Page 86 - 《精细化工》2023年第6期

·1236· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

红色通道荧光信号明显下降，绿色通道荧光信号略 选择性，能够以高时空分辨率检测线粒体和内质网
有增加。但图 33c3 红色通道和绿色通道几乎没有荧 中的生物硫醇。
光，比值明显增加，而图 33d3 红色通道无明显变化，
但绿色通道有强烈的荧光信号，比值增加非常明显。
结果表明，探针 1 具备良好的生物相容性，可以穿
–
透细胞膜，用于活细胞中 CN 比率荧光成像检测。

图 34 B16F10、A375 和 HEK-A 细胞与探针 17（2 μmol/L）
孵育 30 min 的共聚焦荧光图像 [44]
Fig. 34 Confocal fluorescence images of B16F10, A375,
and HEK-A cells incubated with probe 17 (2 μmol/L)
for 30 min [44]

MADHU 等 [43] 在生物体系中测试 3,5 位双醛基
–
BODIPY 探针 18（图 10）对 CN 反应性，使用人类
乳腺癌细胞（MDA-MB-231）进行荧光成像（图 35）。
–
通过荧光共聚焦成像仪观察到，添加 CN 前后细胞
内的荧光信号变化明显。如图 35 所示，未处理的细
胞没有荧光。经过 BODIPY 探针处理的细胞显示出
强的绿色荧光发射（图 35a），表明探针可进入细胞
–
内发出荧光信号。再加入 CN 处理，细胞显示出绿

激发波长为 488 nm；绿色发射通道为 530~570 nm；红色发射通 色荧光猝灭效应（图 35b），这与体外测试的结果高
–
道为 630~670 nm 度吻合，表明探针能够监测细胞内的 CN 。
图 33 HepG-2 细胞与探针 1（20 μmol/L）孵育 20 min
–
的成像（a1~a4）；50 μmol/L CN 处理 HepG-2 细
胞 20 min 的成像（b1~b4）；HepG-2 细胞与探针 1
（ 20 μmol/L ）孵育 20 min ， 然后与 CN –
（100 μmol/L）孵育 20 min 的成像（c1~c4）；
HepG-2 细胞与探针 1（20 μmol/L）孵育 20 min，
–
然后与 CN （150 μmol/L）孵育 20 min 的成像
（d1~d4） [27]
Fig. 33 Images of HepG-2 cells incubated with probe 1
(20 μmol/L) for 20 min (a1~a4); Images of
–
HepG-2 cells treated with 50 μmol/L CN for
20 min (b1~b4); Images of HepG-2 cells incubated
with probe 1 (20 μmol/L) for 20 min, and then 左列代表明场图像；中间代表荧光图像；右列代表叠加图像
–
–
with CN (100 μmol/L) for 20 min (c1~c4); 图 35 BODIPY 18 孵育 MDA-MB-231 细胞加入 CN 前后
Images of HepG-2 cells incubated with probe 1 的（a）和（b）的活细胞成像 [43]
–
(20 μmol/L) for 20 min and then with CN (150 Fig. 35 Live cell imaging of MDA-MB-231 cells incubated
μmol/L) for 20 min (d1~d4) [27] with BODIPY 18 before (a) and after (b) addition
of CN –[43]
HE 等 [44] 制备的 3 位醛基 BODIPY 17（图 9）与
活细胞中生物硫醇 GSH 进行 Vilsmeier-Haack 加成 2.3.2 meso 位醛基 BODIPY 探针的细胞成像
反应后，探针的荧光强度明显增强（图 34）。将探 SUKATO 等 [42] 用探针 44（图 21）检测活细
针 17 与细胞共孵育，包括小鼠黑色素瘤细胞 胞中的氰化物。将 HepG2 细胞用 NaCN 孵育 60 min，
（B16F10）、人表皮角质形成细胞（HEK-A）和恶 然后加入 44（0.5 µmol/L）再孵育 30 min。在荧光
性黑色素瘤细胞（A375），探针显示出红色荧光， 显微镜下，HepG2 细胞的细胞质中明显可见强烈的
证实了探针具有足够的细胞通透性。不同细胞体系 绿色荧光发射，表明 meso 位醛基 BODIPY 探针
–
的荧光信号比不同，说明这些细胞中生物硫醇水平 44 可以作为探针在活细胞中对 CN 选择性成像
存在差异。该探针对生物硫醇具有较高的灵敏度和 （图 36）。