Page 186 - 《精细化工》2020年第6期

·1252· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷

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HNMR (400 MHz, CDCl 3 )，δ: 1.15 (t, 3H, J = 4.0 Hz, 示，以四氢呋喃为溶剂，副产物最少，收率更高。pH
CH 3 ), 1.18 (t, 3H, J = 4.0 Hz, CH 3 ), 1.61~1.66 (m, 1H, 过高，副产物增加；pH 过小，则反应较慢，以 pH=
NH), 1.73~1.96 (m, 2H, CH 2 ), 2.12~2.44 (m, 2H, 11.5~12.5 较优。TLC 跟踪反应显示，低温（–5~0 ℃）
CH 2 ), 3.02~3.25 (m, 4H, NCH 2 +CH 2 Ph), 3.90~4.16
(m, 4H, 2OCH 2 CH 3 ), 4.28~4.31 (m, 1H, NCH), 条件下脱甲酯反应更彻底，副产物更少。
4.93~4.96 (m, 1H, NCH), 6.40 (q, 1H, J = 20.0 Hz, 2.2 抗肿瘤活性
PCH), 7.00~7.41 (m, 10H, Ar—H), 8.31 (s, 1H, NH)； 目标化合物对不同肿瘤细胞的 IC 50 值见表 1。
13 CNMR (100 MHz, CDCl 3 )，δ: 16.1, 16.2, 24.3, 27.9,
37.6, 46.8, 52.2, 59.7, 63.4, 63.5, 80.3, 126.6, 126.3, 表 1 目标化合物对不同肿瘤细胞的 IC 50 值
127.1, 128.5, 129.0, 129.2, 129.6, 130.3, 136.6, 138.9, Table 1 IC 50 values of target compounds for different
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169.0, 169.8; ESI-MS, m/Z：理论值 489.2[M+H] ；实 tumor cells
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际值 489.0[M+H] 。 化合物 IC 50/(μmol/L)
O,O'-二乙基[α-(2-氟苯基)-α-(L-脯氨酰-L-苯丙 A-549 SGC-7901 EC-109
Ⅲa 42.5±2.0 35.4±0.8 27.1±0.5
氨酰氧基)]甲基膦酸酯（Ⅲh）：无色液体，收率 32.7%； Ⅲb 10.5±2.2 — 23.1±1.1
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[] 20 = +54.3°〔ρ(Ⅲh) = 50 g/L, CHCl 3 为溶剂〕；HNMR Ⅲc 12.9±1.7 10.5±1.3 27.9±2.5
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(400 MHz, CDCl 3 ), δ: 1.14 (t, 3H, J = 8.0 Hz, CH 3 ), Ⅲd — 38.8±1.8 28.0±1.2
1.17 (t, 3H, J = 8.0 Hz, CH 3 ), 1.58~1.65 (m, 1H, NH), Ⅲe 11.8±0.9 30.2±2.0 —
1.72~1.94 (m, 2H, CH 2 ), 2.10~2.14 (m, 2H, CH 2 ), Ⅲf 6.8±0.6 13.5±1.0 13.9±1.1
3.01~3.27 (m, 4H, NCH 2 +CH 2 Ph), 3.90~4.16 (m, 4H, Ⅲg 46.6±2.8 16.7±1.2 29.0±2.0
2OCH 2 CH 3 ), 4.27~4.42 (m, 1H, NCH), 4.94 (m, 1H, Ⅲh 44.7±2.5 12.7±1.5 11.5±1.8
NCH), 6.39 (q, 1H, J = 24.0 Hz, PCH), 6.94~7.66 (m, Ⅲi 6.8±0.9 15.0±0.9 7.0±1.2
13
9H, Ar—H), 8.15 (s, 1H, NH)； CNMR (100 MHz, 顺铂 6.0±0.5 5.8±0.8 5.9±0.7
