Page 118 - 《精细化工》2022年第12期

·2484· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 39 卷

板上，蚕蛹虫草多肽质量浓度在一定的范围内会抑 题组培育所得蚕蛹虫草子实体营养丰富，生物活性
制细菌的生长，形成一个无细菌生长的透明圈（抑 较高，蛋白质质量分数高达 68.44%。由此看来，蚕
菌圈），抑菌圈越大，表明抑菌效果越好；以头孢克 蛹虫草子实体可以作为优质蛋白质来源，为人体补
肟作为阳性对照药。加完样品的平板置于 37 ℃恒 充一些必要的氨基酸。
温培养箱培养 24 h，取出平板，测量抑菌圈大小， 表 2 为蚕蛹虫草子实体水解氨基酸的组成及
平行实验 3 次，取平均值。 含量。由表 2 可知，蚕蛹虫草子实体共测得 17 种水
1.2.8 蚕蛹虫草多肽对骨肉瘤 Sao-S 和膀胱癌 T24 解氨基酸（色氨酸未测），水解氨基酸总含量为
细胞增殖的影响 33.20%，其中，必需氨基酸为 11.42%，占水解氨基
采用 MTT 法进行抗癌细胞实验 [22] 。Sao-S 细胞 酸总含量的 34.40%，非必需氨基酸含量 21.78%，
3
3
分别以 5×10 个/孔（24 h）、3×10 个/孔（48 h）的 占水解氨基酸总含量的 65.60%。组成药用的氨基
接种密度接种于 96 孔板中，T24 细胞分别以 7×10 3 酸有 10 种，分别为天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、
3
个/孔（24 h）、4×10 个/孔（48 h）的接种密度接种 甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、
于 96 孔板中，每孔加入培养基 100 µL，置于 37 ℃、 赖氨酸、精氨酸，占水解氨基酸总量的 66.72%，
体积分数为 5%的 CO 2 培养箱中培养，细胞贴壁后 药用氨基酸维持着人体机能的碳平衡，某些氨基酸
弃去原培养基，实验组加入含有不同质量浓度多肽 只能通过食物的摄取才能得到补充，说明蚕蛹虫草
3
液（相对分子质量<3×10 Da）的培养基，阴性对照 具有良好的开发利用价值，其中，谷氨酸含量最高
组加入等量培养基，5-氟尿嘧啶注射液（质量浓度 （4.39%±0.001%）。
50 mg/L）作为阳性对照组，并设立无细胞的培养基
为调零组，每组设 5 个复孔。分别于加药 24、48 h 表 2 蚕蛹虫草子实体水解氨基酸的组成及含量
后，弃上清液，每孔加入 100 μL 质量浓度为 0.5 g/L Table 2 Composition and content of hydrolyzed amino acids
in Cordyceps militaris
MTT 的培养基继续培养 4 h。采用酶标仪在 490 nm
编号 名称 含量/%
波长下测定吸光度（OD 值）。按式（3）、（4）分别
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1 天冬氨酸 3.63±0.102
计算蚕蛹虫草多肽对 Sao-S、T24 细胞 24、48 h 的
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2 苏氨酸 1.84±0.113
生长抑制率及半数抑制浓度（IC 50 ）：
3 丝氨酸 1.70±0.081
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 A  A 
R 3 / %  1  5 6   100 （3） 4 谷氨酸 4.39±0.001
*
 A 0 
*
5 甘氨酸 4.31±0.001
 3 P  P n 
IC      P  m  （4） 6 丙氨酸 2.04±0.001
*
 50 4 
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7 半胱氨酸 0.007±0.001
式中：R 3 为细胞生长抑制率，%；A 5 为实验组平均
*
8 缬氨酸 1.96±0.001
OD 值；A 6 为对照组平均 OD 值；A 0 为空白对照组
*
9 甲硫氨酸 0.58±0.001
OD 值；IC 50 为半数抑制浓度，mg/L；ρ 为最大剂量，
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10 异亮氨酸 1.33±0.001
mg/L；P 为阳性反应率之和，%；P m 为最大阳性反
*
11 亮氨酸 2.02±0.021
应率，%；P n 为最小阳性反应率，%。
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12 酪氨酸 2.06±0.021
1.2.9 数据分析
*
13 苯丙氨酸 1.32±0.011
所有实验重复 3 次，以“平均值±标准偏差”表
*
14 组氨酸 1.51±0.011
示，实验数据采用 SPSS 16.0 软件进行偏相关分析，
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使用 Origin 2021 软件作图。 15 赖氨酸 2.37±0.021
*
16 精氨酸 0.14±0.021
2 结果与讨论 17 脯氨酸 1.99±0.011
*
必需氨基酸 11.42
2.1 蚕蛹虫草子实体氨基酸分析
非必需氨基酸 21.78
食用菌富含多种营养物质，其蛋白质含量高于
水解氨基酸总量 33.20
一般的蔬菜与水果，食用菌在人体食用后，蛋白质
药用氨基酸总量 22.15
会分解为氨基酸，被人体直接吸收 [23] 。人们熟知的
*
注： 与对照组比较，P<0.05。
高蛋白质含量的食用菌有羊肚菌、马鞍菌、香菇、
牛肝菌等。其中，羊肚菌粗蛋白质质量分数达到 谷氨酸是一种神经递质，对改善人体肠道功能、
20% [24] ，牛肝菌蛋白质质量分数达到 28% [25] ，本课 脑功能、神经功能和治疗精神性疾病具有重要的作