Page 156 - 《精细化工》2023年第1期

·148· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

联合抗菌实验效果的判定依据 [15] ，FIC 指数计算公 百里香体积比为 2∶1）对大肠杆菌（ATCC 8739）
式如式（1）所示： 和金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）的抗菌性能，通
MIC 联合 MIC 联合 过抑菌圈直径判断其抗菌能力。抑菌圈直径≤7 mm
FIC 指数= A + B （1）
MIC 单用 MIC 单用 视为无抗菌作用；7 mm＜抑菌圈直径≤10 mm 为钝
B
A
MIC A 单用是指在未复配前，单一 A 精油的最 敏；10 mm＜抑菌圈直径＜20 mm 为中敏；抑菌圈
低抑菌浓度， MIC A 联用是指 A 和 B 两种精油根据 直径≥20 mm 为高敏。
图 1 进行组合后，通过酶标仪测定 OD 600 ，得到 9 具体测试方法为：使用打孔器制备直径约为 6 mm
种 AB 组合中的最优抑菌组合，此时 A 精油在组合 的圆形滤纸片，并置于高压灭菌锅灭菌，待测精油
中的浓度记为 MIC A 联用。FIC 指数判定标准为：FIC 经 0.22 μm 滤膜过滤灭菌后备用。将 16 g 琼脂粉溶
指数≤0.5 时，表现为协同作用；0.5＜FIC 指数≤1 于含有 1 L 去离子水的锥形瓶中，搅拌均匀后采用
时，表现为相加作用；1＜FIC 指数≤2 时，表现为 高压灭菌锅于 121 ℃高压灭菌 15 min，随后取约
无关；FIC 指数＞2 时，表现为拮抗作用。 20 mL 培养基倒入无菌培养皿中，室温冷却凝固后
得到无菌固体培养基，加入 100 μL 细菌分散液（如
1.2.1 节所述）并用涂布棒涂布均匀得到含菌平板。
将无菌滤纸片置于含菌平板中心，并吸取 5 μL 复配
精油分别滴加到滤纸片上，以无菌生理盐水（经高
温高压灭菌后质量分数为 0.9%的氯化钠水溶液）作
为空白对照。接种后，将培养皿于 37 ℃培养 24 h
后测量抑菌圈直径，取 3 次重复实验的平均值。
1.2.4 复配精油体积比的确定
通过抑菌圈直径筛选出抗菌效果好的复配精
油，以山苍子与肉桂精油体积比为 8∶1、4∶1、2∶

1 1 1 1、1∶1、1∶2、1∶4、1∶8 进行复配并测试其抑
A1= MIC A A2= MIC A A3= MIC A
2 4 8 菌圈直径，确定其复配比例，操作步骤如 1.2.3 节所述。
1 1 1
B1= MIC B B2= MIC B B3= MIC B 随后，根据感官评价法对上述筛选好的复配精
2 4 8
A—山苍子精油；B—肉桂精油或百里香精油或牛至精油 油进行气味感官评价，分别选定 20 位经上海应用技
图 1 棋盘稀释法示意图 术大学香料香精化妆品学部感官评价系统培训的感
Fig. 1 Schematic diagram of checkerboard dilution method
官评价员（男女比例为 1∶1）进行香气效果评价。
1.2.3 复配精油种类的确定 具体步骤如下：将标准的不带任何气味的闻香纸（长
根据 FIC 指数，选取具有协同作用的复配精油 140~150 mm，宽 5~6 mm）浸入样品 1~2 cm，离鼻
（山苍子和肉桂复配精油，山苍子和百里香复配精 腔 2.5 cm 通过鼻孔吸气，每次 2~3 s，分别对不同
油），并采用纸片扩散法抑菌圈实验 [16] 测试上述复配 体积比的复配精油的香气强度、喜好度、舒适度以
精油（山苍子和肉桂复配精油中山苍子和肉桂的体 及留香持久度进行 7 分制打分评价，具体分值及描
积比为 2∶1；山苍子和百里香复配精油中山苍子和 述如表 1 所示。

表 1 复配精油感官评价打分表
Table 1 Sensory evaluation score table of blended essential oils
分值 香气强度 喜好度 舒适度 留香持久度
7 香气强度非常强，有刺鼻、冲鼻的 最受欢迎，香气强，最令人愉悦，喜 香气最令人舒适，愉悦放松 留香时间非常长
味道，无法忍受的强烈气味 好度极强
6 香气强度强，轻易就能捕捉到香气， 受欢迎，香气较强，令人愉悦，喜好 香气舒适，较愉悦放松 留香时间长
稍许有些刺鼻 度强
5 香气强度较强，不会刺鼻，但能明 香气较愉悦，较受欢迎，喜好度较强 香气较舒适，易接受 留香时间较长
显闻到
4 香气强度适中，如同日常生活刚喷 香气适中，可接受，喜好度中等 香气舒适度适中，可接受 留香时间适中
香水的强度
3 香气强度较弱，能捕捉到香气 香气微弱，勉强可接受，喜好度较低 香气舒适度较弱，但不排斥 留香时间短
2 香气强度弱，偶尔能闻到一些香气 较难闻的香气，不易接受，喜好度低 香气舒适度弱，有些许排斥 留香时间很短