Page 72 - 《精细化工》2023年第2期

·294· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

果。相对而言，更有利于 BSP-A 回收的 Sevage 法、 如表 1 所示，未进行脱蛋白处理的 BSP-A 主要
木瓜蛋白酶法和三相分离法，蛋白脱除率均<32%。 由 D-甘露糖和 D-葡萄糖组成，并伴有少量的 L-阿
与于晓红等 [15] 的研究结果一致，蛋白酶法和 Sevage 拉伯糖。摩尔分数比为 71.22∶26.75∶2.03，其中
法条件温和，除蛋白效率不高。在多糖的功效开发 L-阿拉伯糖是较少检测到的成分 [27-28] 。TCA 法、木
中，多糖水提物中的蛋白、有机杂质以及色素都会 瓜蛋白酶法、Sevage 法和大孔树脂 AB-8 吸附法都
在不同程度中影响多糖的纯化鉴定和结构表征。本 较好地保留了与未处理时相似的单糖组成，没有对
研究中，以 BSP-A 回收率和蛋白脱除率作为重要指 单糖成分造成影响。而三相分离法和 TCA+正丁醇
标，对评价脱蛋白方法具有重要意义。除此之外， 法都对 BSP-A 的单糖组分造成了影响，使 D-甘露糖
脱蛋白处理后的多糖结构和生物活性也应该成为方 和 D-葡萄糖的比例发生了改变，减少了 D-葡萄糖的
法评价的准则。 占比。与水提取相比，碱辅助提取的 BSP 的 M w 更
高，可能是由于碱性条件更有利于高 M w 多糖的提

取。结果表明，不同的脱蛋白方法对 BSP-A 的 M w
影响轻微。
2.4.2 Zeta 电位的测定
在水相溶液中，Zeta 电位反映了粒子表面离子
的解离，可以表征分散体系的稳定性。通过透析处
理，可以排除溶液中盐离子对 Zeta 电位的影响。在
前期的研究中发现，BSP 溶液带负电，Zeta 电位绝对
值<10 mV，被认为是相对不稳定的分散体系。图 3
为不同脱蛋白方法对 BSP-A 的 Zeta 电位的影响。

图 2 不同脱蛋白方法对 BSP-A 蛋白质量分数和蛋白脱
除率的影响
Fig. 2 Effect of different deproteinization methods on protein
mass fraction and protein removal yield of BSP-A

2.4 脱蛋白方法对 BSP-A 结构的影响
2.4.1 单糖组分和 M w 测定
在前期的研究中指出，BSP 是一种葡甘露聚糖，
主要由 1,4-连接的 D-甘露糖和 1,4-连接的 D-葡萄糖
组成（摩尔分数比约为 3∶1，仅在一些馏分中发现
少量的 D-半乳糖和 L-阿拉伯糖）。表 1 为不同脱蛋

白方法处理的 BSP-A 中单糖组分和 M w 的比较。 图 3 不同脱蛋白方法对 BSP-A Zeta 电位的影响
Fig. 3 Effect of different deproteinization methods on Zeta
表 1 不同脱蛋白方法处理的 BSP-A 中单糖组分含量和 potential of BSP-A
M w 的比较
Table 1 Comparison of different deproteinization methods 从图 3 可知，Sevage 法和三相分离法对 BSP-A
on BSP-A monosaccharides components and M w
溶液的 Zeta 电位结果影响较小，而 TCA 法和 TCA+
摩尔分数/% +
脱蛋白方法 M w/×10 3 正丁醇法由于加入了 H ，可能使 BSP-A 分子暴露的
D-葡萄糖 D-甘露糖 L-阿拉伯糖
羟基减少，影响了 Zeta 电位，使其绝对值变小。木瓜
未处理 26.75 71.22 2.03 305.95
蛋白酶和大孔树脂 AB-8 与 BSP-A 溶液的反应对
TCA 法 28.23 71.40 0.37 337.21
BSP-A 溶液的 Zeta 电位产生了影响，可能在 BSP-A
TCA+正丁醇法 8.66 89.03 2.31 347.35
链上引入了负电荷基团，使 BSP-A 的聚集效应减弱。
木瓜蛋白酶法 27.04 72.51 0.45 357.42
2.4.3 FTIR 分析
Sevage 法 27.33 71.63 1.03 247.10
三相分离法 14.36 85.64 — 288.62 BSP-A 的 FTIR 谱图如图 4 所示。由图 4 可知，
大孔树脂 AB-8 吸附法 26.37 72.98 0.65 503.46 不同脱蛋白方法对 BSP-A 的 FTIR 谱图没有明显影
注：“—”为未检出。 响，FTIR 谱图中呈现的吸收峰都表明，BSP-A 表现