Page 116 - 《精细化工》2023年第11期

·2428· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

由图 11 可知，随着卒中时间的推移，对照组蓝
光通道荧光逐渐减弱，而绿色通道荧光逐渐增强，
比率（I 535 /I 465 ）响应信号也随之增加，而注射 APO
后，绿色通道荧光明显减弱，而比率响应信号变化
较小。该实验结果与细胞实验相一致，均是由于
H 2 O 2 浓度的降低而引起的变化，表明探针 MQH 2 O 2
可实现小鼠脑卒中过程中的原位成像分析。
2.7 探针性能比较
从是否为比率型荧光探针、比率型荧光探针双

发射峰对应的最大发射波长 λ em1 /λ em2 、线性范围、
图 11 探针 MQH 2 O 2 在脑卒中过程中的双光子组织成像 相关系数和检出限 5 方面将探针 MQH 2 O 2 与近年来
（a）；图 11a 各组细胞中绿色通道与蓝色通道的 合成的一些较经典 H 2 O 2 荧光探针进行对比，对比结
I 535 /I 465 （b） 果和探针结构如表 1 和图 12 所示。由表 1 可见，本
Fig. 11 Two-photon tissue imaging of probe MQH 2 O 2 during 研究探针线性范围最大，相关系数最高，且检出限
stroke (a); I 535 /I 465 of green channel and blue
channel in each group of cells in Fig. 11a (b) 足够低，因此检测的准确度更高。

表 1 H 2 O 2 探针的对比结果
Table 1 Comparison results of probes for H 2 O 2
探针 是否比率 λ em1/λ em2/nm 线性范围/(µmol/L) 相关系数 LOD/(nmol/L) 参考文献
1 否 667 0~50 0.995 370 [16]
2 否 625 0~40 — 21 [17]
3 否 550 1~40 — 15000 [18]
4 是 520/610 0~50 0.997 7000 [19]
5 否 470 0.4~10 — 68 [20]
6 否 699 0~25 0.996 72.48 [21]
7 是 484/562 0~200 — 570 [22]
8 是 593/642 0~100 — 32 [23]
9 否 665 0~30 — 1670 [24]
MQH 2O 2 是 465/535 0.04~300 0.998 38.6 本文
注：“—”代表未给出。

3 结论

以 6-甲氧基苯并噻唑-2-羟基喹啉作为双光子
荧光团、硼酸酯作为过氧化氢的识别基团，成功构
建了比率型双光子 H 2 O 2 荧光探针 MQH 2 O 2 。结果表
明，MQH 2 O 2 不仅具有 30 min 内响应倍数为 25.4 倍，
检出限低至 38.6 nmol/L，且具有高的选择性、生物
相容性以及稳定性。更为重要的是，由于比率型荧
光 探针能 够对 环境影 响进 行内置 校正 ，因 此
MQH 2 O 2 在响应 H 2 O 2 过程中具有优异的线性范围
2
（ 38.6 nmol/L~300 µmol/L ）和相关 系数（ R =
0.998），保证了探针能够实现更准确的荧光分析。
该探针成功完成了脑卒中诱导细胞氧化应激过程的
精准原位成像分析，通过使用 OGD/R 和 MCAO 分
别处理细胞和小鼠用来模拟脑卒中过程，利用 APO

药物抑制和 NOX-2 基因沉默方式抑制氧化应激，证
图 12 探针 1~9 的化学结构式
Fig. 12 Chemical structural formulas of probes 1~9 明脑卒中可以诱导细胞氧化应激过程。为此，通过