
                    –1
                                                     –1
            1562 cm 处也出现了新的吸收峰,1638 cm 处为
            酰胺Ⅰ带的 C==O 伸缩振动、N—H 弯曲振动以及 C—                      图 2   不同等离子体处理时间(a)和处理功率(b)的
                                          –1
            N 伸缩振动的耦合谱带,1562 cm 处为酰胺Ⅱ带的                              PS-g-NH 2 水接触角
                                                               Fig. 2    Water contact angles of PS-g-NH 2  for different
            N—H 弯曲振动与 C—N 伸缩振动的耦合谱带。由此                               plasma treatment time (a) and different plasma
            可见,丙 烯 酰胺已经 接 枝 到 PS 微孔板上。                               treatment powers (b)
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