Page 102 - 《精细化工》2023年第2期
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·324·                             精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 40 卷

                 该系统能通过感应血糖浓度实现药物的智能释                          3-氨丙基三甲氧基硅烷（1.00 mL，5.67 mmol）的无
            放，既可以利用 SiO 2 良好的膜渗透性                [21-22] 实现    水甲苯中，回流反应 20 h，冷却后过滤，用 20 mL
            cAMP 的细胞内给药，也可以利用胰岛素和 cAMP                         甲醇洗涤 3 次，并于 60 ℃下真空干燥 12 h 即得氨
            的协同作用提高系统自主调节血糖的能力，增加维                             丙基化 MSN，记为 AP-MSN。
            持正常血糖的时间，减少给药次数，提高患者的用                             1.2.3  BA-MSN 的合成
            药依从性。                                                  取 400 mg AP-MSN 纳米球分散于 20 mL
                                                               DMSO 中，制得 DMSO 分散液。另取 4-羧基苯硼
            1   实验部分                                           酸（0.15 g，0.90 mmol）、N-羟基琥珀酰亚胺（0.10 g，
                                                               0.87 mmol）和 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚
            1.1   试剂与仪器
                                                               胺盐酸盐（0.20 g，1.04 mmol）于 5 mL DMSO 中，
                 N-十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、1-乙基-
                                                               室温反应 15 min 后，将其加入上述含 AP-MSN 的
            3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐（EDC）、4-
                                                               DMSO 分散液中，室温搅拌反应 24 h，过滤，分别
            羧基苯硼酸、N-羟基琥珀酰亚胺、cAMP、磷酸二
                                                               先后用 20 mL DMSO、蒸馏水、甲醇洗涤 3 次，并
            氢钾、磷酸氢二钠、葡萄糖、果糖、麦芽糖（质量
                                                               于 60 ℃下真空干燥 10 h 即得硼酸化的 MSN，记为
            分数 95%）、甘露糖、乳糖、半乳糖、异硫氰酸荧
                                                               BA-MSN。
            光素（质量分数 90%），上海麦克林生化科技股份
                                                               1.2.4  G-Ins 的荧光标记
            有限公司；硅酸四乙酯（TEOS）、3-氨丙基三甲氧
                                                                   取 G-Ins 200 mg 溶于 50 mL 2 mol/L 碳酸钠溶
            基硅烷、氯化铵，上海阿拉丁生化科技股份有限公
                                                               液（pH=9）中，避光搅拌，并逐滴加入 2.5 mL 含
            司；二甲基亚砜（DMSO）、甲苯、NaOH、浓盐酸、
                                                               有 1 g/L 异硫氰酸荧光素的 DMSO 溶液，室温搅拌
            甲醇，成都市科隆化学品有限公司；葡萄糖酸改性
                                                               2 h 后，加入 2.5 mL 1 mol/L 氯化铵溶液淬灭反应，
            的胰岛素（G-Ins），中国科学院广州化学研究所。以
                                                               继续搅拌 1 h，将溶液倒入透析袋（截留相对分子
            上试剂均为分析纯，除甲苯外使用前均未经纯化，甲
                                                               质量 3500）中，并于 PBS 缓冲液（pH=7.4）内透
            苯使用前需用活化的 4A 分子筛于室温下干燥 24 h
                                                               析 48 h，–40 ℃下冷冻干燥 48 h 后得荧光标记的
            以除水。
                                                               G-Ins，记为 Flu-G-Ins。
                 Fei Tecnai G20  透射电子显微镜、Nicolet460            1.2.5  Flu-G-Ins 封盖 MSN
            傅里叶变换红外光谱仪、LS45/55 型荧光-磷光-发光                           取 100  mg BA-MSN 4 份，分别分散于 10 mL
            分光光度计、TSQ Quantum Ultra 三重四极杆高效液                   含 0.01、0.02、0.05、0.10 mmol/L cAMP 的 PBS 缓
            相色谱-质谱联用仪，美国 Thermo Fisher 公司；                     冲液（pH=7.4）中，避光搅拌 24 h 后加入 200 mg
            ZetaPALS Zeta 电位及粒度分析仪，美国 Brookhaven               Flu-G-Ins，并继续搅拌 24 h，过滤，20 mL PBS 缓
            仪器公司；ASAP2020M+C  全自动微孔物理化学吸                       冲液洗涤除去杂质，收集固渣，60 ℃下真空干燥
            附仪，美国 Micromeritics 公司；756S  紫外-可见分                10 h，得 Flu-G-Ins 封盖的 MSN，即目标载药系统，
            光光度计，上海棱光技术有限公司；D8 Advance X                       记为 Flu-G-Ins-MSN。
            射线粉末衍射仪，德国 Bruker 公司。                              1.3   表征与测试
            1.2    SiO 2 基载药系统的制备                                  利用透射电子显微镜观察样品的微观结构；通
            1.2.1  MSN 纳米球的合成                                  过全自动微孔物理化学吸附仪测试样品的氮气吸附
                 取 CTAB（1.00 g，2.74 mmol）溶于 480 mL 蒸           -脱附等温线以及孔径分布；用 X 射线粉末衍射仪
            馏水中，加入 3.50 mL 2 mol/L NaOH 溶液，升温至                 以 Cu K α 为辐射源，以 4 (°)/min 速度测试样品的 X
            80  ℃，剧烈搅拌下加入硅酸四乙酯（5.00 mL，密                       射线衍射图；通过 Zeta 电位及粒度分析仪测试样品
            度 0.934 g/mL，22.4 mmol），反应 24 h，生成白色沉              的 Zeta 电位；通过傅里叶变换红外光谱仪测试样品
            淀，过滤，依次用 20 mL 蒸馏水和甲醇分别洗涤 3                        的红外光谱。
            次，60  ℃下真空干燥 10 h，得 SiO 2 实心球。取该                   1.4   载药量测定
            实心球 1.50 g 加入到含 1.50 mL 浓盐酸（质量分数                       在 1.2.5 节基础上，改变避光搅拌时间分别为 0、
            35%~38%）的甲醇（150 mL）中，回流 6 h，过滤，                    1、2、5、10 h，重复该节步骤并收集 PBS 缓冲液
            依次用 20 mL 蒸馏水和甲醇分别洗涤 3 次，100  ℃下                   洗涤后的滤液，通过 HPLC 检测滤液中 cAMP 浓度，
            真空干燥 12 h 以脱除 CTAB 模板，即得 MSN 纳米球。                  按式(1)计算 cAMP 载药量（K cAMP ，μmol/g）。
            1.2.2  AP-MSN 的合成                                                      cV -  c V
                                                                            K cAMP  =  00  1 1   1000   （1）
                 取上述制得 MSN 纳米球（1.00 g）于 80 mL  含有                                   m MSN
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