Page 166 - 《精细化工》2023年第8期
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·1780· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷
快脱去 4 位乙酰基(序号 5),但对 2 位乙酰基无 由图 2 可知,当酶用量为 2%时,催化反应较慢;
作用;Novozym435 脂肪酶和猪肝脏来源的酯酶均 当酶用量为 10%时,产率提高至 75%;酶用量继续
可脱去 2 位和 4 位乙酰基(序号 6 和 7),但酯酶 增加时,目标产物产率提高不明显。因此,酶用量
价格较高。因此,选择 Novozym435 脂肪酶为脱乙 确定为底物质量的 10%。
酰基脂肪酶。 按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量为 10%、反
对脂肪酶催化水解体系不同反应温度、酶用量、 应温度为 40 ℃、底物浓度为 0.6 mol/L、pH 为 7.8,
反应时间、pH 和底物浓度对产率的影响进行了考 考察反应时间对产率的影响,结果见图 3。
察,通过单因素实验确定该反应的最佳工艺条件。
按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量(以底物质量计,
下同)为 5%、底物浓度为 0.6 mol/L(底物物质的
量 2.2 mmol,以磷酸盐缓冲溶液为溶剂,下同)、
反应时间 10 h、pH 为 7.8,考察温度对产率的影响,
结果见图 1。
图 3 反应时间优化
Fig. 3 Optimization of reaction time
由图 3 可知,反应时间为 8 h 时,底物转化不
充分,产率较低,当时间延长至 12 h 时,产率达到
最高,继续反应产率基本保持不变。因此,最佳反
应时间确定为 12 h。
图 1 反应温度优化
Fig. 1 Optimization of reaction temperature 按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量为 10%、反应
温度为 40 ℃、底物浓度为 0.6 mol/L、反应时间 12 h,
由图 1 可知,当温度为 30 ℃时,酶活较弱, 考察反应 pH 对产率的影响,结果见图 4。
反应速率慢,10 h 时底物和中间体未完全转化,产
率仅为 63%;当温度为 40 ℃时,产率达到最大;
当温度继续升高时,产率逐渐下降,可能是由于温
度升高,使酶活降低,反应速率变慢。因此,最佳
反应温度确定为 40 ℃。
按 1.2.2 节实验条件,固定反应温度为 40 ℃、
底物浓度为 0.6 mol/L、反应时间 10 h、pH 为 7.8,
考察酶用量对产率的影响,结果见图 2。
图 4 反应 pH 优化
Fig. 4 Optimization of reaction pH
由图 4 可知,当 pH 为 8.0 时,产率达到最高,
为 78%,继续增加 pH,产率有所下降,可能是因为
碱性过大造成产物分解所致。因此,反应 pH 确定
为 8.0。
按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量为 10%、反
图 2 酶用量优化 应温度为 40 ℃、反应时间 12 h、pH 为 8.0,考察
Fig. 2 Optimization of enzyme amounts 底物浓度对产率的影响,结果见图 5。