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·284·                             精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 36 卷

            备的纳米材料通常以液态形式存在，不宜长期贮                              1.2   方法
            存，会出现沉降、聚集、降解等各种不稳定现象                              1.2.1    高纯竹叶碳苷黄酮的制备
            [11-13]                             [14]
                 。可采用真空冷冻干燥法制成粉剂                  ，并加入             称取 1  g  L -BLF 溶于 10  mL 温水中（水温 30~
            适当的保护剂，以防纳米颗粒团聚                 [15] 。γ-环糊精是       45 ℃，常温下超声助溶），过滤后上聚酰胺柱（100~
            一种新型商业化制剂，具有环状中空的立体结构，                             200 目），依次采用 2 倍柱体积的 20%、30%、40%、
            能对目标物进行有效包裹，实现单层纳米材料向多                             50%（体积分数）乙醇洗脱，收集 40%~50%（体积
            层纳米材料的转变，大大提高纳米材料的稳定性，                             分数）的乙醇洗脱物，减压浓缩后上 C 18 反相柱，
            同时防止芯材渗漏         [16] ，可作为冻干保护剂改善冻干                依次用 15%、25%、30%、35%、40%、50%（体积
                                                               分数）乙醇洗脱，经 RP-HPLC 检测〔色谱条件为：
            粉的商品性，如提高溶解度、掩盖色泽、去除不良
            气味等    [17] 。                                      ODS-C 18 （250 mm× 4.6 mm×5 μm），流动相 V（甲醇）  : V
                                                               （水）=3 : 7，检测波长 330 nm，流速 0.5 mL/min，
                 本文在前期研究的基础上，采用高纯竹叶碳苷
                                                               柱温  40 ℃〕后，合并相同组分，减压浓缩除去乙
            黄酮为原料，以获得具有更高包埋率和更强生物学
                                                               醇，真空冷冻干燥得到高纯竹叶碳苷黄酮（ H -BLF）
            效应的复合纳米生物混悬液，并通过 γ-环糊精的保
                                                               备用。以异荭草苷、荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷为
            护得到冻干粉，以期实现性能和剂型的双重优化。
                                                               标准品，高效液相色谱图见图 1。
            同时，对高纯竹叶碳苷黄酮复合纳米生物材料的外

            观、结构和性能进行表征，以期为日化行业提供一
            种成分天然、工艺绿色、产品安全，并同时具有保
            湿、美白、抗衰老等多重生物学功效的新型护肤功
            能因子。

            1    实验部分

            1.1   试剂与仪器
                 低纯度竹叶黄酮（ L -BLF，硝酸铝-亚硝酸钠比

            色法测得总黄酮质量分数为 49.5%，RP-HPLC 法测
            得其 4 个碳苷质量分数为 25.1%），浙江圣氏生物科                          Ⅰ—异荭草苷；Ⅱ—荭草苷；Ⅲ—牡荆苷；Ⅳ—异牡荆苷
                                                               图 1    碳苷黄酮混标（a）和 H-BLF（b）的高效液相色谱图
            技有限公司；芫根阴离子多糖（质量分数为 94.6%），
                                                               Fig.  1    C-glycoside  flavones  (a)  and  H -BLF  (b)  by  high
            按照文献[18]自制；ε-聚赖氨酸（ε-PL，质量分数为                             performance liquid chromatography
            95%），化学纯，浙江银象生物工程有限公司；溴化
                                                                   如图 1 所示，测得 H -BLF 中 4 个碳苷总质量分
            钾（质量分数≥99.5%），光谱纯，上海阿拉丁生化
                                                               数在 90%~98%，其中，异荭草苷、荭草苷、牡荆苷、
            科技有限公司；甲醇，色谱纯，美国 TEDIA 公司；
                                                               异牡荆苷在混合物中的质量分数分别在 16%~17%、
            荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷标准品（质
                                                               39%~41%、23%~24%、16%~17%。
            量分数≥98%），成都普菲德生物技术有限公司；其
                                                               1.2.2    H -BLF 复合纳米生物材料的制备
            他化学试剂均为市售分析纯。
                                                                   称取 2 mg  H -BLF（RP-HPLC 法测得其质量分数
                 Nano  Zs90 纳 米粒径及电 位分析仪， 英国
                                                               为 95.6%）和 24 mg 芫根阴离子多糖（TP）溶于 8 mL
            Malvern 公司；HL-2B 数显恒流泵，上海嘉鹏科技
                                                               纯净水（30 ℃）中，加热搅拌溶解，得到 H -BLF-TP
            有限公司；2695 分析型高效液相色谱仪（配有 2998
                                                               溶液。另将 0.8 mg ε-PL 溶于 2 mL 纯净水中，常温下搅
            PDA 检测器、Alliance 柱温箱、四元梯度泵等），美
                                                               拌至 ε-PL 完全溶解。在低速（300 r/min）磁力搅拌下，
            国 Waters 公司；RE-52AA 旋转蒸发仪，上海亚荣生
                                                               将 2 mL ε-PL 溶液通过恒流泵（流速为 300 mL/h）
            化仪器厂；冷冻干燥机，德国 Christ 公司；Luna C 18                  滴入 8 mL  H -BLF-TP 溶液中，继续低速（300 r/min）
            柱（250 mm×4.60 mm×5 μm），美国 Phenomenex 公             磁力搅拌 30 min 后，得到 10 mL 高纯竹叶碳苷黄酮
            司；JEM-1230 透射电子显微镜，日本 JEOL 电子株                     纳米混悬液（ H -BLFnd）。
            式会社；酶标仪，美国 BioTek 仪器有限公司；                              将 γ-环糊精（γ-CD）加入 H -BLFnd 中，使其质
            AVATAR370 傅里叶变换红外光谱仪，美国 Nicolet                    量分数分别为 2%、4%、6%、8%、10%，常温下搅
            公司；DSC1 差示扫描量热仪，瑞士梅特勒托利多                           拌至完全溶解，在超低温冰箱中（80 ℃）冷冻 24 h 后，
            公司；TGA 热重分析仪，美国 PE 公司；Milli-Q 超                    于50 ℃、真空度 9~12  Pa 条件下冷冻干燥 48  h，得到
            纯水仪，美国 Millipore 公司。                               高纯竹叶碳苷黄酮复合纳米生物材料（ H -BLFnp），
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