Page 96 - 《精细化工》2020年第9期

·1810· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷

加入肼后，δ 6.7 处 C==C 的信号峰大幅降低，并且
在 δ 5.1 处出现了酚羟基的信号峰。以上结果证实反
应机理猜想正确。

图 7 探针 NH1（10 μmol/L）与肼（40 μmol/L）反应最
大发射波长处荧光强度随时间变化曲线
Fig. 7 Fluorescence intensity at the maximum emission
wavelength of probe NH1(10 μmol/L) after the
addition of hydrazine (40 μmol/L) in a function of
time 图 9 加入不同浓度肼后的探针 NH1 和化合物Ⅱ的 HPLC
变化谱图
2.7 NH1 对肼的响应机理探究 Fig. 9 HPLC traces of the reference samples for NH1 after
探针 NH1 是一种基于分子内电荷转移 ICT 发光 the addition of different concentration hydrazine
and compound Ⅱ
机理的反应型荧光探针。猜测机理为，探针 NH1 中

的酯键与肼发生特异性反应，发生酯解，破坏了原
有的推-拉电子结构，使得探针荧光发生变化。机理
示意图见图 8。

图 10 加入肼（40 μmol/L）后探针 NH1（10 μmol/L）的

图 8 探针 NH1 与肼的响应机理示意图 1 HNMR 变化
1
Fig. 8 Probable response mechanism of probe NH1 for the Fig. 10 HNMR spectra of probe NH1 (10 μmol/L) after
detection of hydrazine adding hydrazine (40 μmol/L)

为了验证此机理，对加入肼的探针溶液进行高 2.8 NH1 在细胞内的应用
效液相色谱和核磁共振氢谱分析，结果见图 9、10。 本文对探针 NH1 进行了生物成像测试。为了提
如图 9 所示，在探针溶液（10 μmol/L）中逐渐 高实验的准确性，使用了 4 种不同的细胞（Hela 细
加入肼，探针 NH1 处的液相峰随之降低，并且出现 胞、A549 细胞、MCF-7 细胞和 MDA-MB 231 细胞）
了化合物Ⅱ的液相峰。在核磁共振氢谱图中（图 10）， 进行生物成像，结果见图 11。