Page 113 - 精细化工2019年第10期
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第 10 期                  郑永利,等:  葡萄糖功能化的无规聚合物与凝集素的相互识别                                   ·2079·


                                                               2.6.2    DLS 测试糖和蛋白的相互识别
                                                                   图 7 是 37  ℃下不同浓度的 PDO-1 和 ConA
                                                               〔n(PDO-1)∶n(ConA)=1∶2〕相互识别,通过动态
                                                               光散射测得的 D h 和 PDI 随缀合时间的变化图。


























            图 5    37  ℃下不同浓度的 PDO-1 在 HEPES 体系中 D h 分
                  布(a)和 PDI 分布(b)
            Fig.  5    D h   (a)  and  PDI  (b)  distribution  of  different
                    concentrations of PDO-1 in HEPES system at 37  ℃

            2.6    凝集素结合测试
            2.6.1    紫外测试糖和几种蛋白的相互识别
                 图 6 是 37  ℃下 0.4 mg/mL 的 PDO-1 与 ConA、
            BSA 及 RCA 120 的结合测试结果。结果表明,加入了
            BSA 和 RCA 120 的溶液与加入 HEPES 的聚合物溶液
            吸光度变化相近,说明该聚合物对 BSA 和 RCA 120
            无明显吸附作用。而加入 ConA 的聚合物溶液,随
            缀合时间的增加,吸光度增大,500 s 后,PDO-1 与
            ConA 的识别达到饱和,说明含葡萄糖基的无规聚合
            物可与 ConA 结合,并且具有专一结合性。该结果

            证明了糖与蛋白质反应符合“锁-钥匙”理论的专一
            性规律    [24] ,并且葡萄糖酯单体参与 RAFT 聚合后依                  a—0.005  mg/mL  PDO-1+0.01  mg/mL  ConA;b—0.05  mg/mL
                                                               PDO-1+0.1 mg/mL ConA;c—0.1 mg/mL PDO-1+0.2 mg/mL Con
            然保持了糖基与 ConA 的结合能力。                                A;d—0.3  mg/mL  PDO-1+  0.6  mg/mL  ConA;e—0.5  mg/mL

                                                               PDO-1+1 mg/mL ConA

                                                               图 7    动态光散射测量 PDO-1 胶束与 ConA 相互识别后
                                                                    D h (a)、PDI(b)随结合时间的变化及 PDO-1 胶
                                                                    束与 ConA 相互识别前后粒径的变化情况(c)
                                                               Fig. 7 Changes of D h (a) and PDI(b)  with binding time
                                                                     after  mutual  recognition  of  PDO-1  micelles  and
                                                                     ConA;  change  of  particle  size  before  and  after
                                                                     mutual recognition of PDO-1 micelles and ConA(c)

                                                                   结果表明,非线性聚合物胶束溶液和凝集素相
                                                               互结合后,随着缀合时间的延长,D h 明显增加,如

            图 6    37  ℃下 PDO-1 与 ConA、BSA 及 RCA 120 结合的紫      图 7a所示。而当 PDO-1 质量浓度为 0.005~0.1 mg/mL
                  外光谱
            Fig.  6    Binding  assay  of  PDO-1  with  ConA,  BSA  and   时,PDI 呈现先增大后减小再增大的趋势,且当缀
                   RCA 120  at 37  ℃                           合时间达到 20 min 时,聚合物与凝集素的识别达到
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