Page 110 - 《精细化工》2023年第11期
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·2422·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 40 卷

            有重要意义。                                             层色谱法（TLC）〔展开剂 V(石油醚)∶V(乙酸乙
                 双光子共聚焦成像技术作为现阶段最受欢迎的                          酯)=3∶1 混合溶剂〕实时监测至反应完全。将反应
            成像模式之一，不仅成像深度大，还具有背景荧光                             液冷却至室温，二氯甲烷萃取，合并有机相并干燥
            低、高时空分辨率以及光损伤小的特点                  [6-10] 。近年来，    12 h，减压浓缩，采用 V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=8∶
            研究发现，比率型荧光探针具有自校准能力，能够克                            1 混合溶剂为洗脱剂，柱层析分离得到白色固体 200
                                                                                            1
            服由激发光波动、探针浓度变化、不均匀分布和区室                            mg，产率 29%。熔点：101  ℃。 HNMR (400 MHz,
            定位产生的基于强度的荧光探针的系统误差                   [11-12] 。    DMSO-d 6 ), δ: 8.19 (dd, J = 8.0、2.2 Hz, 1H), 8.08 (t,
                 为此，本文拟利用分子内电荷转移（ICT）机理                        J = 2.2 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.94 (d, J =
            设计一例用于检测 H 2 O 2 的比率型双光子荧光探针                       8.2 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 8.3、1.9 Hz, 1H), 7.68 (d,
            {6-甲氧基-2-[6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊              J = 7.9 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.96 (dd, J =
                                                                                           13
                                                               7.8、1.9 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H)。 CNMR (100 MHz,
            烷 -2- 基 ) 喹啉 -2- 基 ]苯并 [d]噻唑 } （ MQH 2 O 2 ），
                                                               DMSO-d 6 ), δ: 166.06, 156.73, 148.39, 148.02, 146.88,
            MQH 2 O 2 以 6-甲氧基苯并噻唑-2-羟基喹啉为双光子                   135.83, 134.98, 132.48,  129.96, 129.83, 129.80,
            荧光团，硼酸酯为 H 2 O 2 识别基团，用于细胞和小鼠                      122.87, 120.19, 116.13, 114.20, 107.34, 54.73。HRMS
            大脑组织水平的成像，以期实现脑卒中诱导细胞氧                             (ESI), C 17 H 12 BrN 2 OS ,m/Z: [M+H] 计算值 370.9854；
                                                                                 +
                                                                                            +
            化应激的精准原位成像。                                        测试值 370.9813。
                                                               1.2.3   化合物 MQH 2 O 2 的制备
            1    实验部分
                                                                   将 200 mg（0.54 mmol）Ⅳ、280 mg（1.1 mmol）
            1.1   试剂与仪器                                        混合双(频哪醇合)二硼、100 mg（1.82 mmol）乙酸
                 H 2 O 2 （质量分数 30%）、双(频哪醇合)二硼、乙                钾、39.51 mg（0.054 mmol）Pd(dppf)Cl 2 和 20 mL
            酸钾（KOAc）、1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯                         无水 1,4-二氧六环置于 50 mL 单口反应瓶中，升高
            〔Pd(dppf)Cl 2 〕、三溴化硼（BBr 3 ）、罗丹明 6G、罗              温度至 80 ℃，反应 24 h，TLC〔展开剂 V(石油醚)∶
            丹明 B、噻唑蓝（MTT）、佛波酯（PMA）、N-乙酰-                       V(乙酸乙酯)=2∶1 混合溶剂〕实时监测，待原料点
            L-半胱氨酸（NAC）、Apocynin（APO），分析纯，                     消失，停止反应，将反应液冷却至室温，减压浓缩，
