Page 133 - 精细化工2020年第2期

第 2 期 席高磊，等: 二茂铁基咪唑并[1,2-a]吡啶化合物的合成及其抗氧化性能 ·335·

（PBS 2）、75.0 mmol/L 的 CuSO 4 溶液（PBS 2）、2.24 g/L 的合成为例，探究了催化剂种类、反应温度对化合
的 DNA 溶液（PBS 2 ）、30.0 mmol/L 的 EDTA 溶液 物Ⅱ产率的影响，实验结果列于表 1 中。
（PBS 2）、TBA 溶液（1.0 g TBA、0.4 g NaOH、100 mL
①
PBS 2 ），其他溶液配制参见 1.3.1 节。分别取 1.0 mL 表 1 不同反应条件对目标化合物Ⅱ合成产率的影响
Table 1 Effects of reaction conditions on the synthesis of
CuSO 4 溶液、0.5 mL GSH 溶液、13.4 mL DNA 溶液
the target compound Ⅱ
置于 50 mL 锥形瓶中，再加入 0.1 mL 待测化合物储
Yield/% Yield/%
备液，使待测化合物终浓度为 50 μmol/L。充分混匀 Entry Acid Entry Acid
②
②
60 ℃ 80 ℃ 60 ℃ 80 ℃
后取 2 mL（平行 3 组）加入到试管中，在 37 ℃恒温
1 catalyst-free trace trace 8 Ce(OTf) 3 trace 37
水浴中温育1.5 h，冷却至室温，依次加入1.0 mL EDTA
2 HCl trace trace 9 Sc(OTf) 3 trace 45
溶液、1.0 mL TBA 溶液和 1.0 mL TCA 溶液，振荡
3 HClO 4 trace trace 10 InCl 3 2 3 4 6
混匀后，在 100 ℃水浴中加热 30 min，冷却至室温，
4 CH 3COOH trace 12 11 BiCl 3 3 3 6 3
加入 1.5 mL 正丁醇充分振荡萃取 TBARS，离心分
5 NH 4Cl trace 19 12 TMSCl 52 41
层后，测定正丁醇层在 535 nm 波长处的吸光度值。
6 Ag(OTf) 3 trace 23 13 LaCl 3·7H 2O 8 8 8 6
1.4 捕获自由基性能研究 7 Yb(OTf) 3 trace 32 14 LaCl 3 9 2 8 7
+
1.4.1 捕获 ABTS •性能研究
①反应时间为 2 h；②所用酸的量为 2-氨基吡啶物质的量
按照文献[28]报道的方法。首先，称取 5.0 mg 的 10%。
+
ABTS •和 1.5 mg K 2 S 2 O 8 加入 2 mL 的容量瓶中，加
蒸馏水定容后，在室温暗处放置 24 h，颜色变为深 由表 1 可以看出，选用乙醇作溶剂，以 LaCl 3
为催化剂，60 ℃加热反应 2 h，是合成目标化合物
蓝。之后转移至 100 mL 的容量瓶中，以无水乙醇定
+
容，并在 30 ℃恒温水浴中放置 30 min，得到 ABTS • 的较佳方法，化合物Ⅱ的产率为 92%，明显高于其
他几种方法的合成产率。因此，采用该方法顺利地
乙醇溶液。该溶液在 734 nm 吸光度值最大，为 1 13
+
1.859，在该波长下，ABTS •的摩尔消光系数为 1.6 合成了其他目标化合物，并通过 HNMR、 CNMR
+
4
10 L/(mol·cm)。化合物淬灭 ABTS •的操作如下： 和 HRMS 等手段对其结构进行了确证。
+
移取 1.9 mL ABTS •乙醇溶液和 0.1 mL 浓度为 2.2 抑制自由基引发的 DNA 氧化反应性能分析
2.2.1 抑制 HO•引发的 DNA 氧化反应体系结果分析
400 mol/L 待测化合物储备液加入试管中，使待测化
合物终浓度为 20 mol/L，迅速混匀，并记录 0~1200 s 空白实验和加入化合物后的吸光度值分别为
最大吸收波长处吸光度值(A)随时间的衰减曲线。 A blank 和 A detect ，化合物的抗氧化能力可以化合物相
1.4.2 捕获 DPPH•性能研究 对空白 TBARS 吸光度百分数（TBARS 百分数）进
按照文献[28]报道的方法。首先，称取 4.0 mg 行衡量，即 A detect /A blank ×100%。重复上述实验 3 次，
DPPH•，加入 20 mL 烧杯中，以少量无水乙醇溶解， 得到的平行数据（数据误差<5%）求平均值，之后
之后转移至 100 mL 容量瓶中，以无水乙醇定容，得 以 TBARS 百分数作柱状图，如图 1 所示。

到 DPPH•乙醇溶液，该溶液最大吸收波长在 517 nm
处，吸光度值约为 1.873，在该波长下的摩尔消光系
3
数为 4.09×10 L/(mol·cm)。化合物淬灭 DPPH•的操
+
作方法与化合物淬灭 ABTS •一致：移取 1.9 mL 的
DPPH•乙醇溶液和 0.1 mL 浓度为 1 mmol/L 待测化
合物储备液加入试管中，使待测化合物终浓度为
50 mol/L，迅速混匀，并记录 0~1200 s 最大吸收波

长处吸光度值(A)随时间的衰减曲线。
图 1 抑制 HO•引发的 DNA 氧化反应体系中化合物的
1.5 数据统计与分析 TBARS 百分数
采用 Origin 8.0 软件对所得数据进行 ANOVA 方 Fig. 1 The percentages of TBARS of compounds in inhibiting
差分析，显著性检验方法为 Duncan 多重检验，显著 HO• induced oxidation of DNA

水平为 0.05。
由图 1 可知，6 个化合物 TBARS 百分数均低于
2 结果与讨论 空白的 100%，表明化合物Ⅰ~Ⅵ均具备抑制 HO•引
发 DNA 氧化反应的能力。为了更直观地表达各个化
2.1 化合物的合成 合物 TBARS 百分数与结构之间的关系，按照 TBARS
在目标化合物的合成中，以二茂铁基化合物Ⅱ 百分数的大小排列成梯形图，结果如图 2 所示。