Page 146 - 《精细化工》2021年第7期
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·1428· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷
移,δ 3.71 为其甲氧基上的氢化学位移。以 1,3,5-
三甲氧基苯中芳环上的氢化学位移为基准,将其积
分面积调整为 3.00,相同条件下得到没食子酸结构
中芳环氢化学位移的积分面积为 1.92。因此,计算
出酶法制备的没食子酸的纯度为 96.0%。采用相同
方法,得到酸提取法制备的没食子酸的纯度为
81.5%。相比而言,单宁酶法制备的没食子酸纯度更高。
2.3 没食子酸的体外抗氧化活性
2.3.1 没食子酸对 DPPH•的清除能力
DPPH•作为一种相对稳定的自由基类物质,常
图 5 不同质量浓度没食子酸的•OH 清除率
被用于抗氧化剂的活性检测和筛选。不同质量浓度 Fig. 5 •OH scavenging rate of gallic acid with different mass
的没食子酸及阳性对照物 V C 对 DPPH•的清除率见 concentrations
图 4。由图 4 可知,不同方法制备的没食子酸对
2.3.3 没食子酸的还原能力
DPPH•的清除作用趋势和 V C 的相同,都在设置的质
具有抗氧化作用的物质通常有一定的还原能
量浓度范围内呈现明显的量效关系。在质量浓度为
力,因此,通过分析待测物质的还原能力可以间接
256 mg/L 时,酶法制备的没食子酸对 DPPH•的清除
地评价其抗氧化活性。不同方法制备得到的没食子
率为 78.81%,虽不及 V C 在此质量浓度下的 DPPH•
3+
酸及 V C 的 Fe 还原能力如图 6 所示。由图 6 可知,
清除率(87.37%),但明显高于传统的酸提取法制备
随着质量浓度的增大,没食子酸和 V C 的还原能力逐渐
的没食子酸的 DPPH•清除率(58.23%)。随着质量
增强。当质量浓度从 8 mg/L 增加到 256 mg/L 时,酶
浓度的继续增大,DPPH•的清除作用不再显著增
3+
法制备没食子酸对 Fe 的还原能力从 0.082 增加到
加。结果表明,以酶法制备的没食子酸对 DPPH•
3+
0.427,且强于酸提取法制备没食子酸对 Fe 的还原
有较强的清除作用,具有作为工业抗氧化剂应用的
能力。酶法制备没食子酸的抗氧化活性虽不及 V C ,
潜在价值。 但没食子酸的自然资源丰富,制备方法简单,生产
成本较低,在工业生产中是一种较理想的抗氧化添
加剂。
图 4 不同质量浓度没食子酸的 DPPH•清除率
Fig. 4 DPPH• scavenging rates of gallic acid with different
mass concentrations
3+
2.3.2 没食子酸对•OH 的清除活性 图 6 不同质量浓度没食子酸的 Fe 还原能力
3+
Fig. 6 Fe reducing power of gallic acid with different
不同质量浓度的没食子酸及 V C 对•OH 的清除
mass concentrations
率见图 5。由图 5 可知,不同方法制备的没食子酸
和 V C 对•OH 的清除作用都随着测试底物质量浓度 3 结论
的增大而增加。当质量浓度从 8 mg/L 增加到 256 mg/L
时,酶法制备的没食子酸对•OH 的清除率从 7.71% 通过单因素-响应面优化实验,建立了单宁酶法
提高到 61.99%,以酸提取法制备的没食子酸对•OH 从马桑皮中提取没食子酸的最佳提取工艺。在单宁
的清除率从 5.15%提高到 43.93%。与酸提取法相比, 酶的用量为 20 U/g、固液比 1∶40 (g∶mL),体系
酶法制备的没食子酸能更有效地清除•OH,可用于 pH 5.0、提取温度 48 ℃、提取时间 4 h 的条件下,
2.00 g 马 桑 皮 没食子 酸的 提取率 可达 10.79%±
由•OH 导致的生物体氧化损伤的修复,但其不及 V C
对•OH 的清除率。 0.65%,与建立模型的预测值相近。进一步采用