            上海阿拉丁生化科技股份有限公司；DMEM 细胞培                           采用 V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=8∶1 混合溶剂为洗脱
            养基，Gibco 公司；PC12 细胞（肾上腺嗜铬细胞瘤                       剂，柱层析分离得白色固体 119 mg，产率 60%。熔
                                                                               1
            细胞），厦门逸漠生物技术有限公司；C57BL/6 雄性                        点：133~134  ℃。 HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ), δ:
            小鼠，湖南斯莱克京达实验动物有限公司；柱层析                             8.69 (d,  J  = 8.1 Hz, 1H), 8.50~8.35 (m, 2H),
                                                               8.19~7.99 (m, 3H), 7.78 (s, 1H), 7.20 (d, J = 7.9 Hz,
            硅胶（200~300 目），上海皓鸿生物医药科技有限公                        1H), 3.88 (s, 3H), 1.32 (s, 12H)。 CNMR (100 MHz,
                                                                                            13
            司；所有溶剂均为分析纯，国药集团化学试剂有限
                                                               DMSO-d 6 ), δ: 198.00, 155.75, 154.99, 153.95, 143.24,
            公司。所有试剂使用前未经进一步纯化，实验所需                             136.15, 128.45, 127.88,  123.76, 122.44, 121.41,
            溶液均使用超纯水配制。                                        119.89,  66.00, 47.19, 29.73, 26.96,  26.87。HRMS
                                                                                  +
                 UV-2550 型紫外-可见分光光度计、RF-6000 型                 (ESI), C 23 H 24 BN 2 O 3 S , m/Z: [M+H] +  计算 值
                                                                                                        –1
            荧光分光光度计，日本 Shimadzu 公司；LSM780 NLO                  419.1601 ； 测试值 419.1643 。 FTIR (v/cm ) ：
            型双光子激光共聚焦显微镜，德国 Carl Zeiss 公司；                     1250~1750（喹啉和苯并噻唑中 C—N 键的伸缩振
            6230 TOF 型电喷雾-高分辨时间质谱仪（ESI-TOF），                   动）；1350~1310（硼酸酯中 B—O 键的伸缩振动）；
            美国 Agilent 公司；Ascend 400 MHz 型核磁共振波                1225~1060（甲氧基中 C—O—C 键的伸缩振动）。
            谱仪，德国 Bruker 公司；Vector 22 型傅里叶变换红                  1.2.4 2-[6-(苄氧基)喹啉-2-基]-6-甲氧基苯并[d]噻唑
            外光谱仪、Multiskan FC 型酶标仪，美国 Thermo                       （Ⅷ）的制备
            Fisher Scientific 公司。                                  化合物Ⅴ~Ⅶ制备过程参照文献[14]方法。
            1.2   制备方法                                             向 25 mL 单口 圆底 烧瓶 中加 入 530 mg
            1.2.1  2-氨基-5-甲氧基苯硫醇（Ⅰ）、6-溴-2-甲基喹                  （2.0 mmol）Ⅰ、370 mg（2.4 mmol）Ⅶ和 5.0 mL
                   啉（Ⅱ）和 6-溴-2-甲醛基喹啉（Ⅲ）的制备                     DMSO，升温至 130  ℃反应 2 h，TLC〔展开剂 V(石
                 化合物Ⅰ~Ⅲ制备过程参照文献[13]方法。                         油醚)∶V(乙酸乙酯) = 2∶1 混合溶剂〕实时监测至
            1.2.2  2-(6-溴喹啉-2-基)-6-甲氧基苯并[d]噻唑（Ⅳ）               反应完全。将反应液冷却至室温，二氯甲烷萃取，
                   的制备                                         合并有机相并干燥 12 h，减压浓缩，采用 V(石油
                 向 25 mL 单口 圆底 烧瓶 中加 入 468 mg                  醚)∶V(乙酸乙酯) = 8∶1 混合溶剂为洗脱剂，用柱
            （2.0 mmol）Ⅲ、236  μL（2.2 mmol）Ⅰ、5.0 mL              层析分离得淡黄色固体 495 mg，产率 63%。熔点：
                                                                      1
            二甲基亚砜（DMSO），升温至 130  ℃反应 2 h，薄                     117 ℃。 HNMR (400 MHz, DMSO-d 6 ), δ: 8.10 (dd,
   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115