Page 164 - 《精细化工》2022年第7期
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·1450·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 39 卷

                 将一缩二丙二醇、甘油〔m(甘油)∶m(一缩二丙                       分数为 0.01%的尼罗红，避光搅拌 30 min 使其充分
            二醇)=6∶4〕用磁力搅拌混合均一，制得内醇相，                           染色，按照 1.2 节中的方法制备 P/O/W 多重 Pickering
            将一定量疏水 SiO 2 加入到月见草油中，使疏水 SiO 2                    乳液，整个制备过程需要避光以防止荧光染料荧光
            质量分数为 3%，在 12000 r/min 下分散 1 min，得到                猝灭。将荧光标记后的多重乳液薄薄地铺展在玻底培
            油相，再将 2 g 内醇相加入到 8 g 油相中，在                         养皿上，在白光激光照射下，使用以下两种荧光探
            12000 r/min 下分散 2 min，得到 P/O 初乳（第 1 步              测器采集图像：采用 488 nm（激发 FITC）和 552 nm
            乳化）；将一定量亲水 SiO 2 加入去离子水中，使亲                        （激发尼罗红）的激发波长扫描样品，单通道采集
            水 SiO 2 质量分数为 2%，在 12000 r/min 下分散 1               图像，然后重叠通道获得叠加图。
            min，得到水相，再将 5 g 水相加入到 5 g P/O 初乳                   1.5.4  SiO 2 三相接触角测定
            中，在 9000 r/min 下分散 2 min，得到 P/O/W 多重                   使用座滴法测定两种 SiO 2 三相接触角             [18] 。取适
            Pickering 乳液（第 2 步乳化）。                             量 SiO 2 ，用压片机制得厚度为 1~2 mm 的小圆片。
            1.3  P/O/W 多重 Pickering 乳液影响因素考察                   将圆片置于盛有月见草油的透明玻璃皿中，将装有
                 以乳液微观结构和粒径为主要评价指标，分别                          多元醇〔m(甘油)∶m(一缩二丙二醇)=6∶4〕或去离
            研究内醇相质量分数、疏水乳化剂质量分数、水乳                             子水的注射器针头插入到液面下，控制注射器注射
            比、亲水乳化剂质量分数对 P/O/W 多重 Pickering                    4 μL 液滴于 SiO 2 圆片表面，使用摄像机拍摄液滴图
            乳液制备效果的影响。                                         像后用椭圆拟合模型自动计算获得多元醇-月见草
            1.4    包载槲皮素 P/O/W 多重 Pickering 乳液的制备              油-SiO 2 三相接触角（θ OP ）或去离子水-月见草油-
                 采用上述两步法制备包载槲皮素的 P/O/W 多重                      SiO 2 三相接触角（θ OW ）。
            Pickering 乳液。多元醇〔m(甘油)∶m(一缩二丙二                     1.5.5  XRD 分析
            醇)=6∶4〕中加入一定量的槲皮素，使槲皮素质量                               分别取槲皮素、空白多重乳液、包载槲皮素多
            分数为 6%，搅拌混合至澄清透明，制得内醇相，月                           重乳液适量进行 XRD 分析。分析条件：铜靶 K α 射
            见草油中加入一定量疏水 SiO 2 ，使疏水 SiO 2 质量分                   线源，电流为 40 mA，电压强度为 40 kV，扫描角
            数为 3%，在 12000 r/min 下分散 1 min 得到油相，                度（2θ）为 5°~50°，扫描速率为 5(°)/min         [19] 。
            再将 2 g 内醇相加入到 8 g 油相中，在 12000 r/min                1.5.6   包载槲皮素的多重 Pickering 乳液载药量测定
                                                                             [9]
                                                                   采用离心法 测定该多重乳液的载药量。具体
            下分散 2 min 得到 P/O 初乳；将一定量的亲水 SiO 2
            加入到去离子水中，使亲水 SiO 2 质量分数为 2%，                       如下：准确吸取 1 mL 负载槲皮素的多重乳液于离心
            在 12000 r/min 下分散 1 min 得到水相，再将 5 g 水              管中，测定负载槲皮素多重乳液的总质量，记为 W 1
            相加入到 5 g  P/O 初乳中，在 9000 r/min 下分散                 （g）。乳液中游离的槲皮素通过离心（10000 r/min
            2 min，得到包载槲皮素的 P/O/W 多重乳液。                         离心 15 min）从多重乳液中分离出来，将沉积在底
            1.5    测试与表征                                       部的槲皮素使用高效液相色谱（HPLC）进样分析，
            1.5.1   微观结构与粒径测定                                  得到多重乳液中游离槲皮素的质量，质量记为 W 2
                 用移液枪取 20  μL 乳液于载玻片上，沿边缘缓                     （g）。另准确吸取 1 mL 负载槲皮素的多重乳液于容
            慢放上盖玻片，用超景深三维显微镜对其微观结构                             量瓶中，加入等量的二甲基亚砜作为破乳剂，混合
            进行观察、拍摄。然后，用 Nano Measurer 1.2 软件                  超声 10 min 直至乳液完全破乳，将破乳后的乳液稀
            对照片中的乳液液滴直径进行测量统计，体积平均                             释一定倍数后使用 HPLC 分析，得到多重乳液中槲
            粒径（D 43 ）的计算公式为：                                   皮素的总质量，记为 W 3 （g）。根据式（2、3）计算
                                          3
                            D 43     d i   4  d    （1）      载药量和包封率：
                                          i
            式中：d i 为乳液液滴的直径，μm            [15] 。                         载药量/% = (W 3 –W 2 )/W 1 ×100   （2）
            1.5.2   乳液黏度测定                                               包封率/% = (W 3 –W 2 )/W 3 ×100   （3）
                 用旋转流变仪对乳液的流变性能进行表征。使                          1.5.7   包载槲皮素的多重 Pickering 乳液体外透皮
            用顶角角度 2°（直径 40 mm）不锈钢锥板在剪切速率                             实验
                       –1
            为 0.01~10 s 下进行稳态剪切测试来获得乳液黏度。                          选取厚度相当、无损伤的猪皮进行透皮实验                   [20] 。
            1.5.3  CLSM 观察乳液结构                                 首先，用手术刀将猪皮的皮下油脂去除至毛孔清晰，
                 用 CLSM 进一步观察多重乳液的各相分布               [16-17] ，  用镊子将猪皮表面残留的毛拔除干净，然后将猪皮
            P/O/W 多重乳液的水相和油相分别用水溶性荧光染                          剪成约 2.5 cm×2.5 cm 的大小后固定于 Franz 扩散池
            料 FITC 和油溶性荧光染料尼罗红标记。分别在水                          的接收池与供给池之间，真皮层朝向接收池放置；
            相和油相中添加质量分数为 0.01%的 FITC 和质量                       接收池中加满 pH 7.4 的磷酸盐缓冲液（PBS）；在供
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