Page 85 - 《精细化工》2021年第7期

第 38 卷第 7 期 精 细 化 工 Vol.38, No.7
202 1 年 7 月 FINE CHEMICALS July 2021

功能材料
用于新型冠状病毒快速诊断的荧光免疫层析

试纸条的制备及其细胞成像

1
1
黄池宝 1,4 ，杨 斌 2,3 ，康 帅 ，杨 丽 2,3 ，吕国岭 ，余福勋 2,3*
（1. 遵义师范学院 信息工程学院，贵州 遵义 563002；2. 贵州省人民医院中心实验室，贵州 贵阳
550002；3. 贵州省人民医院卫健委肺脏免疫性疾病重点实验室，贵州 贵阳 550002；4. 韶关大学 英东
生物与农业学院，广东 韶关 512005）

摘要：合成了双光子荧光标记探针 LP 并对其结构进行了表征，通过 LP 标记 SARS-CoV-2 的 N-蛋白抗原（Ag）
获得 LP-Ag，并将 LP-Ag 制成免疫层析试纸条（TPICS）/试剂盒（TPICK）。临床应用研究表明，与核酸法
（PCR）/胶体金法比较，TPICS 的阳性符合率、阴性符合率和总符合率分别为 98.99%/98.10%、99.55%/99.53%
和 99.38%/99.06%，其一致性系数 Kappa 值（K）为 0.972/0.975，灵敏度、特异性和准确度分别为 98.99%/98.10%、
99.55%/99.53%和 99.38%/99.06%。检测试剂与参比试剂检测结果一致（K>0.75），无统计学差异。TPICS/TPICK
检测所用稀释血样一般为 25~50 μL（合全血样 5~10 μL），检测时间在 10 min 内，既避免了核酸法操作繁琐与检
测周期过长的缺点，又克服了胶体金法因吸附官能团脱落而导致的不稳定性，具有良好的应用价值。LP-Ag 可
用于细胞中 SARS-CoV-2 成像以鉴定其阴阳性。
关键词：COVID-19/SARS-CoV-2；N-蛋白；免疫层析试纸条；双光子荧光；试剂盒；功能材料
中图分类号：R563.1；O657.3 文献标识码：A
文章编号：1003-5214 (2021) 07-1367-07 开放科学 (资源服务) 标识码 (OSID)：

Preparation of two-photon fluorescence immunochromatographic strip

for rapid diagnosis of SARS-CoV-2 and cell-imaging

1
1,4
2,3
1
2,3
HUANG Chibao , YANG Bin , KANG Shuai , YANG Li , LYU Guoling , YU Fuxun 2,3*
（1. School of Information Engineering, Zunyi Normal University, Zunyi 563002, Guizhou, China; 2. Department of
Central Laboratory, Guizhou Provincial People's Hospital, Guiyang 550002, Guizhou, China; 3. NHC Key Laboratory
of Pulmonary Immunological Diseases, Guizhou Provincial People's Hospital, Guiyang 550002, Guizhou, China;
4. Henry Fok School of Biology and Agriculture, Shaoguan University, Shaoguan 512005, Guangdong, China）
Abstract: A two-photon fluorescence labelling probe LP was synthesized and characterized. LP-Ag was
obtained by labelling the N protein antigen (Ag) of SARS-CoV-2 with LP, and then the LP-Ag was made
into an immunochromatographic test strip (TPICS)/kit (TPICK). Clinical application results showed that
compared with those of nucleic acid method (PCR)/colloidal gold method, the positive coincidence rate,
negative coincidence rate and total coincidence rate of TPICS were 98.99%/98.10%, 99.55%/99.53% and
99.38%/99.06%, respectively. The consistency coefficient Kappa value (K) was 0.972/0.975. The
sensitivity, specificity and accuracy were 98.99%/98.10%, 99.55%/99.53% and 99.38%/99.06%,
respectively. The results of detection reagent and reference reagents were consistent (K > 0.75) without
statistical difference. The dilute blood sample used in TPICS/TPICK detection was generally 25~50 μL
(whole blood sample 5~10 μL), and the test time was within 10 min. This method avoided the

收稿日期：2021-03-02; 定用日期：2021-03-09; DOI: 10.13550/j.jxhg.20210211
基金项目：贵州省高层次创新型人才培养计划项目——“百”层次人才（[2016]5683）；贵州省科技支撑计划项目（[2020]4Y001，
[2020]4Y004，[2018]2785）；贵州省教育厅自然科学研究项目（KY[2019]068，KY[2018]028）；国家自然科学基金（21562050，
[2019]81960001）；贵州省第八批科技创新人才团队建设专项基金[（2015）4007]；贵州省科学技术基金项目（黔科合 J 字[2015]2146）；
贵州省教育厅自然科学重点研究项目（黔教合 KY 字[2014]296）
作者简介：黄池宝（1969—），男，教授，E-mail: huangchibao@163.com。联系人：余福勋（1965—），男，教授，E-mail: yufuxun@126.com。