Page 113 - 《精细化工》2023年第11期
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第 11 期                    胡   伟,等:  比率型过氧化氢荧光探针的合成及成像应用                                 ·2425·


                                                               2.2.3  MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 响应时间检测
                                                                   MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 响应时间的测定结果如图 4 所示。













            图 2  MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 反应前后的双光子荧光活性截面
            Fig.  2    Two-photon fluorescence active cross section of

                   MQH 2 O 2  before and after reaction with H 2 O 2
                                                               图 4   不同时间 MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 反应前后 I 535 /I 465 的变化

                                                               Fig. 4    Change of  I 535 /I 465  before and after reaction of
                 由图 2 可知,在 710~800 nm 范围内,MQH 2 O 2
                                                                      MQH 2 O 2  and H 2 O 2  at different times
            与 H 2 O 2 反应前双光子荧光活性截面较小,在 740 nm
                                                                   由图 4 可见,MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 在 30 min 内反
            处仅有 76 GM,而与 H 2 O 2 反应后在 740 nm 处出现
                                                               应完全,表明探针具有较快的响应能力,适用于
            最大的双光子荧光活性截面,可达 150 GM,增加了
                                                               H 2 O 2 的原位成像分析。
            74 GM,表明该荧光染料双光子荧光活性截面较大,
                                                               2.2.4  MQH 2 O 2 对 H 2 O 2 的选择性和 pH 稳定性
            具有较好的双光子性能,可将其应用于双光子共聚
                                                                   探讨了 10 µmol/L MQH 2 O 2 对 14 种不同干扰物
            焦成像中。
                                                                                               2+
                                                                                                     2+
                                                                                                          2+
                                                                                         2+
                                                               (浓度均为 100 µmol/L 的 Fe 、Mg 、Ca 、Zn 、
            2.2.2  MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 荧光响应检测
                                                                                                        −
                                                                 2+
                                                               Cu ;浓度均为 300 µmol/L 的 HClO、ONOO 、单
                 MQH 2 O 2 与不同浓度 H 2 O 2 响应后的荧光发射谱
                                                                               −
                                                                                                           −
                                                                       1
                                                               线态氧( O 2 )、•O 2 ;浓度均为 500 µmol/L 的 NO 2 、
            图见图 3。
                                                               NO;浓度均为 1.0 mmol/L 的半胱氨酸(Cys)、谷
                                                               胱甘肽(GSH)、高半胱氨酸(Hcy);300 µmol/L
                                                               H 2 O 2 )的响应,结果如图 5a 所示。




             图 3  MQH 2 O 2 与不同浓度 H 2 O 2 反应后的荧光发射光谱
            Fig. 3    Fluorescence emission spectra after reaction of
                    MQH 2 O 2  with H 2 O 2  with different concentrations

                 由图 3 可知,随着 H 2 O 2 浓度的不断增加,反应
            体系在 535 nm处的荧光强度(I 535 )不断增强,465 nm
            处的荧光强度(I 465 )不断降低,形成比率型响应,
            加入 H 2 O 2 (300 µmol/L)比未加 H 2 O 2 的检测液的荧
            光强度比值(I 535 /I 465 )在 30 min 内增加了 25.4 倍。
            H 2 O 2 浓度(y,0~300 µmol/L)与 I 535 /I 465 (x)的关
                                                     2
            系曲线为 y=0.02534x+0.01356,相关系数(R )为
            0.998 。由 3σ/k 计算 得出检出限( LOD )为

            38.6 nmol/L,其中:σ 为 11 组 MQH 2 O 2 溶液在 I 535 /I 465
                                                               图 5  MQH 2 O 2 对 H 2 O 2 的选择性(a);MQH 2 O 2 与 H 2 O 2
            的标准偏差;k 为 MQH 2 O 2 滴定光谱曲线在线性范                          在不同 pH 下反应前后 I 535 /I 465 的变化(b)
            围内的斜率。结果表明,探针 MQH 2 O 2 具有较高的                      Fig. 5    Selectivity of MQH 2 O 2  to H 2 O 2  (a); Change of
                                                                      I 535 /I 465  before and after reaction  MQH 2 O 2  with
            灵敏度和准确性。                                                  H 2 O 2  at different pH (b)
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