Page 156 - 《精细化工》2023年第11期
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·2468· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷
图 5 游离酶和 MCLEA 的最适温度(A);游离酶的热稳定性
(B);MCLEA 的热稳定性(C)
Fig. 5 Optimum temperature for free scPLD and MCLEA
图 4 MCLEA 和 Fe 3 O 4 的表征:FTIR 谱图(A);Fe 3 O 4 (A); Thermal stability of free scPLD (B); Thermal
的 SEM 图(B);MCLEA 的 SEM 图(C);MCLEA stability of MCLEA (C)
的磁场分离照片(D)
Fig. 4 Characteristics of MCLEA and Fe 3 O 4 : FTIR spectra 游离酶和 MCLEA 的热稳定性如图 5B、C 所示。
(A); SEM image of Fe 3 O 4 (B); SEM image of 与游离酶相比,固定化后的 scPLD 在 25~65 ℃的温
MCLEA (C); Magnetic field separation photo of
MCLEA (D) 度范围内的稳定性得到不同程度的提高。尤其是在
高温环境下,游离酶在 65 ℃下孵育 6 h 后几乎测
2.2.2 最适温度和热稳定性
不到酶活,而 MCLEA 的残余酶活还可以达到 15%
在低温条件(25~50 ℃)下酶活随着温度升高
以上。推测是由于磁性 Fe 3 O 4 颗粒作为载体吸附固
而增加,但随着温度越来越高会使酶变性,从而使 定化以及使用戊二醛交联过程中增加了 scPLD 酶
酶活下降 [16] 。不同温度对游离酶和 MCLEA 活力的
分子的刚性。此外,共价键的形成降低了固定化酶
影响见图 5A。如图 5A 所示,游离酶的最适温度是
结构的灵活性,从而使 MCLEA 表现出更高的热稳
57 ℃,MCLEA 的最适温度为 62 ℃,略高于游离
定性 [17] 。
酶。这可能是 Fe 3 O 4 的投入和交联,改变了 scPLD 2.2.3 最适 pH 和 pH 稳定性
的空间结构,增加了分子刚性,使得固定化后的 在 37 ℃下,测定游离酶和 MCLEA 在 7.0~9.5
scPLD 的最适温度增加。 的 pH 范围内的最适 pH,结果见图 6A。