Page 66 - 《精细化工》2021年第8期
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·1560·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 38 卷

                 虾青素（AST）是一种粉红色的类酮类胡萝卜素，                       英国 Malvern 公司；UV2900 紫外-可见分光光度计，
            常见于水生动物，如龙虾、小龙虾壳、牡蛎等                      [1-3] 。  上海舜宇恒平科学仪器有限公司。
            天然虾青素是一种强抗氧化的类胡萝卜素。虾青素                             1.2   方法
            也被称为“超级维生素 E”，因为它扑灭单线态氧和捕                          1.2.1   羧甲基壳聚糖的制备
            获自由基的能力是胡萝卜素的 10 倍以上，比维生素                              制备过程参照文献[25]方法。
              [4]
            E 强 100 倍以上。虾青素具有抗氧化、抗衰老、抗                         1.2.2   微球的制备
            肿瘤、预防心脑血管疾病等作用，在食品、化妆品、                                采用乳液法制备羧甲基壳聚糖微球。取 15 mL
            保健品、制药等领域具有巨大的应用潜力                     [5-12] 。然   液体石蜡为油相，加入 0.6 mL 表面活性剂 Span 80，
            而虾青素由于其 11 个碳碳双键的不饱和结构，在                           在均质机 3000 r/min 下混合搅拌 5 min。调整转速为
            光、热、氧或酸性溶液          [13] 的作用下容易降解。此外，              4000 r/min，滴入羧甲基壳聚糖含量 1.0%（以水相
            其疏水性较强，口服生物利用度较低。这些缺点严                             即去离子水质量为基准，下同）的水溶液 15 mL（若
            重限制了虾青素的实际应用             [14-16] 。                 是制备载药微球，先称取定量的虾青素充分分散在
                 用壳聚糖    [17] 等可降解材料包覆虾青素，以防止                  少量乙醇中，再加入 15 mL 羧甲基壳聚糖含量 1.0%
            虾青素降解，提高其生物利用度，已成为虾青素微                             的溶液得到含有虾青素的羧甲基壳聚糖溶液），速度
            囊化研究的热点。与其他材料相比，壳聚糖具有更                             为 2 滴/s，滴加完成后保持转速匀浆 5 min。在乳液
            好的生物相容性、生物可降解性、成球和载药能力。                            中加入 1.125 mL 戊二醛作为交联剂，室温磁力搅拌
            此外，由于壳聚糖与细胞膜的静电相互作用                     [18] ，壳    4 h 使交联充分。然后加入上述交联后乳液 2~3 倍体
            聚糖通过可逆的方式影响上皮细胞的胞旁和胞内通                             积的无水乙醇，冰水浴中超声破乳 30 min，最后离
            路来增加细胞通透性          [19] ，从而增加对胰岛素       [20] 等多    心，抽滤，冷冻（–35  ℃）干燥，得到羧甲基壳聚
            种物质    [21-22] 的吸收。但壳聚糖需要溶解在酸性溶剂                   糖微球（NOCM）或羧甲基壳聚糖载虾青素微球
            中制成微球，此过程会造成虾青素的降解。研究发                             （ANOCM）。
            现，壳聚糖可以被改性成水溶性的壳聚糖衍生物，                             1.3   结构表征与性能测试
            如壳聚糖盐、壳聚糖两性离子和壳聚糖低聚物                      [16] 。   1.3.1   红外分析
            水溶性壳聚糖仍具有与壳聚糖相似的优越性能，并                                 使用玛瑙研钵充分研细材料，过筛，将微量材
            能溶于中性水介质中          [23] 。目前，鲜见使用羧甲基壳               料加到压片机模具中，设置压力 2 t 压成直径 7 mm
            聚糖包裹虾青素作为口服药物的报道。                                  的透光薄片。用傅里叶变换红外光谱仪对虾青素、
                 本文采用 N,O-羧甲基化         [24] 化学改性方法制备           未改性壳聚糖、羧甲基壳聚糖、羧甲基壳聚糖微球
            了水溶性羧甲基壳聚糖微球。以羧甲基壳聚糖的形                             和载虾青素的羧甲基壳聚糖微球进行表征。
                                                               1.3.2   微球形貌和粒径分析
            态、分散性和粒径为评价标准，考察了羧甲基壳聚
                                                                   通过扫描电子显微镜观察羧甲基壳聚糖微球和
            糖浓度、油水体积比对微球成球和粒径分布的影响。
                                                               载虾青素羧甲基壳聚糖微球的形貌。将 1 mg 微球样
            采用单因素分析法确定了制备羧甲基壳聚糖的最佳
                                                               品分散在 1 mL 无水乙醇中，超声 30 min，滴 1 滴
            工艺条件。以羧甲基壳聚糖为载体，将虾青素包封
                                                               置于干净的硅片上干燥。在扫描电子显微镜下观察
            在羧甲基壳聚糖中，并考察了羧甲基壳聚糖对虾青
                                                               并分析微球的形貌、粒径和表面特征。使用纳米粒
            素的包封率和体外释放行为，以探讨羧甲基壳聚糖
                                                               度电位仪测定微球的平均粒径和分散情况。
            是否适合作为虾青素的载体。
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            1   实验部分                                               将载虾青素的羧甲基壳聚糖 30 mg 加入 30 mL
                                                               无水乙醇中，在冰水浴中超声处理 30 min，7500 r/min
            1.1   试剂与仪器                                        离心至上清液为无色。收集上清液，使用紫外-可见
                 氯乙酸、壳聚糖、戊二醛，AR，上海麦克林生                         分光光度计进行紫外-可见光扫描，得到虾青素最大
            化科技有限公司；表面活性剂 Span 80、液体石蜡，                        吸收峰波长为 476 nm。分别在无水乙醇、模拟胃液、
            AR，天津市大茂化学试剂厂；虾青素，纯度≥97%                           模拟肠液环境下使用紫外分光光度计进行定量分
            （HPLC），美国 Sigma-Aldrich 公司。                        析 [26-27] ，得到虾青素在无水乙醇、模拟胃液、模拟
                 T18-digital 数显高速分散均质机，德国 IKA 公                肠液背景下的标准曲线。
            司；Nicolet iS-50 傅里叶变换红外光谱仪、Nova Nano                   载药率和包封率分别按式（1）和（2）计算。
            SEM 450 场发射扫描电子显微镜，美国 Thermo                       其中，m encap 和 m add 分别表示虾青素包封质量和添加
            Fisher Scientific 公司；Zeta sizer 纳米粒度电位仪，           质量，m 表示微球质量，三者单位均为 mg。
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