Page 155 - 《精细化工》2021年第1期

第 1 期 谭 佳，等: 鸡脚脱脂除杂蛋白预处理工艺 ·145·

V(石油醚)∶V(乙醇)=1∶1 料液比 1∶4（g∶mL），
超声 5 次；第二步，碱性脂肪酶溶液料液比 1∶3
（g∶mL），超声 60 min，鸡脚糜脱脂率为 97.25%。
2.4.2 除杂蛋白效果
以热提法获得的明胶、原始鸡脚糜作为参比，
比较以上实验中较佳条件下制备的样品及将以上实
验较佳条件组合一起进行实验制备样品的脱脂率、
胶原蛋白损失率及脱除杂蛋白效果，结果见表 5。
由表 5 可以看出，A~E 条件下脱脂率均达到
90%以上。其中，经 A、D、E 条件处理后的脱脂率

图 6 两步处理时第一与第二步的料液比和超声时间（或 在 95%以上，最高的为 E 条件（97.25%）。与上述
次数）对脱脂率的影响 的仅采用碱性脂肪酶溶液（脂肪酶质量分数为
Fig. 6 Influences of solid-liquid ratio in the first and second 2.5%，NaOH 浓度 0.05 mol/L，pH 8）一步处理相比，
process and ultrasonic times or duration on degreasing
rate by the two-step processing 表 5 中采用两步法处理胶原蛋白损失率增大。这可
能由于经第一步 V(石油醚)∶V(乙醇)=1∶1 处理后，
将上述两步考察后确定的各因素较佳参数组合 鸡脚糜组织结构较松散，使第二步碱性脂肪酶溶液
一起得 E 条件，利用 E 条件处理鸡脚糜，即第一步， 中碱的脱蛋白效率提高所致。

表 5 比较优化后较佳条件（A~D）及较佳条件组合（E）所得脱脂率、胶原蛋白损失、脱杂蛋白效果
Table 5 Comparison of degreasing rate, collagen loss, and effect of removal of miscellaneous protein treated by the
optimized conditions (A~D) and the combined optimized conditions (E)
评价指标 原始鸡脚糜 A B C D E 明胶
脱脂率/% — 96.48 92.30 90.40 95.90 97.25 —
甘氨酸相对质量分数/% 19.99 23.99 22.42 23.06 18.06 27.31 23.67
脯氨酸相对质量分数/% 6.96 7.93 8.54 8.13 7.83 7.55 7.86
羟脯氨酸相对质量分数/% 6.22 9.07 8.77 8.36 7.98 8.31 9.39
胶原蛋白损失率/% — 9.31 19.97 15.09 24.48 27.37 —
注：“—”表示无此数据。

经 A、B、C、E 条件处理后，甘氨酸、脯氨酸 具体数据。另外，现有报道的预处理工艺往往脱脂
和羟脯氨酸占比均比原鸡脚糜中明显提高，并与明 率低于 95% [29] 。
胶较为接近，表明 4 种工艺均具有脱除杂蛋白选择
3 结论
性。相比之下，A、B、C、E 条件中，A 条件处理
的胶原蛋白损失率最低，且甘氨酸、羟脯氨酸、脯
通过对 V(石油醚)∶V(乙醇)=1∶1/NaCl 溶液
氨酸的相对质量分数与明胶最接近。故综合脱脂率
法、NaOH 溶液法、脂肪酶溶液法 3 种单一脱脂工艺
以及脱除杂蛋白情况，确定 A 为最佳条件，此时脱 进行研究，得出的结论是：V(石油醚)∶V(乙醇)=1∶
脂率为 96.48%，胶原蛋白损失率最低（9.31%），脱 1/NaCl 溶液法脱脂较好。设计 V(石油醚)∶V(乙
除杂蛋白选择性最好。 醇)=1∶1/碱性脂肪酶溶液两步法，通过单因素实验
工业化方法中多采用碱溶液法进行脱除杂蛋白 优化，获得较佳脱脂及除杂蛋白工艺：第一步，V(石
预处理 [12] 。如 LIU 等 [20] 采用 NaOH 溶液处理草鱼皮， 油醚)∶V(乙醇)= 1∶1 溶剂，料液比 1∶4（g∶mL），
考察了碱液浓度、处理温度、处理时间等因素对羟 超声萃取 3 次，每次超声 10 min 更换新的溶剂；第
脯氨酸和总蛋白损失的影响，获得了从草鱼皮中提 二步，碱性脂肪酶溶液（脂肪酶质量分数为 2.5%，
取胶原蛋白的较佳预处理条件。本文前言所述公维 NaOH 浓度为 0.05 mol/L，pH 8），料液比 1∶2（g∶
杰等 [21] 采用 NaCl 与 NaOH 溶液联用处理马面鱼皮， mL），超声处理 40 min。所建立方法具有脱脂率高
获得的较佳杂蛋白脱除率为 31.09%。但总体上，文 （96.48%），胶原蛋白损失率小（9.31%），除杂蛋
献报道多集中于胶原蛋白提取工艺及胶原蛋白产品 白选择性好的优点。
表征分析方面，而对胶原蛋白提取前预处理过程中， 下一步将采用圆二色谱、傅里叶变换红外光谱
胶原蛋白损失率尤其杂蛋白脱除选择性方面很少有 等手段检测处理后样品中胶原蛋白三维结构完整