Page 106 - 《精细化工》2023年第12期

·2648· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

由图 9 可知，探针 COCB 浓度在 10~50 μmol/L 当细胞中只加入 COCB 时，蓝色通道出现较强的荧
范围内，MC3T3-E1 细胞的细胞存活率均>90%，表 光，而绿色通道基本观察不到荧光（图 10f 和 g）。
明探针 COCB 具有很低的细胞毒性，可用于细胞检测。 而当先把细胞与 COCB 共培养 30 min，再加肼继续
探针 COCB 在 MC3T3-E1 细胞中的成像结果如 培养 60 min 后，蓝色通道中荧光消失，在绿色通道
图 10 所示。 中出现较强的荧光（图 10j 和 k）。以上结果表明，
由图 10 可知，在 405 nm 激发波长下，细胞自 探针 COCB 具有很好的细胞膜渗透性，能用于活细
身在蓝色通道和绿色通道均没有荧光（图 10b 和 c）。 胞中肼的比率荧光检测。

a~d 为空白 MC3T-E1 细胞的图像；e~h 为 MC3T-E1 细胞与 10 μmol/L COCB 在 37 ℃培养 30 min 的图像；i~l 为先用 10 μmol/L 探针
COCB 预处理细胞 30 min，然后用 500 μmol/L 肼在 37 ℃培养 60 min 的图像
图 10 探针 COCB 在 MC3T3-E1 细胞中的共聚焦成像图
Fig. 10 Confocal fluorescence images of probe COCB in MC3T3-E1 cells

3 结论
参考文献：
通过 2 步反应设计合成了一种香豆素类比率型 [1] RAGNARSSON U. Synthetic methodology for alkyl substituted
hydrazines[J]. Chemical Society Reviews, 2001, 30(4): 205-213.
肼荧光探针 COCB。该探针对肼具有明显的荧光比 [2] KHALED K F. Experimental and theoretical study for corrosion
率响应，与肼反应后其溶液由蓝色荧光变为青色荧 inhibition of mild steel in hydrochloric acid solution by some new
hydrazine carbodithioic acid derivatives[J]. Applied Surface Science,
光。通过 HPLC 和高分辨质谱探讨了探针对肼的识
2006, 252(12): 4120-4128.
别机制，识别机制与肼对 4-溴丁酰基的选择性脱保 [3] ROSCA V, KOPER M T M. Electrocatalytic oxidation of hydrazine
护而引起探针中 ICT 效应的强弱变化有关。性能测 on platinum electrodes in alkaline solutions[J]. Electrochimica Acta,
2008, 53(16): 5199-5205.
试结果表明，COCB 对肼具有选择性好、抗干扰能 [4] LAN R, IRVINE J T S, TAO S W. Ammonia and related chemicals
力强、检出限低（0.15 μmol/L）、检测范围宽（0~ as potential indirect hydrogen storage materials[J]. International Journal
of Hydrogen Energy, 2012, 37(2): 1482-1494.
250 μmol/L）及 pH 适用范围宽（6~11）等优点。此
[5] SEROV A, KWAK C. Direct hydrazine fuel cells: A review[J].
外，该探针不仅能用于实际水样、土壤环境样品中 Applied Catalysis B: Environmental, 2010, 98(1/2): 1-9.
肼的检测，还能用于活细胞中肼的成像，具有较好 [6] NGUYEN H N, CHENOWETH J A, BEBARTA V S, et al. The
toxicity, pathophysiology, and treatment of acute hydrazine propellant
的实际应用前景。 exposure: A systematic review[J]. Military Medicine, 2021, 186(3/4):