Page 165 - 《精细化工》2022年第7期

第 7 期 杨佳慧，等: 包载槲皮素 P/O/W 多重 Pickering 乳液的制备及表征 ·1451·

给池中分别加入 2 mL 包载槲皮素的多重乳液以及 径。从图 2 可以看出，内醇相质量分数为 50%的 P/O
槲皮素水分散液（槲皮素质量分数为 0.60%）；将组 初乳粒径较大且粒径分布广，乳液液滴易破裂，这
装好的 Franz 扩散池放入透皮扩散仪中，实验条件 是由于内醇相过多油相无法将内醇相均匀分散。内
设置为：温度 37 ℃；搅拌速度 400 r/min；透皮时 醇相质量分数为 40%~10%的 P/O 初乳粒径较均一。
间 12 h。12 h 后，从扩散池中取出猪皮，用脱脂棉 随着内醇相比例减小，初乳粒径减小。出现这种趋
擦去猪皮表面残留的样品，使用 Tape stripping 法 [21] 势的原因是，随着内醇相质量分数减小，外油相增
测猪皮角质层中槲皮素的含量：用 3M 胶带粘下猪 加，吸附在两相界面上的胶体颗粒数量增加，促使
皮表面 21 层皮肤，舍弃第一层，将剩余 20 层置于 形成更细小的液滴 [23] 。当内醇相质量分数减小至
15 mL 离心管中，加入 2 mL 甲醇，超声 30 min，于 20%时，粒径减小趋势变缓，而内醇相太少不利于
5000 r/min 离心 30 min，取上清液用 0.22 μm 有机滤 活性物的包载。因此，选择质量分数为 20%的内醇
膜过滤后，采用 HPLC 测槲皮素的含量，即为角质 相进行后续实验。
层中槲皮素的含量。
剩余皮肤剪碎后置于 15 mL 离心管中，加入
2 mL 甲醇，超声 30 min，然后于 5000 r/min 下离心
30 min，取上清液用 0.22 μm 有机滤膜过滤后采用高
效液相色谱法测定槲皮素的含量，即为活力表皮和
真皮层中槲皮素的含量。
1.5.8 HPLC 法测定槲皮素含量
进样条件为：C18 柱，150 mm×4.6 mm×3.5 μm；
流动相 V(甲醇)∶V(磷酸水溶液，磷酸质量分数为
0.05%)=1∶1，流速 1.0 mL/min，检测波长为 373 nm，
进样量为 8 μL，柱温为 25 ℃。测得的标准曲线回
2
归方程为 y= 0.7542x+0.4713，R =0.9991，其中 x 为
槲皮素浓度，y 为不同浓度槲皮素对应的峰面积。
1.5.9 CLSM 观察猪皮截面
槲皮素在一定激发波长下能够激发出绿色荧
光，因此，使用 CLSM 进一步观察槲皮素在猪皮中
的透皮情况。如 1.5.7 节所述透皮结束后，剪下适宜
宽度的猪皮，用冰冻切片包埋剂将其包裹，冷冻后
用冷冻切片机将其切成 20 μm 的薄片，采用 488 nm
的激发波长观察其截面。
1.6 数据处理
采用 Origin 和 SPSS 等软件进行数据分析，所
有数值用均数±标准差（Mean±SD）表示，除已说明
外，其他所有实验均平行操作 3 次。

2 结果与讨论

a—50%；b—40%；c—30%；d—20%；e—10%
2.1 内醇相质量分数对 P/O 初乳微观结构与粒径
图 2 不同内醇相质量分数 P/O 初乳的显微镜图及粒径
的影响 Fig. 2 Microscopic images and particle size of P/O primary
稳定的初乳是制备出稳定多重乳液的前提。初 emulsions with different mass fractions of internal
乳粒径越小，在制备过程中越不易被破坏，最终制 polyol phase

备的多重乳液包封率越高 [22] ，因此先考察了各因素 2.2 疏水 SiO 2 质量分数对 P/O 初乳微观结构与粒
对初乳的影响，其他反应条件同 1.2 节。 径的影响
首先考察了内醇相〔m(甘油)∶m(一缩二丙二 保持内醇相〔m(甘油)∶m(一缩二丙二醇)=6∶
醇)=6∶4〕质量分数对 P/O 初乳的影响。图 2 展示 4〕质量分数为 20%，考察了不同疏水 SiO 2 质量分
了不同内醇相质量分数 P/O 初乳的显微镜图及粒 数对 P/O 初乳的影响，其他反应条件同 1.2 节。图 3