Page 114 - 《精细化工》2023年第1期
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·106·                             精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 40 卷

            2.3.2   响应面交互作用分析                                  件在所涉及因素范围内。响应面坡度陡峭程度反映
                 响应面实验中三因素交互作用对板栗苞提取物                          交互效应的强弱,图 5c 的鞍面最陡,表明 A 与 C
            抑菌率的影响如图 5 所示。                                     的交互作用最大,表明其对板栗苞提取物的抑菌活性
                 由图 5 可知,响应面图均为开口向下的凸形曲                        的交互作用最明显        [33] 。由图 5a、b 可知,这两图的坡
            线,说明响应值存在极高值。3 个图形的等高线中                            度也呈陡峭的椭圆形,说明 B 与 C、A 与 B 对抑菌率
            心均位于–1~1 水平,表明以抑菌活性为提取最优条                          有一定的交互作用;乙醇体积分数、提取温度和料液
                                                               比对抑制率的影响与回归方程的结果一致。
                                                               2.3.3   最佳条件的确定及验证实验
                                                                   利用 Design-Expert 8.0.6 软件分析得到板栗苞
                                                               抑 菌物质 提取 的最优 条件 为:乙 醇体 积分 数
                                                               42.79%,液料比 18.63∶1,提取温度 51.57  ℃。预
                                                               测提取物质量浓度为 0.5 g/L 时抑菌率为 67.18%。
                                                               为适合实验操作,调整乙醇体积分数为 45%、液料
                                                               比为 20∶ 1、提取温度 为 50  ℃, 提取时间为
                                                               120 min,在此条件下进行 3 次验证实验,抑菌率为
                                                               61.27%±2.60%,达到预测抑菌率的 91.20%,说明应
                                                               用响应面法优化得到的板栗苞提取工艺参数可靠,
                                                               具有一定参考价值,且板栗苞提取物抑制痢疾杆菌
                                                               活性较好。
                                                               2.4   板栗苞提取物及各萃取物中总多酚、总黄酮含
                                                                   量的测定
                                                                   按 1.2.5 节对板栗苞提取物进行萃取,按 1.2.6
                                                               节对板栗苞提取物及各层萃取物进行总多酚、总黄
                                                               酮含量测定,结果如表 4 所示。

                                                                    表 4   板栗苞各提取物的总酚、总黄酮含量
                                                               Table 4    Total phenol and total flavonoid contents of extracts
                                                                      from chestnut burs
                                                                                总酚含量/           总黄酮含量/
                                                                   样品
                                                                                (mg GA/g)       (mg rutin/g)
                                                                  CW           32.89±0.99        77.09±2.08
                                                                  CE           35.07±0.36        82.81±1.57
                                                                  CC           33.21±0.56        79.51±2.24
                                                                  CEW          42.05±0.18        77.49±2.51
                                                                  CEY          46.27±1.44       151.96±0.59
                                                                  CED          39.24±0.18       127.96±2.16
                                                                  CES          41.42±0.90       139.04±3.10
                                                                 注:含量为平均值±SD,SD 为平行 3 次实验的标准差。

                                                                   由表 4 可知,板栗苞乙酸乙酯萃取层总酚含量
                                                               〔(46.27±1.44) mg GA/g〕在各萃取层中最高,水层
                                                               〔(42.05±0.18) mg GA/g〕次之。总黄酮含量的测定
                                                               结果与多酚相似,板栗苞乙酸乙酯层总黄酮含量
                                                               〔 (151.96±0.59) mg  rutin/g 〕最 高,石油 醚层
                                                               〔(139.04±3.10) mg rutin/g 〕次之 ,水相中
                                                               〔(77.49±2.51) mg  rutin/g〕中总黄酮含量较少。研究

                           图 5  3D 响应面分析                       发现,提取物中多酚和黄酮的含量在抑制细菌生长
                     Fig. 5    3D response surface analysis    中起关键作用,由于羟基可以与细胞膜形成质子交
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