Page 113 - 精细化工2019年第10期
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第 10 期 郑永利,等: 葡萄糖功能化的无规聚合物与凝集素的相互识别 ·2079·
2.6.2 DLS 测试糖和蛋白的相互识别
图 7 是 37 ℃下不同浓度的 PDO-1 和 ConA
〔n(PDO-1)∶n(ConA)=1∶2〕相互识别,通过动态
光散射测得的 D h 和 PDI 随缀合时间的变化图。
图 5 37 ℃下不同浓度的 PDO-1 在 HEPES 体系中 D h 分
布(a)和 PDI 分布(b)
Fig. 5 D h (a) and PDI (b) distribution of different
concentrations of PDO-1 in HEPES system at 37 ℃
2.6 凝集素结合测试
2.6.1 紫外测试糖和几种蛋白的相互识别
图 6 是 37 ℃下 0.4 mg/mL 的 PDO-1 与 ConA、
BSA 及 RCA 120 的结合测试结果。结果表明,加入了
BSA 和 RCA 120 的溶液与加入 HEPES 的聚合物溶液
吸光度变化相近,说明该聚合物对 BSA 和 RCA 120
无明显吸附作用。而加入 ConA 的聚合物溶液,随
缀合时间的增加,吸光度增大,500 s 后,PDO-1 与
ConA 的识别达到饱和,说明含葡萄糖基的无规聚合
物可与 ConA 结合,并且具有专一结合性。该结果
证明了糖与蛋白质反应符合“锁-钥匙”理论的专一
性规律 [24] ,并且葡萄糖酯单体参与 RAFT 聚合后依 a—0.005 mg/mL PDO-1+0.01 mg/mL ConA;b—0.05 mg/mL
PDO-1+0.1 mg/mL ConA;c—0.1 mg/mL PDO-1+0.2 mg/mL Con
然保持了糖基与 ConA 的结合能力。 A;d—0.3 mg/mL PDO-1+ 0.6 mg/mL ConA;e—0.5 mg/mL
PDO-1+1 mg/mL ConA
图 7 动态光散射测量 PDO-1 胶束与 ConA 相互识别后
D h (a)、PDI(b)随结合时间的变化及 PDO-1 胶
束与 ConA 相互识别前后粒径的变化情况(c)
Fig. 7 Changes of D h (a) and PDI(b) with binding time
after mutual recognition of PDO-1 micelles and
ConA; change of particle size before and after
mutual recognition of PDO-1 micelles and ConA(c)
结果表明,非线性聚合物胶束溶液和凝集素相
互结合后,随着缀合时间的延长,D h 明显增加,如
图 6 37 ℃下 PDO-1 与 ConA、BSA 及 RCA 120 结合的紫 图 7a所示。而当 PDO-1 质量浓度为 0.005~0.1 mg/mL
外光谱
Fig. 6 Binding assay of PDO-1 with ConA, BSA and 时,PDI 呈现先增大后减小再增大的趋势,且当缀
RCA 120 at 37 ℃ 合时间达到 20 min 时,聚合物与凝集素的识别达到