Page 161 - 《精细化工》2023年第11期

第 11 期 宋添力，等: 竹节参多糖通过 PI3K/AKT/NF-κB 信号通路对急性肝损伤大鼠的影响 ·2473·

significantly increased (P<0.05). In drug treated group, the expression of P-PI3K protein was significantly
increased (P<0.05), and the expression of p-AKT and IL-1β protein was significantly decreased (P<0.01,
P<0.05). Therefore, PSPJ alleviated CCl 4-induced ALI symptoms in rats through the expression of related
key proteins in the PI3K/AKT/NF-κB signaling pathway.
Key words: Panax japonicus polysaccharide; PI3K/AKT/NF-κB; acute liver injury; oxidation resistance;
anti-inflammatory; modernization technology of traditional Chinese medicines

肝脏作为人体最大的实体器官，在物质代谢、 应是肝损伤的主要致病因素，竹节参多糖（PSPJ）
血容量调节、内分泌控制、脂质维持和胆固醇稳态 可以通过激活 Nrf2-ARE 信号通路增强抗氧化酶的
以及免疫系统支持中起着重要的作用 [1-2] 。然而，病 活力而发挥抗氧化作用，进而改善肝损伤症状。
毒、药物、酒精、免疫损伤等多种肝毒性因素可引 PI3K/AKT/NF-κB 信号传导与氧化应激和炎症反应
发肝细胞损伤和死亡 [3-4] 。急性肝损伤（ALI）是指 密切相关 [17] 。然而，PSPJ 是否对肝损伤治疗中的
短时间内引发肝细胞受损的一种疾病，包括药物性 PI3K/AKT/NF-κB 信号传导发挥抗炎和抗氧化作用
肝损伤、急性病毒性肝炎、急性酒精性肝损伤、急 仍然未知。因此，本研究旨在探讨 PSPJ 对 CCl 4 诱
性创伤等，严重情况下可迅速发展成为急性肝衰竭 导的 ALI 的改善作用，并从 PI3K/AKT/NF-κB 角度
[5]
（ALF），严重威胁着人体健康 。研究表明，大多 探讨其作用机制，为临床上开发天然药物治疗 ALI
数的 ALF 是由于药物及细菌耐药性引起的肝损伤进 提供深入的理论依据和可靠的实验数据。
一步发展而成，其发病率和死亡率都很高，临床上
肝移植才能有效治疗和缓解 ALF 中末期 [6-8] 。目前， 1 实验部分
ALF 尚缺乏特效的治疗药物，一般是病因治疗、抗
1.1 试剂与仪器
炎、抗病毒、降酶、退黄以及免疫调节治疗，严重
[9]
者则需要进行肝移植、人工肝等 。迄今为止，肝 竹节参，湖北省宣恩县椿木营竹节参培育种植
移植是治疗 ALF 最有效的方法 [10-11] 。然而，由于肝 基地，经湖北民族大学文德鉴副教授鉴定为五加科
植物竹节参的干燥根茎；CCl 4 ，化学纯，上海麦克
源稀缺和肝移植技术的局限性，肝移植手术的成功
林生化科技股份有限公司；多聚甲醛，分析纯，北
率较低，对症治疗只能暂时缓解症状，仍影响患者
京兰杰柯科技有限公司；HRP 标记的山羊抗小鼠
的生活质量；手术疗法则费用较高、适配性较小，
预后极差。因此，ALI 已成为世界范围内的公共卫 IgG 抗体、H&E 染色试剂盒、牛血清白蛋白（BSA）、
生问题 [12] ，研究开发预防或治疗 ALI 的有效药物对 枸橼酸盐、BCA 蛋白质试剂盒、一抗稀释液、二抗
于缓解肝病及重症具有重要意义。 稀释液，上海碧云天生物技术有限公司；IHC 试剂
竹节参，又称为“竹节人参”、“白三七”或“七 盒、SABC-POD 试剂盒（1/2KIT）、DAB 显色试剂
叶子”，五加科人参属植物竹节参（Panax japonicus 盒、磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.2），武汉博士德生
C. A. Mey）的干燥根茎，始载于赵学楷所撰的《百 物工程有限公司；联苯双酯滴丸，北京协和药厂；
草镜》，其性温，味甘、微苦，归肝、脾、肺经，具 双蒸水，恩施州华圩科技有限公司；二甲苯，分析
有散瘀止血，消肿止痛、滋补强壮、祛风除湿的功 纯，南京化学试剂股份有限公司；无水乙醇（分析
效，主要分布在湖北、贵州及四川等地，其中，湖 纯）、乌拉坦（分析纯）、TBST 缓冲液，默克生命
北恩施最为丰富，是恩施道地药材，土家珍稀名贵 科学有限公司；PI3K 抗体、GAPDH 抗体，美国界
的“七”类药材之一 [13] 。周静等 [14] 研究表明，竹节参 面蛋白质技术公司；磷酸化 PI3K（p-PI3K）抗体，
的主要活性成分为糖类、皂苷类、核苷类、氨基酸 美国 CST 公司；AKT 抗体，美国 SAB 公司；磷酸
类、挥发油类及无机盐类等，具有保肝、促进消化、 化 AKT 抗体、NF-κB 抗体、磷酸化 NF-κB 抗体、IL-1β
镇静、抗疲劳、降血脂、改善睡眠、保护心脑血管、 抗体，沈阳万类生物科技有限公司；HRP 标记的山
调节免疫、抗炎镇痛、抗肿瘤等作用。本课题组前 羊抗兔 IgG 抗体、ELC 发光液，武汉科瑞科技有限
期研究发现 [15] ，以竹节参为主药的道地中成药复方 公司。
竹节参片对于肝损伤具有潜在的治疗靶点，并预测 1510-01611C 型全波长酶标仪、A44116 型凝胶
了其潜在活性成分对于 PI3K/AKT 通路和 NF-κB 信 成像系统、Fluor Chem E 凝胶成像系统，美国 Thermo
号通路上的关键蛋白尤为敏感，为复方竹节参片治 Fisher Scientific 公司；VT1200S 型石蜡切片机，德
疗肝损伤提供了一定的理论参考。 国 LeicaBiosystems 公司；E100 型正置光学显微镜，
本课题组前期研究表明 [16] ，氧化应激和炎症反 日本 Nikon 公司；B212AT04E 型电泳及转膜系统，