Page 105 - 《精细化工》2023年第12期
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第 12 期              盛   筱,等:  一种检测环境样品和细胞中肼的香豆素类比率型荧光探针                                 ·2647·


                                                               样品转移到 3 mL COCB(5 μmol/L)溶液中,70 min
                                                               后在 365 nm 紫外灯照射下,溶液呈现较强的青色荧
                                                               光。将溶液的上清液进行荧光光谱测定,结果见图
                                                               8b。由图 8b 可知,加肼处理后土壤溶液的 I 480 /I 420
                                                               较未加肼时显著增大。以上结果说明,探针 COCB
                                                               可用于土壤中肼的检测。





            图 6  CHCO、探针 COCB 及探针 COCB 与不同浓度肼反
                  应后溶液的 HPLC 谱图
            Fig. 6    HPLC spectra of CHCO, probe COCB and solutions
                   of probe COCB reacting with hydrazine of different
                   concentrations


















               图 7   探针 COCB 与肼反应后溶液的高分辨质谱图
            Fig. 7    High resolution mass spectrum of solution of probe
                   COCB reacting with hydrazine

                      表 2   实际水样中肼含量的测定                        图 8   探针 COCB 与肼预处理和未预处理土壤溶液作用
            Table 2    Determination of hydrazine in actual water   后样品在 365 nm 紫外灯下的照片(a)及其对应
                      samples
                                                                    I 480 /I 420 (b)
                      加标值/     实测值/                 RSD/%      Fig. 8    Photographs of the samples under UV light at 365
              水样                         回收率/%
                     (μmol/L)   (μmol/L)            (n=3)            nm after interaction of probe COCB with hydrazine
             自来水       5.00      5.24     104.8      1.4             pretreated and  unpretreated soil solutions (a) and
                      10.00     10.70     107.0      1.1             their corresponding I 480 /I 420  (b)

                      25.00     24.04      96.2      0.7       2.7   细胞毒性和细胞成像
             湖水        5.00      5.21     104.2      0.8           在细胞成像之前,先用 MTT 法测试了不同浓度
                      10.00     10.17     101.7      1.6
                      25.00     26.24     105.0      1.8       的探针 COCB 对 MC3T3-E1 细胞的细胞毒性,结果
                                                               如图 9 所示。
                 由表 2 可知,在两种实际水样中肼的回收率为
            96.2%~107.0%,相对标准偏差(RSD)<1.8%,表明
            探针 COCB 可用于实际水样中肼的检测,并具有较
            高的精密度和准确度。
                 从周边地区采集沙土和田土作为实验用样品,
            参照文献[35]的方法,考察了探针 COCB 在实际土
            壤样品中的应用,结果见图 8。首先,取 1 g 沙土或
            田土加入到 3 mL 探针 COCB 溶液(5 μmol/L)中,
            在 365 nm 紫外灯下观察其荧光情况,结果见图 8a。
            由图 8a 可见,样品呈强蓝色荧光,表明土壤中的物

            质对 COCB 的荧光性质不会造成影响。另取 1 g 田                                 图 9   探针 COCB 的细胞存活率
            土或沙土,先用 2 mmol/L 肼溶液处理,然后将土壤                               Fig. 9    Cell viability of probe COCB
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