Page 153 - 精细化工2019年第8期
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第 8 期                    张   文,等:  不同前处理对动物组织中氯丙嗪残留检测对比                                 ·1641·


                 叔丁基甲醚直接提取法净化效果略差,可能是                          2.3    质谱条件优化
            因为叔丁基甲醚提取出部分脂类物质。猪肉样品氮                                 质谱条件的优化采用直接进样方式将质量浓度
            气吹后可明显看到白色油状物质,这是由于所采用                             为 10 μg/L 的标准溶液进样,选择 ESI+的电离模式,
            的猪肉样品含有肥肉,并且进一步说明叔丁基甲醚                             对目标物进行一级质谱扫描,获得较高响应母离子
            提取出了脂肪等基质干扰物质。现有方法一般采用                             [M+H] 。对去簇电压和碰撞能量分别进行优化,使
                                                                     +
            乙腈-正己烷萃取除去脂肪            [14] ,经过实验发现,萃取            选定的特征碎片离子强度达到最大。选取 2 个丰度
            过程会显著降低氯丙嗪的回收率,并且浪费试剂和                             强且稳定的碎片离子作为定性与定量离子,以满足
            时间,因此,在前处理时采用冷冻离心的方法,达                             欧盟 657/2002/EC 号指令对于禁用药物液相色谱-质
            到除脂的效果。这与张烁等             [25] 的研究结果一致。             谱方法定性监测的规定,满足 1 个母离子和至少 2
                 QuECHERS 法中 PSA 吸附蛋白质、糖类和极性                   个子离子共 4 个识别点数的要求。优化得到的质谱
            较高的酸性物质,C 18 吸附脂肪等非极性干扰物,                          参数如表 1 所示。
            GCB 对平面结构分子有很强的亲和性,能有效地去
            除色素和甾醇。薛良辰等            [26] 研究表明:QuECHERS                    表 1    盐酸氯丙嗪质谱采集参数
            法中常用的除水剂无水硫酸镁和无水硫酸钠中,2~                            Table  1    MS/MS  acquisition  conditions  for  analysis  of
                                                                       chlorpromazine
            5 g 无水硫酸钠可除掉提取液中 43%~50%的水,1.5
                                                                      保留时间     母离子     子离子      去簇     碰撞
            g 无水硫酸镁能够除去 97%左右的水,瞬时放热可                           化合物
                                                                      (t R)/min (m/Z)  (m/Z)   电压/V   能量/eV
            达 65 ℃以上。本文前处理时先采用大量无水硫酸钠
                                                                氯丙嗪     0.725    319   86,58  110,110  20,24
            除去提取液中水分,并利用盐析作用除去部分蛋白

            质。在 QuEChERS 吸附剂中则采用少量除水效果更                        2.4    基质效应的评价
            好的无水硫酸镁,除去剩余的水分,避免了由于大                                 基质效应是由基质中的共提干扰物(非目标化
            量的无水硫酸镁吸水放热而导致热不稳定的氯丙嗪                             合物)与目标化合物竞争电离所致                [28] 。在配置电喷
            损失。但是无水硫酸钠和无水硫酸镁会导致净化后                             雾源的 LC-MS 定性定量分析中,基质效应影响仪器
            有少量盐类物质析出,可能会降低色谱分离和离子                             的灵敏度和重复性,从而影响检测结果的准确度                     [24] 。
            源电离效率,并影响仪器灵敏度               [27] 。王杰等  [17] 研究                    [29]
                                                               按照 Matuszewski    等提出的提取后添加法评价基
            EMR-L(Enhanced matrix removal-Lipid)方法处理
                                                               质效应。以定容液为溶剂配制质量浓度为 1 μg/L 的
            猪肉样品重复进样后质谱信号的变化,发现信号强
                                                               标准溶液,测定其峰面积为 A;以阴性空白基质提
            度降低和基线噪音增高可能是由于 EMR-L 方法的
                                                               取液作为溶剂,配制质量浓度为 1 μg/L 的标准溶液,
            盐析步骤中含有大量 NaCl 和 MgSO 4 导致盐类物质
                                                               定其峰面积为 B。基质效应 ME/%=B/A×100,结果
            析出所致。
                                                               如表 2 所示。其中,ME>100%为基质增强效应,
            2.2    色谱条件的优化
                                                               ME<100%为基质抑制效应,ME=100%可以当作基
                 采用浓度为 0.01  mol/L 的甲酸铵缓冲液(pH=
                                                               质效应不存在,这是最为理想的一种情况,但实际
            4.0)和乙腈作为流动相,优化梯度洗脱程序,得到
                                                               操作中,理想情况很难得到。一般相对比值在 85%~
            盐酸氯丙嗪的总离子流图和色谱提取图如图 2 所
                                                               115%则认为基质效应不明显。
            示。目标化合物色谱峰型尖锐对称,灵敏度高,可

            用于目标化合物定性定量分析。                                     表 2    各类基质中氯丙嗪在不同前处理方法下的基质效应
                                                               Table 2    Matrix  effects  for  chlorpromazine  in  different
                                                                      tissues under different sample preparation methods
                                                                检测       前处理方法               基质效应/%
                                                                对象                      猪肉   猪肝    鸡肉   鱼肉
                                                                     QuECHERS 法         110   114   102  113
                                                               氯丙嗪   MCX 固相萃取法          108   102   110   98
                                                                     叔丁基甲醚直接提取法  125          114   118  112

                                                                   由表 2 可知,本文的 3 种前处理方法中,除叔
                                                               丁基甲醚直接提取法基质效应影响略大,其余方法

                                                               提取所得的样液基质效应不明显。在基质效应不明
                  图 2    氯丙嗪总离子流图和提取离子色谱图                      显的情况下能够更加客观地评价 3 种前处理方法对
            Fig.  2    Total  ion  chromatogram  (TIC)  and  extracted  ion
                   chromatogram of chlorpromazine              实验回收率和精密度的影响,并且无需使用基质配
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