Page 145 - 《精细化工》2023年第12期
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第 12 期 肖志伟,等: 枯草芽孢杆菌发酵甘草渣产 2,3-丁二醇和乙偶姻 ·2687·
同时利用葡萄糖和木糖的现象,但利用程度存在差
异,实验组对木糖的消耗量和消耗速率均高于对照
组。实验组中的木糖在 70 h 全部消耗殆尽,平均消
耗速率为 0.27 g/(L·h),而且木糖消耗速率也因为葡
萄糖效应在葡萄糖消耗殆尽前后存在差异。当培养
基中存在葡萄糖时,木糖消耗量为 10.6 g/L,消耗
速率为 0.23 g/(L·h);当培养基中葡萄糖全部消耗完,
木糖消耗速率提升至 0.34 g/(L·h)。相比之下,发酵
结束后,前 96 h 对照组木糖总消耗量为 12.7 g/L,
平均消耗速率为 0.13 g/(L·h),这表明菌株在实验组
中木糖消耗速率大于对照组,且在实验组中受葡萄糖
效应的影响较对照组更小,对木糖的利用程度更佳。
由图 3b、d 可见,以酶解液充当发酵碳源时(图
3d),菌种的发酵主产物 2,3-丁二醇和乙偶姻的产量
和分布相较于对照组(图 3b)也发生了变化。实验
组中 2,3-丁二醇产量相比于对照组有明显提高,在
发酵 64 h 时,2,3-丁二醇产量最高,达 36.5 g/L。2,3-
丁二醇产量在前 40 h 增长速率较快,到 40 h 后 2,3-
丁二醇的增长速率降低,推测原因是培养基中的葡
萄糖消耗殆尽,影响了产物的增长速率,而乙偶姻
的产量在实验组和对照组均呈现较为缓慢的增长。
有趣的是,发酵 70 h 时培养基中葡萄糖、木糖均消
耗完全,实验组中 2,3-丁二醇产量呈下降趋势,而
乙偶姻产量呈显著上升趋势,且在发酵 88 h 后乙偶
姻的产量高于 2,3-丁二醇,说明葡萄糖消耗完有利
于 2,3-丁二醇向乙偶姻转化。发酵 64 h 时,实验组
中主产物(2,3-丁二醇+乙偶姻)产量最高,达 43.9
g/L,此时还原糖转化率(即还原糖转化为主产物)
为 0.42 g/g,生产强度为 0.69 g/(L·h);对照组中目
标产物产量为 45.9 g/L,此时还原糖转化率为 0.44
g/g,生产强度为 0.52 g/(L·h)。实验组总目标产物产
量及还原糖转化率略低于对照组,其原因是菌体生
长过于旺盛导致碳代谢流向生物量偏移。对代谢副
产物的分析表明,实验组和对照组的副产物(乙酸、
乳酸、柠檬酸)均一致,且产量不存在显著差异,
最高产量均<1 g/L。
图 3 枯草芽孢杆菌在对照组糖液(a、b)及甘草渣酶解
液(c、d)中的生长代谢情况 3 结论
Fig. 3 Growth and metabolism of Bacillus subtilis in the
control (a, b) and glycyrrhiza residue hydrolysate
(c, d) 本文考察了稀碱溶液以及 EOAA-稀碱对甘草
渣的预处理效果及酶解糖化的影响,发现在较低温
因实验组中菌株生长更快,导致对葡萄糖及木 度下稀碱更有利于去除甘草渣中的木质素。通过比
糖的消耗速度显著高于对照组。经过 46 h 的发酵, 较稀碱溶液种类、浓度和反应温度对甘草渣中木质
实验组中葡萄糖全部消耗完,而对照组中剩余葡萄 纤维组分变化及酶解效果的影响,发现在温度
糖质量浓度为 37.2 g/L,实验组葡萄糖消耗速率相 100 ℃处理 1.5 h 条件下,质量分数 2%的 NaOH 水
较于对照组提高了 76%,此趋势与实验组菌体密度 溶液预处理效果最佳,木质素去除率达 54.1%、纤
高于对照组相一致。实验组和对照组均出现了菌株 维素回收率为 77.2%,24 h 酶解后,葡萄糖得率达