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第 4 期 刘晓燕,等: 大孔吸附树脂纯化东北岩高兰总黄酮 ·669·
量(原液与吸附后药液的峰面积差),结果见图 7。
图 7 东北岩高兰 5 种成分的上样量与吸附量的关系
Fig. 7 The leakage curves of 5 compounds of Empetrum
nigrum L. var. japonicum
从图 7 可以看出,AB-8 型大孔树脂对东北岩高兰
的 5 种化学成分吸附收集液为 400 mL(8 BV)时,基本
达到吸附平衡。故最大上样量为 400 mL(8 BV)。
2.4.3 洗脱剂用量的考察
根据 2.4.2 节的实验条件装柱,先用 5 BV 体积
分数 20%的乙醇洗去杂质,再用体积分数 95%的乙
醇进行洗脱,洗脱液每 0.5 BV(25 mL)收集 1 次,
每份进行 HPLC 测定,测得药液的总峰面积表示解
吸量,绘制洗脱曲线,结果见图 8。
图 8 东北岩高兰 5 种成分的洗脱剂用量与解吸量的关系
Fig. 8 Eluent dosage curves of 5 compounds of Empetrum
nigrum L. var. japonicum
由图 8 可知,在洗脱剂用量为 1.5 BV(75 mL)
时,各成分的峰面积达到最大值,随后逐渐减小,
5 BV(250 mL)后基本保持平衡,说明各成分几乎
洗脱完全。故东北岩高兰 5 种成分的最大洗脱体积
为 5 BV(250 mL)。
2.4.4 洗脱流速的考察
准确称取 15.0 g 处理好的 AB-8 型树脂 4 份,
湿法装柱后,将 400 mL 样品溶液(5 g/L)上样吸
附饱和后,先用体积分数 20%的乙醇洗去杂质,再
用体积分数 95%的乙醇洗脱,洗脱流速分别控制为
图 9 东北岩高兰 5 种成分不同流速下的洗脱曲线
1、2、3、4 mL/min,洗脱液每 0.5 BV 接 1 份,每 Fig. 9 The elution curves of 5 compounds of Empetrum
份进行 HPLC 测定,结果见图 9。 nigrum L. var. japonicum at different flow rates