Page 113 - 《精细化工》2023年第11期
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第 11 期 胡 伟,等: 比率型过氧化氢荧光探针的合成及成像应用 ·2425·
2.2.3 MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 响应时间检测
MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 响应时间的测定结果如图 4 所示。
图 2 MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 反应前后的双光子荧光活性截面
Fig. 2 Two-photon fluorescence active cross section of
MQH 2 O 2 before and after reaction with H 2 O 2
图 4 不同时间 MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 反应前后 I 535 /I 465 的变化
Fig. 4 Change of I 535 /I 465 before and after reaction of
由图 2 可知,在 710~800 nm 范围内,MQH 2 O 2
MQH 2 O 2 and H 2 O 2 at different times
与 H 2 O 2 反应前双光子荧光活性截面较小,在 740 nm
由图 4 可见,MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 在 30 min 内反
处仅有 76 GM,而与 H 2 O 2 反应后在 740 nm 处出现
应完全,表明探针具有较快的响应能力,适用于
最大的双光子荧光活性截面,可达 150 GM,增加了
H 2 O 2 的原位成像分析。
74 GM,表明该荧光染料双光子荧光活性截面较大,
2.2.4 MQH 2 O 2 对 H 2 O 2 的选择性和 pH 稳定性
具有较好的双光子性能,可将其应用于双光子共聚
探讨了 10 µmol/L MQH 2 O 2 对 14 种不同干扰物
焦成像中。
2+
2+
2+
2+
(浓度均为 100 µmol/L 的 Fe 、Mg 、Ca 、Zn 、
2.2.2 MQH 2 O 2 与 H 2 O 2 荧光响应检测
−
2+
Cu ;浓度均为 300 µmol/L 的 HClO、ONOO 、单
MQH 2 O 2 与不同浓度 H 2 O 2 响应后的荧光发射谱
−
−
1
线态氧( O 2 )、•O 2 ;浓度均为 500 µmol/L 的 NO 2 、
图见图 3。
NO;浓度均为 1.0 mmol/L 的半胱氨酸(Cys)、谷
胱甘肽(GSH)、高半胱氨酸(Hcy);300 µmol/L
H 2 O 2 )的响应,结果如图 5a 所示。
图 3 MQH 2 O 2 与不同浓度 H 2 O 2 反应后的荧光发射光谱
Fig. 3 Fluorescence emission spectra after reaction of
MQH 2 O 2 with H 2 O 2 with different concentrations
由图 3 可知,随着 H 2 O 2 浓度的不断增加,反应
体系在 535 nm处的荧光强度(I 535 )不断增强,465 nm
处的荧光强度(I 465 )不断降低,形成比率型响应,
加入 H 2 O 2 (300 µmol/L)比未加 H 2 O 2 的检测液的荧
光强度比值(I 535 /I 465 )在 30 min 内增加了 25.4 倍。
H 2 O 2 浓度(y,0~300 µmol/L)与 I 535 /I 465 (x)的关
2
系曲线为 y=0.02534x+0.01356,相关系数(R )为
0.998 。由 3σ/k 计算 得出检出限( LOD )为
38.6 nmol/L,其中:σ 为 11 组 MQH 2 O 2 溶液在 I 535 /I 465
图 5 MQH 2 O 2 对 H 2 O 2 的选择性(a);MQH 2 O 2 与 H 2 O 2
的标准偏差;k 为 MQH 2 O 2 滴定光谱曲线在线性范 在不同 pH 下反应前后 I 535 /I 465 的变化(b)
围内的斜率。结果表明,探针 MQH 2 O 2 具有较高的 Fig. 5 Selectivity of MQH 2 O 2 to H 2 O 2 (a); Change of
I 535 /I 465 before and after reaction MQH 2 O 2 with
灵敏度和准确性。 H 2 O 2 at different pH (b)