CDCl 3 ), δ: 16.1, 16.2, 23.4, 27.9, 37.7, 46.8, 52.3, 60.8,
63.3, 63.4, 80.4, 115.4, 126.7, 126.9, 127.2, 128.1, 由表 1 可知，目标化合物对肿瘤细胞 A-549、
128.6, 130.4, 139.4, 158.6, 168.9, 169.8; ESI-MS, m/Z： SGC-7901 和 EC-109 有不同程度的增殖抑制作用，其
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理论值 507.2[M+H] ；实际值 507.0[M+H] 。 中化合物Ⅲb、Ⅲf、Ⅲi 对 A-549 有较优活性，IC 50
O,O'-二乙基[α-(4-氟苯基)-α-(L-脯氨酰-L-苯丙 分别为（10.5±2.2）、（6.8±0.6） 、（6.8± 0.9） μmol/L；
氨酰氧基)]甲基膦酸酯（Ⅲi）：无色黏稠液体，收率 化合物Ⅲ c 对 SGC-7901 的活性较 好， IC 50 为
29.3%；[] 20 = +55.7°〔ρ(Ⅲi) = 50 g/L, CHCl 3 为溶 （10.5±1.3） μmol/L；化合物Ⅲi 对 EC-109 的活性
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剂〕； HNMR (400 MHz, CDCl 3 ), δ: 1.10 (t, 3H, J = 最好，IC 50 为（7.0±1.2） μmol/L。综上所述，目标
12.0 Hz, CH 3 ), 1.15 (t, 3H, J = 12.0 Hz, CH 3 ), 物Ⅲi 最为突出，对所测肿瘤细胞 A-549 和 EC-109
1.62~1.69 (m, 1H, NH), 1.73~1.96 (m, 2H, CH 2 ), 的增殖抑制作用与对照药顺铂相当。
2.14~2.40 (m, 2H, CH 2 ), 2.96~3.20 (m, 4H, 实验结果表明，氟原子处于苯环对位的目标物
NCH 2 +CH 2 Ph), 3.84~4.01 (m, 4H, 2OCH 2 CH 3 ),
4.19~4.25 (m, 1H, NCH), 4.91 (s, 1H, NCH), 6.01 (q, 大多呈 现更 好的抗 肿瘤 活性， 如化 合物Ⅲ c 对
1H, J = 20.0 Hz, PCH), 6.95~7.39 (m, 9H, Ar—H), 8.22 SGC-7901、化合物Ⅲf 对 A-549、化合物Ⅲi 对 A-549
13
(s, 1H, NH); CNMR (100 MHz, CDCl 3 ), δ: 16.2, 和 EC-109 的抑制活性更显著；在二肽结构中，氨基
16.3, 23.3, 27.7, 37.5, 46.8, 52.3, 59.6, 63.3, 63.4, 酸的种类对抗肿瘤活性有较大影响，含 L-脯氨酸的
80.3, 115.3, 115.5, 126.6, 127.1, 128.5, 128.6, 128.8, Ⅲf 和含 L-苯丙氨酸的Ⅲi 呈现较强的活性。与本课
129.7, 135.3, 161.6, 169.2, 172.2; ESI-MS, m/Z：理论 题组前期设计合成的含一个氨基酸片段的膦酸酯衍
+
+
值 507.2[M+H] ；实际值 507.0[M+H] 。
生物比较，化合物Ⅲf、Ⅲi 对 A-549 和化合物Ⅲi
1.2.2 生物活性测试 对 EC-109 的增殖抑制活性更优 [6-7] 。
采用 MTT 法 [15] ，以顺铂为对照，测定目标化
合物对肿瘤细胞 A-549、SGC-7901 和 EC-109 的增 3 结论
殖抑制作用，用两点法（Reed and Muench 法） [2]
计算其 IC 50 值。 基于膦酸酯骨架，设计合成了系列 L-苯丙氨酸
二肽衍生物，体外抗肿瘤活性测试结果表明，含膦
2 结果与讨论
酸酯结构的 L-苯丙氨酸二肽衍生物呈现较优的抗肿
瘤活性，活性最好的是化合物Ⅲf、Ⅲi，表明氨基酸
2.1 合成方法
结构和种类对肿瘤细胞的增殖抑制作用有较大影响。
在制备二肽类中间体Ⅱ时，加入过量的 NMM，
在后续研究中，有必要扩大氨基酸的种类，进一步
能使氨基酸甲酯盐酸盐完全游离出氨基，更有利于
后续反应的发生，考察了甲醇、二氯甲烷、乙腈和 优化结构和深入研究。

四氢呋喃 4 种溶剂对反应的影响。TLC 跟踪反应显 （下转第 1281 页）