Page 114 - 《精细化工》2021年第5期
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·968· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷
radicals and total reduction of 0.58±0.04 and 0.33±0.04. The results proved that the combination of
lingonberries anthocyanin and Lonicera japonica polyphenols had synergistic effect on the free radical
scavenging and total reduction ability.
Key words: lingonberries anthocyanin; Lonicera japonica; antioxidant properties; combination index;
synergistic effect;modernization technology of traditional Chinese medicines
随着生活水平的提高,人们在日常饮食中越来 1 实验部分
越重视功能性成分的摄入以保健身体,尤其注重抗
氧化功能性物质的补充,以延缓身体退化速度。医 1.1 试剂与仪器
学研究表明,细胞电子被抢夺是引起人类慢性疾病 红豆越橘花青素(矢车菊-3-葡萄糖苷质量分数
的主要原因,而自由基进入人体后极易抢夺细胞电 >90%),实验室制备 [10] ;金银花,市售。水溶性 V E
子,导致细胞的抵抗力降低,身体易受病菌感染, (Trolox)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2'-
联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、
甚至形成致癌物质。因此,抗氧化清除自由基一直
以来都是国内外的研究热点之一 [1-2] 。 还原型辅酶Ⅰ(NADH)、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)、
吩嗪硫酸甲酯(PMS)、新铜试剂,AR,Sigma 试剂
多种抗氧化剂配伍后的抗氧化效果大多显著高
[3]
于使用同等剂量的单一抗氧化剂的效果 ,抗氧化 公司;过硫酸钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、硫酸亚
铁、H 2O 2 、水杨酸钠、三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸缓
剂之间的协同作用受复配比例、抗氧化剂的种类及
冲液(Tris-HCl)、硫酸铜、醋酸铵、铁氰化钾、三氯
浓度、反应体系等因素的影响。近年来,国内外关
乙酸、三氯化铁,AR,国药集团化学试剂有限公司。
于协同抗氧化增效作用的研究成果颇丰,包括两种
JJ-2 型组织捣碎机,常州朗越仪器制造有限公
物质及多种物质的复配 [4-7] 。研究抗氧化剂之间的协
司;FA25 型高剪切分散乳化机,上海弗鲁克流体机
同增效作用,对于发现高效复合型天然抗氧化剂、
械制造有限公司;722 型紫外-可见分光光度计,上
减少抗氧化剂的用量以降低成本、高效利用抗氧化
海光谱仪器有限公司;Bio-rad 550 型酶标仪,美国
剂均具有重要意义。红豆越橘(Vaccinium vitis-idaea
伯乐公司。
L.)属于杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium)
1.2 实验方法
植物,别名红果、红豆、牙疙瘩,多分布于北美、
1.2.1 金银花多酚的提取
北欧、东亚的高山地区,在中国野生红豆越橘主要 将金银花粉碎后过 60 目筛,以料液比 1∶25
[8]
分布于大兴安岭地区 ,其果实富含黄酮、多酚、 (g∶mL)浸入体积分数为 50%乙醇水溶液中;接
花青素等功能性成分,具有较强的抗氧化活性 [9-13] 。
4
着,转入高剪切分散乳化机,在 1.8×10 r/min 下均
金银 花( Lonicera japonica Thunb)属 于 忍冬科
质 120 s;然后,抽滤,收集滤液,将滤液减压浓缩
(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera)植物,又名
除去乙醇;最后,在 45 ℃烘箱干燥 24 h,制得金
忍冬、金银藤,在中国各省均有分布。金银花富含 [14]
银花多酚 。
有机酸类(主要是绿原酸和异绿原酸)、挥发油类、
1.2.2 复配
黄酮类、多糖类、环烯醚萜类、三萜类及微量元素等
红豆越橘花青素与金银花多酚分别按质量比
功能性成分,其中,绿原酸、多糖、黄酮、多酚、三 5∶1、2∶1、1∶1、1∶2 和 1∶5 进行复配〔记为
萜类提取物均已被证明具有优异的抗氧化活性 [14-16] 。 复配物(5∶1)、(2∶1)、(1∶1)、(1∶2)和(1∶5),
金银花是中国二类贵重药材,在 2020 年的新冠肺炎 下同〕,溶于体积分数为 95%乙醇水溶液并稀释配制
疫情中也显示出其独特的抗病毒功效。相比于金银 成梯度质量浓度样液,用于后续相关指标的测定。
花的开发程度较高,人们对红豆越橘的认识及开发 1.2.3 清除 DPPH 自由基能力的测定
程度略显贫乏,利用率较低。 按照文献[18]稍作修改后的方法测定。在 96 孔
本研究拟在已有的对红豆越橘和金银花的抗 板中加入体积分数为 95%乙醇水溶液稀释配制成梯
氧化研究基础上,考察红豆越橘及金银花是否具有 度质量浓度样液 100 μL,与 100 μmol/L DPPH 乙醇
协同抗氧化作用,以平衡金银花的寒凉,缓解金银 溶液 200 μL 充分混匀并避光反应 30 min,于 517 nm
花用药量大、供不应求的现状 [17] 。希望可以进一步 波长下测吸光度 A i。对照组用体积分数为 95%的乙醇
在实际中应用,为红豆越橘功能性成分的利用及绿 水溶液代替 DPPH 溶液,测得吸光度 A j。空白组用体
色天然安全抗氧化保健食品、药品的开发提供一定 积分数为95%的乙醇水溶液代替样液,测得吸光度A 0。
的参考。 样品清除 DPPH 自由基的清除率按式(1)计算: