Page 91 - 《精细化工》2022年第9期

第 9 期 刘 伟，等: 壳聚糖基聚集诱导发光复合物用于肝素检测 ·1809·

从图 7 可看出，复合物的荧光强度在 10 min 内
基本保持不变，说明体系具有较好的荧光稳定性。
由于壳聚糖季铵盐与 TPE-COOH 是通过静电力相
互作用，因此二者结合较快，复合物可以在 1 min
之内完成，并且在较长的时间里都能够保持较为稳
定的荧光强度。这种复合物的荧光稳定性和快速开
启荧光功能为肝素检测奠定了较好的基础。

注：TPE-COOH 浓度 25 μmol/L；pH=7.4；激发波长 340 nm；
激发狭缝/发射狭缝 5 nm/5 nm
图 5 壳聚糖季铵盐浓度对复合物荧光发射光谱（a）及
最大发射强度的影响（b）
Fig. 5 Effects of concentrations of chitosan quaternary
ammonium salt on emission spectra of complex
fluorescence (a) and maximum emission intensity (b)

通过 Zeta 电位可以进一步证实壳聚糖季铵盐和
TPE-COOH 通过静电力相结合的设想。图 6 为在固
定壳聚糖季铵盐浓度下，改变 TPE-COOH 浓度对复
合物 Zeta 电位的影响。从图 6 可以看出，不加
TPE-COOH 时，壳聚糖季铵盐溶液电位为 44.2 mV。
但是，随着复合物中 TPE-COOH 浓度的不断增加(从
0 增至 36 μmol/L)，复合物的 Zeta 电位逐渐减小，
从 44.2 mV 降到-5.13 mV。特别地，当 TPE-COOH
浓度为 24~25 μmol/L 时，复合物的 Zeta 电位接近于
零，意味着此时体系接近于电中和状态，继续添加
TPE-COOH 体系 Zeta 电位变为负值。另外，从图 5
的荧光检测也可看出，在TPE-COOH 浓度为25 μmol/L、
注：壳聚糖季铵盐质量浓度 35 mg/L；TPE-COOH 浓度 25 μmol/L；
壳聚糖季铵盐质量浓度为 35 mg/L 时，复合物的荧光 pH=7.4；激发波长 340 nm；激发狭缝/发射狭缝 5 nm/5 nm
强度接近于极大值。所以，选定壳聚糖季铵盐质量 图 7 存储时间对复合物荧光光谱（a）及最大发射强度
浓度为 35 mg/L，TPE-COOH 的浓度为 25 μmol/L 作 的影响（b）
为后续检测肝素的用量。 Fig. 7 Effect of storage time on fluorescence spectra (a)
and the maximum emission intensity of complex (b)

2.4 复合物对肝素的检测
2.4.1 肝素的定量检测
图 8 为复合物在肝素加入后的发射光谱及最大
发射强度与时间的关系图。

注：壳聚糖季铵盐质量浓度 35 mg/L；pH=7.4
图 6 TPE-COOH 浓度对复合物 Zeta 电位的影响
Fig. 6 Effect of TPE-COOH concentration on Zeta potential
of complex

在复合物中，底物的稳定性至关重要。检测了
荧光存储时间对复合物荧光性能的影响，结果见图 7。