Page 120 - 《精细化工》2022年第4期
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·756· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 39 卷
2.3 发酵提取物缓解 HSF 衰老的机制
2.3.1 MTT 法检测发酵提取物对 HSF 的毒性
乳酸菌发酵提取物与 V C 对 HSF 存活率的影响
见图 5。
图 5 乳酸菌发酵提取物与 V C 对 HSF 存活率的影响
Fig. 5 Cell viability with different lactic acid fermentation
extracts and V C
由图 5 可知,当发酵提取物质量浓度为 10 g/L
时,HSF 存活率均>90%,说明该质量浓度的发酵提
取物对 HSF 无毒或低毒,因此,选择质量浓度 10 g/L
发酵提取物进行后续实验。
随着 V C 质量浓度的增加,HSF 存活率逐渐降
低,当 V C 质量浓度为 0.086 g/L 时,HSF 存活率为
a—空白组;b—模型组;c—V C;d—FE1;e—FE2;f—FE3;
80%,为避免过高质量浓度 V C 对细胞活性的影响, g—FE4;h—FE5
后续实验选择质量浓度为 0.086 g/L V C 处理 HSF。 图 7 乳酸菌发酵提取物保护作用对氧化应激损伤 HSF
2.3.2 发酵提取物对 HSF 存活率的保护作用 形态的影响
不同乳酸菌发酵提取物保护下 24 h 后 HSF 存活 Fig. 7 Protective effect of lactic acid bacteria fermentation
extracts on the morphology of HSF damaged by
率见图 6,图 7 为相应物质作用下 HSF 的形态图。
oxidative stress
由图 6 可知,双氧水处理的模型组 HSF 数量明显减
少,FE1、FE2、FE3 与 V C 处理组的细胞数量明显 2.3.3 发酵提取物对氧化损伤 HSF 细胞抗氧化活性
多于模型组,FE4、FE5 组相对于模型组其细胞数量 的影响
无明显增加。因此,FE1、FE2、FE3 与 V C 对氧化 Harman 提出自由基衰老学说指出,线粒体产生
损伤的 HSF 有显著保护作用,后续实验选择 V C 作 的 ROS 过量/ROS 的防御能力减弱之间矛盾的激化,
为阳性对照,对 FE1、FE2、FE3 样品作进一步检测。 最终导致衰老 [18] 。因此,通过检测乳酸菌发酵提取
物对 HSF 中 ROS 含量的影响来评估其抗氧化效果,
结果见图 8a。由图 8a 可知,模型组 ROS 含量显著
增加,阳性对照 V C 和 FE1、FE2、FE3 均可极显著
降低双氧水氧化应激导致的 HSF 内 ROS 含量的增
加(p<0.01),从而减缓 ROS 过多导致的氧化损伤。
“##”表示与空白相比,差异极显著(p<0.01);“**”表示与模型
组相比,差异极显著(p<0.01),下同
图 6 乳酸菌发酵提取物保护下的 HSF 存活率
Fig. 6 HSF survival rate protected by lactic acid fermentation
extracts