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第 1 期                      郑   捷,等:  海参斑软骨多糖的纯化、结构及性质分析                                   ·69·


                               A   A   A                    明 3 种多糖成分单一,纯度较高             [20] 。
                         I /%   s  1  2    100     (3)
                                   A                               结合图 1 和图 2 可以看出,利用 DEAE-52 与
                                    s
            1.4.3   羟基自由基清除能力的测定            [19]               Sephadex G-75 结合纯化海参斑软骨多糖,起到了较
                 配制 0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 g/L 多          好的纯化效果,多糖纯化后组分均一、纯度较高。
            糖溶液,取 1.0 mL 多糖溶液分别加入 1.0 mL
            9 mmol/L FeSO 4 、1.0 mL 9 mmol/L 1,10-邻二氮菲和
            1.0 mL 去离子水,摇匀,37  ℃下反应 30 min。对
            同样质量浓度的抗坏血酸作同样处理作为阳性对
            照,510 nm 下测吸光度值 A ,以蒸馏水代替多糖溶
                                     1
            液,相同条件下测吸光度值 A ,取不同质量浓度的
                                       0
            多糖溶液 1.0 mL,加入蒸馏水 3.0 mL,相同条件下
            测吸光度值 A 。羟基自由基清除率( I )用式(4)
                        2
            计算。
                                A  A     A 
                         I /%   0  1  2    100    (4)
                                   A 0

            2    结果与讨论

            2.1    海参斑软骨多糖 DEAE-52 及 Sephadex G-75
                 纯化结果
                 图 1 为海参斑软骨多糖的 DEAE-52 的洗脱
            曲线。



















                 图 1   海参斑软骨多糖的 DEAE-52 洗脱曲线                            a—FCPS-1;b—FCPS-2;c—FCPS-3
                Fig. 1    DEAE-52 elution curve of polysaccharides
                                                                     图 2  3 种多糖的 SephadexG-75 洗脱曲线
                                                               Fig. 2    Sephadex G-75 elution curves of three polysaccharides
                 由图 1 可知,海参斑软骨多糖经过 DEAE-52 纯
            化后,在 0~0.5 mol/L NaCl 溶液中每个 NaCl 溶液浓               2.2    多糖的化学组成分析
            度下分别洗脱出了一个峰,由于在 0.2、0.4 和 0.5                          表 2 为多糖的化学组成。
            mol/L NaCl 溶液中洗脱出来的多糖浓度过低,所以
            不予收集。将蒸馏水、0.1 mol/L 以及 0.3 mol/L NaCl                            表 2   多糖的化学组成
                                                                    Table 2    Chemical content of polysaccharides
            溶液洗脱出来的多糖收集,合并,透析,冻干,得
                                                                     总糖质量分数/% 蛋白质量分数/%  糖醛酸质量分数/%
            到的产品分别命名为 CPS-1、CPS-2、CPS-3。
                                                               FCPS-1  94.750.49 a  2.850.62 a  65.070.50   a
                 将 CPS-1、CPS-2、CPS-3 重新溶解后过 Sephadex
                                                               FCPS-2  92.852.11 ab  2.260.25  a  61.781.21   a
            G-75 纯化,3 个组分的多糖洗脱曲线如图 2 所示。
                                                               FCPS-3  91.471.57 b  2.050.17  a  59.400.94
                                                                                                         b
            收集洗脱曲线峰最高处收集管中溶液,合并,冻干
                                                                   注:表示方法为平均值±标准差,同列标小写字母相同,
            得到海参斑软骨多糖 FCPS-1、FCPS-2、FCPS-3。                    差异不显著(P>0.05),肩标小写字母不完全相同,差异显著
            由图 2 可以看出,3 种多糖洗脱曲线出峰对称,表                          (P<0.05)。
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