Page 90 - 《精细化工》2021年第7期

·1372· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷

表 1 320 例样本检测结果 型冠状病毒 SARS-CoV-2 双光子荧光检测试剂盒
Table 1 Detection results for 320 samples （荧光免疫层析法）与上海之江生物科技股份有限
对照试剂 公司生产的新型冠状病毒 SARS-CoV-2 核酸检测试
考核试剂 合计
阳性（+） 阴性（–）
剂盒（PCR 法）和广州万孚生物技术股份有限公司
阳性（+） 98 1 99
生产的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测试剂
阴性（–） 1 220 221
盒（胶体金法）检测结果一致性好。
合计 99 221 320
2.2.3 TPICS/TPICK 与 PCR 法、胶体金法检测操作
时间的比较
由表 1 可知，对于阴阳性符合率、总符合率及
TPICS/TPICK、PCR 法（之江）和胶体金法（万
其 95%置信区间来说，阳性符合率：98/(98+1)×100%= 孚）3 种试剂盒检测血样所需的操作时间如表 3 所
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98.99% ， 95% 置信 区间 ： p±1.96×[p(1–p)/n] =
示。由表 3 可知，3 种试剂盒的检测操作时间（平
[97.89%, 100.00%]。其中，p 为阳性符合率、阴性符
均）分别为 8.8、61.2 和 21.5 min，PCR 法操作时间
合率或总符合率，若 p 值为 100%，则取 p=99.99%
长达 60 min 以上，这主要是由于病毒核酸检测分两
进行分析。阴性符合率：220/(1+220)×100%=99.55%， 大环节：样本核酸提取和 PCR（聚合酶链式反应）
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95%置信区间：p±1.96×[p(1–p)/n] =[98.81%, 100.00%]；
扩增检测，前者原本需十几分钟，后者需时更长，
总体符合率：(98+220)/(98+1+1+220)×100%=99.38%， 操作步骤多，繁琐耗时。TPICS/TPICK 检测操作时
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95%置信区间：p±1.96×[p(1–p)/n] =[98.52%, 100.00%]。
间一般不到 10 min。
对于一致性系数 Kappa 值（K）来说，K=0.972
（>0.75）。对于灵敏度（SE）、特异度（SP）和准确 表 3 3 种试剂盒各次测定所需时间
度（AC）来说，SE=98/(98+1)×100%=98.99%，SP= Table 3 Detection time for three kits
220/(1+220)×100%=99.55%，AC=(98+220)/320×100%= 检测方法 各次检测所需操作时间/min
99.38%。 1 2 3 4 5
2.2.2 与新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测试 TPICK 8.5 9.0 8.7 9.1 8.8
剂盒（胶体金法）的比较 PCR 法 61.3 60.2 61.6 62.1 60.8
胶体金法 21.6 21.2 21.8 21.4 21.7
测试结果如表 2 所示。
2.3 荧光细胞成像
表 2 320 例样本检测结果
Table 2 Detection results for 320 samples LP 成功标记新型冠状病毒 N-蛋白单克隆抗体，
如图 3 所示。
对照试剂
考核试剂 合计
阳性（+） 阴性（–）
阳性（+） 103 1 104
阴性（–） 2 214 216
合计 105 215 320

由表 2 可知，对于阴阳性符合率、总符合率及
其 95%置信区间来说，阳性符合率：103/(103+2)× 图 3 用 LP 标记的新冠病毒 N-蛋白单克隆抗体染色未感
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100%=98.10%，95%置信区间：p±1.96×[p(1–p)/n] = 染（a）和感染病毒细胞的单光子（b）、双光子（c）
[96.60%, 99.60%]；阴性符合率：214/(1+214)×100%= 荧光照片
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99.53%，95%置信区间：p±1.96×[p(1–p)/n] =[98.78%, Fig. 3 Uninfected (a), infected one-photon (b) and two-
photon (c) fluorescence microscopy images of
100.00%]；总体符合率：(103+214)/(103+1+2+214)× green monkey kidney (Vero) cells stained with LP
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100%=99.06%，95%置信区间：p±1.96×[p(1–p)/n] = labeled anti-SARS-CoV-2 N-protein monoclonal
antibody
[98.00%,100.00%]。对于一致性系数 K 来说，K= 0.975
（>0.75）。对于 SE、SP 和 AC 来说，SE=103/(103+ 由图 3 可知，未感染病毒的 Vero 细胞未见明显
2)×100%=98.10%，SP=214/(1+214)×100%=99.53%， 荧光，新冠病毒感染 Vero 细胞胞浆可见绿色特异荧
AC=(103+214)/320×100%=99.06%。 光。图 3c 比图 3b 要清晰得多，整个细胞的轮廓清
结果显示，待考核试剂与对照试剂的检测结果 晰可见、形态鲜活，且能看到细胞的立体三维结构，
不存在统计学意义上的差异，一致性分析 K>0.75， 细胞内外对比鲜明，层次感很强；而单光子荧光照
两种试剂的检测结果具有高度一致性。可以认为新 片的细胞轮廓显得很模糊，根本看不到细胞的立体