Page 184 - 《精细化工》2020年第6期
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·1250·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 37 卷

            本课题组     [6-7] 设计合成了系列含一个氨基酸片段的
            膦酸酯衍生物，抗肿瘤活性测试结果表明，部分化
            合物对人肺癌细胞 （A-549）、胃癌细胞（SGC-7901）、
            人食管癌细胞（EC-109）有较好的增殖抑制作用。其
            中，含 L-苯丙氨酸片段的膦酸酯衍生物表现出更优
            的抗肿瘤活性，值得进一步优化其结构以获取高活性

            抗肿瘤化合物。相关文献报道，小分子肽类衍生物因                                中间体Ⅰ的制备：参照文献[13]的方法制备。
            分子量小，与细胞及核酸具有很好的亲和性，极易穿                                中间体Ⅱ的制备：参照文献[14]的方法合成。以
            透肿瘤细胞，提高免疫应答，抑制肿瘤的形成、生长                            Ⅱa 的合成为例，向 100 mL 的反应瓶中加入苯丙氨
            和转移等，现已成为抗肿瘤药物研究的新热点                      [8-9] 。  酸甲酯盐酸盐（0.43 g，2.0 mmol）和 20 mL  四氢呋
            ALBERICI 等   [10] 将两个或两个以上氨基酸引入到药                  喃，0~5  ℃搅拌反应 10 min，然后加入 NMM（0.30 g，
            物分子中设计得到的短肽衍生物更有利于到达肿瘤                             3.0 mmol）反应 40 min；向另一个 100 mL 的反应瓶
            细胞组织内进而有效发挥抗肿瘤作用，这也是抗肿                             中加入 Boc-L-丙氨酸（0.38 g，2.0 mmol）和 HOBt
            瘤药物一个很有前景的发展方向。文献[11-12]研究                         （0.41 g，3.0 mmol）和 20 mL 四氢呋喃，0~5 ℃搅拌
            证实，一些含 L-苯丙氨酸结构的二肽衍生物呈现较                           反应 20 min，然后加入 EDCI（0.57 g，3.0 mmol），反
            优的抗肿瘤活性。                                           应约 40 min；将上述两反应瓶中反应液混合，继续
                 基于已有研究基础及相关文献报道，本文拟在                          搅拌反应，薄层色谱法（TLC）跟踪〔展开剂为 V (乙
            含有 L-苯丙氨酸片段的膦酸酯衍生物中，采用活性                           酸乙酯)∶V (石油醚)=3∶1〕，反应完毕，加入 50 mL
                                                               乙酸乙酯混合，再分别用质量分数为 5%碳酸氢钠、
            片段组合原理，再引入一个氨基酸片段，设计合成
                                                               质量分数为 10%柠檬酸、质量分数为 5%的碳酸氢
            系列含膦酸酯结构的 L-苯丙氨酸二肽衍生物，以期
                                                               钠、饱和食盐水各 20 mL 先后洗涤， 无水硫酸钠干燥，
            获取抗肿瘤活性化合物。
                                                               过滤，减压浓缩，得白色固体，即为 Boc-L-丙氨酰
            1    实验部分                                          苯丙氨酸甲酯。
                                                                   取上述白色固体（0.35 g，1.0 mmol）于 50 mL
            1.1    试剂与仪器                                       的反应瓶中，加入 10 mL 甲醇溶解，在冰浴下缓慢
                 苯甲醛、邻氟苯甲醛、对氟苯甲醛、亚磷酸二                          加入质量分数为 10%的氢氧化钠，搅拌反应 2 h，然
            乙酯、4-二甲氨基吡啶（DMAP）、1-乙基-（3-二甲                       后用 2 mol/L 的盐酸调节 pH 至 7~8，减压浓缩，加蒸
            基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（EDCI）、1-羟基                          馏水适量，先用乙醚（3×10 mL）萃取，除去杂质，
            苯并三唑（HOBt）、N-甲基吗啡啉（NMM） 、L-苯                       水层调节 pH 至 4~5，再用乙酸乙酯（5×20 mL）萃
            丙氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸，百灵威化学试剂公                           取，合并酯层，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，
            司，反应溶剂用前需经无水干燥处理；其余试剂与                             得白色固体 Boc-L-丙氨酰苯丙氨酸（Ⅱa），收率
                                                                      1
            溶剂，均为分析纯，国药试剂公司。                                   43.7%； HNMR (400 MHz, CDCl 3 ), δ: 7.32~7.10 (m,
                 X-4 型数显熔点测定仪，上海精密仪器仪表有                        5H), 6.85 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 5.36~5.06 (m, 1H), 4.82
                                                               (q,  1H,  J  =  8.0  Hz),  4.21  (s,  1H),  3.20  (dd,  1H,  J  =
            限公司；Autopol  Ⅵ  型旋光仪，美国 Rudolph 公司；
                                                               16.0, 8.0 Hz), 3.03 (dd, 1H, J = 16.0, 8.0 Hz), 1.43 (s,
            Varian  400  MHz 核磁共振波谱仪（溶剂 CDCl 3 ，内              9H), 1.26 (s, 3H); ESI-MS,  理论值 337.2[M+H] ；实
                                                                                                        +
            标 TMS），美国 Varian 技术公司；Agilent 6460 质谱              际值 337.0[M+H] 。其余中间体按照上述方法制得。
                                                                              +
            仪，美国 Agilent 技术公司；ELX800 通用酶标仪，美                       Boc-L-苯丙氨酰苯丙氨酸（Ⅱb），收率 51.5%；
            国 BioTek 公司。                                       1 HNMR  (400  MHz,  CDCl 3 ),  δ:  7.52~6.89  (m,  10H),
            1.2   方法                                           6.77~6.29  (m,  1H),  5.26~4.87  (m,  2H),  4.40  (s,  1H),
                                                               3.44~2.91 (m, 4H), 1.41 (s, 9H); ESI-MS, m/Z：理论
            1.2.1    目标物 L-苯丙氨酸二肽衍生物的合成
                                                                            +
                                                                                                +
                                                               值 413.2[M+H] ；实际值 413.0[M+H] 。
                 合成路线如下所示：
                                                                   Boc-L-脯氨酰苯丙氨酸（Ⅱc），收率 48.2%；
                                                               1 HNMR  (500  MHz，CDCl 3 ),  δ:  7.20~7.27  (m,  4H),
                                                               7.14~7.16 (m, 2H), 4.87 (bs, 1H), 4.25~4.29 (m, 1H),
                                                               3.27~3.37 (m, 3H), 3.05~3.07 (m, 1H), 2.06~2.09 (m,
                                                               1H), 1.74~1.86 (m, 3H), 1.38 (s, 9H); ESI-MS, m/Z：理
                                                                                                  +
                                                                              +
                                                               论值 363.2[M+H] ；实际值 363.0[M+H] 。
                                                                   目标物Ⅲ的制备：以Ⅲa 的合成为例，取中间体
                                                               Ⅱa（0.168 g，0.05 mmol）、DMAP（0.062 g，0.05 mmol）
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