Page 166 - 《精细化工》2023年第8期
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·1780·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 40 卷

            快脱去 4 位乙酰基(序号 5),但对 2 位乙酰基无                            由图 2 可知,当酶用量为 2%时,催化反应较慢;
            作用;Novozym435 脂肪酶和猪肝脏来源的酯酶均                        当酶用量为 10%时,产率提高至 75%;酶用量继续
            可脱去 2 位和 4 位乙酰基(序号 6 和 7),但酯酶                      增加时,目标产物产率提高不明显。因此,酶用量
            价格较高。因此,选择 Novozym435 脂肪酶为脱乙                       确定为底物质量的 10%。
            酰基脂肪酶。                                                 按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量为 10%、反
                 对脂肪酶催化水解体系不同反应温度、酶用量、                         应温度为 40  ℃、底物浓度为 0.6 mol/L、pH 为 7.8,
            反应时间、pH 和底物浓度对产率的影响进行了考                            考察反应时间对产率的影响,结果见图 3。
            察,通过单因素实验确定该反应的最佳工艺条件。
            按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量(以底物质量计,
            下同)为 5%、底物浓度为 0.6 mol/L(底物物质的
            量 2.2 mmol,以磷酸盐缓冲溶液为溶剂,下同)、
            反应时间 10 h、pH 为 7.8,考察温度对产率的影响,
            结果见图 1。






                                                                             图 3   反应时间优化
                                                                       Fig. 3    Optimization of reaction time

                                                                   由图 3 可知,反应时间为 8 h 时,底物转化不
                                                               充分,产率较低,当时间延长至 12 h 时,产率达到
                                                               最高,继续反应产率基本保持不变。因此,最佳反

                                                               应时间确定为 12 h。
                           图 1   反应温度优化
                  Fig. 1    Optimization of reaction temperature   按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量为 10%、反应
                                                               温度为 40  ℃、底物浓度为 0.6 mol/L、反应时间 12 h,
                 由图 1 可知,当温度为 30  ℃时,酶活较弱,                     考察反应 pH 对产率的影响,结果见图 4。
            反应速率慢,10 h 时底物和中间体未完全转化,产
            率仅为 63%;当温度为 40  ℃时,产率达到最大;
            当温度继续升高时,产率逐渐下降,可能是由于温
            度升高,使酶活降低,反应速率变慢。因此,最佳
            反应温度确定为 40  ℃。
                 按 1.2.2 节实验条件,固定反应温度为 40  ℃、
            底物浓度为 0.6 mol/L、反应时间 10 h、pH 为 7.8,
            考察酶用量对产率的影响,结果见图 2。



                                                                              图 4   反应 pH 优化
                                                                        Fig. 4    Optimization of reaction pH

                                                                   由图 4 可知,当 pH 为 8.0 时,产率达到最高,
                                                               为 78%,继续增加 pH,产率有所下降,可能是因为
                                                               碱性过大造成产物分解所致。因此,反应 pH 确定
                                                               为 8.0。
                                                                   按 1.2.2 节实验条件,固定酶用量为 10%、反

                            图 2   酶用量优化                        应温度为 40  ℃、反应时间 12 h、pH 为 8.0,考察
                    Fig. 2    Optimization of enzyme amounts   底物浓度对产率的影响,结果见图 5。
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