Page 111 - 精细化工2019年第10期

第 10 期 郑永利，等: 葡萄糖功能化的无规聚合物与凝集素的相互识别 ·2077·

分别取 0.3561 和 0.3685 g，OVNGlu 分别取 0.1028
和 0.0808 g，记为 PDO-2 和 PDO-3。
1.3 P(DEGMA-co-OVNGlu)的表征
1 HNMR 测定：分别各称取 5 mg 的 DEGMA、
OVNGlu 和 P(DEGMA-co-OVNGlu) 溶 于氘代水
1
（D 2O）中，通过 HNMR(400 MHZ；D 2O)进行表征。
FTIR 测定：称取 5 mg DEGMA 置于测样台上，
采用衰减全反射法（ATR），通过傅里叶变换红外光
谱仪进行表征。OVNGlu 和 P(DEGMA-co-OVNGlu)

的测样方法同上。 图 1 DEGMA，OVNGlu 和 3 种 P(DEGMA-co-OVNGlu)
GPC 测定：将 P(DEGMA-co-OVNGlu)溶解在四 的红外光谱图
氢呋喃溶剂中，配制成 3 mg/mL 的溶液，通过凝胶 Fig. 1 FTIR spectra of DEGMA, OVNGlu and
P(DEGMA-co-OVNGlu) samples
渗透色谱仪进行相对分子质量的测定。
LCST 测定：在波长 500 nm 处测定 1 mg/mL 无
–1
在 DEGMA 的 FTIR 中，2886 cm 处为甲基的
规聚合物溶液在 20~50 ℃的紫外吸光度。样品池温
–1
不饱和 C—H 伸缩振动峰，1728 cm 处为酯羰基中
度按照 0.5 ℃/min 的升温速度进行升温。LCST 指
–1
C==O 伸缩振动吸收峰，1637 cm 处为 C==C 伸缩
聚合物紫外吸收达到溶液最大吸光度（A）50%时所
–1
振动吸收峰；在 OVNGlu 的 FTIR 中，3532 cm 处
对应的温度。
为—OH 的伸缩振动吸收峰，3367 cm –1 处为—OH
1.4 凝集素结合实验
缔合所形成的伸缩振动吸收峰，2880 cm –1 处为—
UV-Vis 测定：由于聚合物和凝集素的识别与含
–1
CH 2 的 C—H 伸缩振动吸收峰，1730 cm 处为不饱
糖量密切相关，PDO-1 的 LCST 为 31.3 ℃，相比其
–1
和酯羰基的—C==O 伸缩振动吸收峰，1646 cm 处
他两种聚合物来说，较接近人体温度，因此选择
为 C==C 的伸缩振动吸收峰。在 P(DEGMA-co-
PDO-1 做后续相关测试。在波长 600 nm 处测定质量 –1
OVNGlu)的 FTIR 中，3000 cm 以上的不饱和==CH 2
浓度为 0.4 mg/mL 的 PDO-1 分别与 0.4 mg/mL 的
–1
伸缩振动吸收峰消失，3532 cm 以下的饱和 C—H
ConA、BSA 和 RCA 120 相互识别的情况，对照组为
伸缩振动吸收峰依然存在，另外 1726、1724 和
0.4 mg/mL 的 P(DEGMA-co-OVNGlu)和 0.4 mg/mL
1725 cm –1 处酯羰基（C==O）的伸缩振动吸收峰并
的 ConA。样品池温度恒定在 37 ℃（>LCST），测 –1
未消失，而 1646 cm 左右的 C==C 伸缩振动特征峰
试结合时间 1800 s。 –1
消失，并且 2885 cm 附近饱和 C—H 伸缩振动特征
DLS 的测定：各称取 30 mg 的 PDO-1 和 ConA，
峰更明显。以上分析说明成功合成了含糖共聚物
并分别溶解在 30 mL 的 HEPES（pH=7.4）缓冲溶液
P(DEGMA- co-OVNGlu)。
中，配制成质量浓度为 1 mg/mL 的溶液并逐级稀释。 1
2.2 HNMR 分析
PDO-1 的质量浓度分别为 0.005、0.05、0.1、0.3 和
DEGMA、OVNGlu 和 3 种 P(DEGMA-co-OVNGlu)
0.5 mg/mL，ConA 的质量浓度分别为 0.01、0.1、0.2、
的核磁共振氢谱见图 2。
0.6 和 1.0 mg/mL。得到的一系列溶液用 0.45 μm 的

水相过滤膜进行过滤，将过滤后的样品加入到测试
瓶中。首先，测试不同浓度的无规聚合物在 HEPES
缓冲溶液中的粒径 D h 以及多分散度 PDI，然后测试
不同浓度的聚合物和凝集素之间相互识别情况与
D h 和 PDI 的关系，从而判断识别饱和时间。样品池
的温度恒定在 37 ℃(>LCST)，在 532 nm 下进行动
态光散射测试，测试缀合时间 30 min。
2 结果与讨论

2.1 FTIR 分析 图 2 DEGMA、OVNGlu 和 3 种 P(DEGMA-co-OVNGlu)的
1 HNMR
图 1 为单体 DEGMA、OVNGlu 和 3 种聚合物
1
Fig. 2 HNMR of DEGMA, OVNGlu and P(DEGMA-co-
P(DEGMA-co-OVNGlu)的红外光谱图。 OVNGlu) samples