Page 153 - 精细化工2019年第8期

第 8 期 张 文，等: 不同前处理对动物组织中氯丙嗪残留检测对比 ·1641·

叔丁基甲醚直接提取法净化效果略差，可能是 2.3 质谱条件优化
因为叔丁基甲醚提取出部分脂类物质。猪肉样品氮 质谱条件的优化采用直接进样方式将质量浓度
气吹后可明显看到白色油状物质，这是由于所采用 为 10 μg/L 的标准溶液进样，选择 ESI+的电离模式，
的猪肉样品含有肥肉，并且进一步说明叔丁基甲醚 对目标物进行一级质谱扫描，获得较高响应母离子
提取出了脂肪等基质干扰物质。现有方法一般采用 [M+H] 。对去簇电压和碰撞能量分别进行优化，使
+
乙腈-正己烷萃取除去脂肪 [14] ，经过实验发现，萃取 选定的特征碎片离子强度达到最大。选取 2 个丰度
过程会显著降低氯丙嗪的回收率，并且浪费试剂和 强且稳定的碎片离子作为定性与定量离子，以满足
时间，因此，在前处理时采用冷冻离心的方法，达 欧盟 657/2002/EC 号指令对于禁用药物液相色谱-质
到除脂的效果。这与张烁等 [25] 的研究结果一致。 谱方法定性监测的规定，满足 1 个母离子和至少 2
QuECHERS 法中 PSA 吸附蛋白质、糖类和极性 个子离子共 4 个识别点数的要求。优化得到的质谱
较高的酸性物质，C 18 吸附脂肪等非极性干扰物， 参数如表 1 所示。
GCB 对平面结构分子有很强的亲和性，能有效地去
除色素和甾醇。薛良辰等 [26] 研究表明：QuECHERS 表 1 盐酸氯丙嗪质谱采集参数
法中常用的除水剂无水硫酸镁和无水硫酸钠中，2~ Table 1 MS/MS acquisition conditions for analysis of
chlorpromazine
5 g 无水硫酸钠可除掉提取液中 43%~50%的水，1.5
保留时间 母离子 子离子 去簇 碰撞
g 无水硫酸镁能够除去 97%左右的水，瞬时放热可 化合物
（t R）/min （m/Z） （m/Z） 电压/V 能量/eV
达 65 ℃以上。本文前处理时先采用大量无水硫酸钠
氯丙嗪 0.725 319 86，58 110，110 20，24
除去提取液中水分，并利用盐析作用除去部分蛋白

质。在 QuEChERS 吸附剂中则采用少量除水效果更 2.4 基质效应的评价
好的无水硫酸镁，除去剩余的水分，避免了由于大 基质效应是由基质中的共提干扰物（非目标化
量的无水硫酸镁吸水放热而导致热不稳定的氯丙嗪 合物）与目标化合物竞争电离所致 [28] 。在配置电喷
损失。但是无水硫酸钠和无水硫酸镁会导致净化后 雾源的 LC-MS 定性定量分析中，基质效应影响仪器
有少量盐类物质析出，可能会降低色谱分离和离子 的灵敏度和重复性，从而影响检测结果的准确度 [24] 。
源电离效率，并影响仪器灵敏度 [27] 。王杰等 [17] 研究 [29]
按照 Matuszewski 等提出的提取后添加法评价基
EMR-L（Enhanced matrix removal-Lipid）方法处理
质效应。以定容液为溶剂配制质量浓度为 1 μg/L 的
猪肉样品重复进样后质谱信号的变化，发现信号强
标准溶液，测定其峰面积为 A；以阴性空白基质提
度降低和基线噪音增高可能是由于 EMR-L 方法的
取液作为溶剂，配制质量浓度为 1 μg/L 的标准溶液，
盐析步骤中含有大量 NaCl 和 MgSO 4 导致盐类物质
定其峰面积为 B。基质效应 ME/%＝B/A×100，结果
析出所致。
如表 2 所示。其中，ME>100%为基质增强效应，
2.2 色谱条件的优化
ME<100%为基质抑制效应，ME=100%可以当作基
采用浓度为 0.01 mol/L 的甲酸铵缓冲液（pH=
质效应不存在，这是最为理想的一种情况，但实际
4.0）和乙腈作为流动相，优化梯度洗脱程序，得到
操作中，理想情况很难得到。一般相对比值在 85%~
盐酸氯丙嗪的总离子流图和色谱提取图如图 2 所
115%则认为基质效应不明显。
示。目标化合物色谱峰型尖锐对称，灵敏度高，可

用于目标化合物定性定量分析。 表 2 各类基质中氯丙嗪在不同前处理方法下的基质效应
Table 2 Matrix effects for chlorpromazine in different
tissues under different sample preparation methods
检测 前处理方法 基质效应/%
对象 猪肉 猪肝 鸡肉 鱼肉
QuECHERS 法 110 114 102 113
氯丙嗪 MCX 固相萃取法 108 102 110 98
叔丁基甲醚直接提取法 125 114 118 112

由表 2 可知，本文的 3 种前处理方法中，除叔
丁基甲醚直接提取法基质效应影响略大，其余方法

提取所得的样液基质效应不明显。在基质效应不明
图 2 氯丙嗪总离子流图和提取离子色谱图 显的情况下能够更加客观地评价 3 种前处理方法对
Fig. 2 Total ion chromatogram (TIC) and extracted ion
chromatogram of chlorpromazine 实验回收率和精密度的影响，并且无需使用基质配