Page 151 - 精细化工2019年第8期

第 8 期 张 文，等: 不同前处理对动物组织中氯丙嗪残留检测对比 ·1639·

允许作治疗用，但在动物性食品中不得检出。因此， >99.5%，德国 Dr. Ehrenstorfer GmbH 公司；β-葡糖
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找到一种快速、准确的氯丙嗪检测方法对于实现食 苷醛甙酶-芳基硫酸酯酶，酶活≥8.5×10 units/L，美
品中氯丙嗪含量的有效监管具有重要意义。 国 Sigma 公司产品；N-丙基乙二胺吸附剂（PSA）、
近年来，检测氯丙嗪的方法有酶联免疫法 十八烷基键合硅胶吸附剂（C 18 ）、无水硫酸镁、石
[8-10]
（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA） 、 墨化碳黑吸附剂（GCB），成都雅源科技有限公司；
气相色谱法 [11] （Gas chromatography，GC）、高效液 甲醇、乙腈、无水乙醇、甲酸，色谱纯，德国 Merck
相色谱法（High performance liquid chromatography， 公司；实验用水由 UV-R 超纯水机制备。
HPLC ） [12] 、气 相色 谱 - 质谱 联用 法（ Gas Agilent 6420 Triple Quad 液质联用仪〔配有
chromatography-mass spectrum，GC-MS） [13] 、液相 Agilent 1290 超高效液相色谱仪，电喷雾离子源
色谱 - 质谱联用法（ Liquid chromatography-mass （ESI）及 Masshunt 数据处理系统〕、Agilent SB-C 18
spectrum/ mass spectrum，LC-MS/MS） [4,14-16] 等。其 色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.8 μm），美国 Agilent 公
中，酶联免疫法稳定性和重复性较差，易造成漏检 司；UV-R 超纯水机，法国 Millipore 公司；S220 pH
和假阳性。色谱法干扰大，灵敏度低，定性能力较 测定仪，瑞士 Mettler-Toledo 公司；量程 10~100 μL、
差。GC-MS 虽有较好的灵敏度，但需要进行衍生化， 100~1000 μL 和 1~10 mL 移液器，德国 Eppendorf
耗时较长且操作繁琐。LC-MS/MS 具有较高的灵敏 公司；T25 高速组织匀浆机，德国 IKA 公司；MTN-
度，选择性和特异性较好、可以提供待测物的结构 5800A 氮吹浓缩装置，天津奥特赛恩斯仪器有限公
信息，是检测氯丙嗪的理想方法。 司；VP6122050 抽滤装置，美国 Cole-Parmer 公司；
动物源性食品具有基质复杂、干扰物多、难以 Waters Oasis MCX 固相萃取小柱（60 mg，3 mL）、
分离提纯等问题。因此，高效准确的前处理是进行 Waters Oasis HLB 固相萃取小柱（500 mg，6 mL），
后续检测的关键 [17] 。国内外现有文献报道关于氯丙 美国 Waters 公司；Agela Cleanert PCX 固相萃取小
嗪等精神类药物的检测以尿液、血样或单一基质为 柱（60 mg，3 mL），天津博纳艾杰尔科技有限公司。
主，以动物源性食品基质为对象的报道较少，并且 1.2 方法
主要是以一种前处理方法进行基质的前处理。现有 1.2.1 样品制备
新鲜猪肉、鸡肉、鱼肉、猪肝去皮去骨，分别
报道的前处理方法种类多，应用于质谱检测结果各
切成小块后打碎，均质混匀，装入聚乙烯瓶中，于
有差异，缺乏系统对比。动物源性食品兽药残留检
18 ℃冷冻保存，测定前解冻、称样。
测的前处理有多种方法，如固相萃取（Solid phase
extraction，SPE）法 [18-19] 、叔丁基甲醚直接提取法 [20-21] 1.2.2 标准溶液的配制
将盐酸氯丙嗪标准品按纯度折算后精密称取
等，用于去除基质干扰和净化目标化合物，从而提
10 mg，置 100 mL 量瓶中，加甲醇适量溶解并定容
高检测灵敏度。MCX 固相萃取柱的填料是一种混合
至刻度，摇匀，作为标准品储备液（质量浓度为
型强阳离子交换吸附剂，能够有效去除基质中的干
100 mg/L）。置于20 ℃冰箱中保存，有效期为 1 个
扰。近年来 ， QuECHERS （ Quick, Easy, Cheap,
月，实验中根据具体需求把储备液稀释成不同浓度
Effective, Rugged and Safe）法由于高效、快速等优
的标准溶液，现用现配。
势逐渐由农残检测应用于兽药残留检测 [22-23] 。
1.2.3 QuECHERS 法
中国是肉类生产和消费大国，建立可靠便捷的
参考标准 SN/T 3235—2012《出口动物源食品
兽药残留检测方法是保证肉品安全的重要保障。本
中多类禁用药物残留量检测方法液相色谱-质谱法》
文以猪肉、猪肝、鸡肉、鱼肉 4 种复杂基质为研究
进行检测。
对象，结合 UPLC-MS/MS 技术，比较了 QuECHERS
QuEChERS 吸附剂制备：准确称取 N-丙基乙二
法、MCX 固相萃取法和叔丁基甲醚直接提取法 3 种
胺吸附剂（PSA）100 mg、十八烷基键合硅胶吸附
前处理方法对氯丙嗪残留的检测效果，以期为氯丙
剂（C 18 ）50 mg、无水硫酸镁 400 mg、石墨化碳黑
嗪等兽药残留检测技术提供理论支撑和参考。
吸附剂（GCB）20 mg，储存于 25 mL 螺旋盖聚丙
1 实验部分 烯离心管中，旋紧管盖，置于干燥箱内备用。
提取：取样品 2 g 置于 50 mL 聚丙烯离心管中，
1.1 材料、试剂与仪器 加入 8 mL 乙酸铵缓冲液，高速均质 0.5 min，加入
新鲜猪肉、鸡肉、猪肝、鱼肉，当地农贸市场。 30 μL β-葡糖苷醛甙酶-芳基硫酸酯酶，涡旋混合
盐酸氯丙嗪标准品（ Chlorpromazine 0.5 min，37 ℃振荡温育 12 h。然后静置至室温后，
hydrochloride ， CPZ， CAS#:69-09-0 ）， 质量分 数 加入 15 mL V（氨水）∶V（乙腈）=1∶100 的溶液，