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第 4 期 王全泽，等: 微胶囊双水相法提取罗汉松挥发油及成分分析 ·685·

传统的植物挥发油提取方法多采用水蒸气蒸馏 对比微胶囊的密度及在水中的溶解性，选出最佳囊
法、溶剂提取法和超临界流体萃取法。水蒸气蒸馏 壁材料。
法在高温下易使有效成分发生水解、聚合；溶剂提 1.2.3 微胶囊双水相体系的选择
取法在低温下操作可避免水解发生，但通常提取时 采用-环糊精-Na 2 SO 4 体系和-环糊精-NaOH
间长达数小时；超临界流体萃取法设备昂贵、成本 体系作为研究对象，对比罗汉松枝叶挥发油在上、
[7]
高、操作技术要求较高 。 下两相中分配情况，选择适合罗汉松枝叶挥发油的
近年，双水相萃取分离技术 [8-9] 广泛用于生物化 双水相体系，并对微胶囊双水相体系萃取罗汉松挥
学、生物化工等领域的产品分离和提取。微胶囊技 发油工艺进行单因素实验和响应面优化实验，以期
术 [10-16] 能有效地保护挥发油中的组分。因此，本文 获得适宜的萃取条件。
将微胶囊和双水相萃取相结合的技术应用于罗汉松 1.2.4 挥发油得率的计算
枝叶挥发油的提取中，以罗汉松枝叶为原料，在单 罗汉松枝叶挥发油萃取得率（y）按式（1）计算：
因素实验基础上，考察了萃取时间、β-环糊精质量 y / %  m 1  100 （1）
分数、硫酸钠质量分数和萃取温度对提取罗汉松挥 m
发油的影响，并首次采用 GC-MS 对制得的挥发油的 式中：m 1 为罗汉松枝叶挥发油质量，g；m 为罗汉
化学成分进行分析，以期为罗汉松资源的开发利用 松枝叶总质量，g。
1.2.5 微胶囊双水相萃取挥发油工艺流程
提供理论基础。
取 200 mL 罗汉松样液，依次加入 80 mL 质量
1 实验部分 分数 40%-环糊精溶液及 30 mL 质量分数 15%
Na 2 SO 4 溶液，30 ℃水浴搅拌 35 min，冰箱中静置分
1.1 原料、试剂与仪器 层 4 h（分相）。取出，离心（4000 r/min）10 min，
罗汉松枝叶采自湖南省张家界市锦程园艺公 分离得到环糊精囊化物。然后向得到的环糊精囊化
司，经吉首大学谷伏安副教授鉴定品种为罗汉松科 物中加入无水乙醇 200 mL，充分混合、搅拌后静置
植物罗汉松（Podocarpus macrophyllus）的枝叶，经 10 min 释放囊心，再次离心（4000 r/min）10 min，
阴干、粉碎过 60 目筛后得到罗汉松枝叶粉末备用。 收集上层清液，减压蒸馏，回收乙醇，得到罗汉松
-环糊精、-环糊精、-环糊精，孟州市华兴生 挥发油。
物化工有限公司；Na 2 SO 4 ，AR，中国医药上海试剂 1.2.6 罗汉松枝叶挥发油 GC-MS 检测
公司；NaOH、聚乙二醇、乙醇（体积分数 95%）， 1.2.6.1 GC-MS 样品的处理
AR，上海化学试剂厂。 准确称取 100 g 罗汉松粉末，先按 1.2.1 节中的
XMTH 型数显温控仪，上海沪越实验仪器有限 方法制备得到罗汉松样液，再按 1.2.5 节中的工艺条
公司；ZX-9146MBE 型数显鼓风干燥箱，上海博迅 件进行提取。
实业有限公司医疗设备厂；AEL-40SM 型十万分之 将所得挥发油溶于 10 mL 正己烷溶液，置于样
一电子天平，日本 Shimadzu 公司；HH-6 型电热数 品瓶中，加入 0.25 g 氯化钠，磁力搅拌速度 800
显恒温水浴锅，江苏省金坛县岸头医疗器械厂；HJ-3 r/min，于 40 ℃平衡 20 min，插入固相微萃取头
数显恒温磁力搅拌器，常州国华仪器有限公司； （PA-85 m）于液面上方 20 mm 处，40 ℃吸附 30
7890A-5975C 气相色谱-质联用仪、DB-5MS 色谱柱 min，然后立即将萃取头插入进样口解吸 4 min，进行
（30 m × 0.25 mm × 0.25 m），美国安捷伦公司；PA GC-MS 分析。
固相微萃取萃取头，85 m；SPME 手动进样手柄， 1.2.6.2 GC-MS 检测条件
美国 Supelco 公司。 GC 条件：热导池检测器温度 300 ℃，HP-5MS
1.2 方法 （30.0 m × 0.25 mm × 0.25 μm），不分流进样；进样
1.2.1 罗汉松样液的制备 口温度 250 ℃，界面温度 280 ℃；氦气为载气，流
取罗汉松枝叶粉末 100 g，加入体积分数 40% 速 1.0 mL/min；采用分流进样，分流比 30∶1，进
乙醇溶液常温浸泡 24 h，料液比〔固体质量（g）与 样量 1.0 μL；升温程序：柱初始温度保持在 40 ℃持
液体体积（mL）数值的比，下同〕1∶2，抽滤，滤 续 3 min，以 6 ℃/min 的速度升至 160 ℃，保持 2 min，
渣再加入体积分数 40%乙醇溶液浸泡 24 h，抽滤， 再以 6 ℃/min 的速度升至 280 ℃，保持 280 ℃持续
合并滤液，备用。 2 min。
1.2.2 囊壁材料的选择 MS 条件：质谱接口温度 250 ℃，电离方式 EI+，
依据罗汉松枝叶挥发油的特点，分别选用-环 离子源温度 250 ℃，离子能量 70 eV，灯丝电流为
糊精、 -环糊精和-环糊精包裹罗汉松挥发油。通过 100 μA。