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·728· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

乙酯萃取得到 A 2 ，绝大多数的黄酮类物质被萃取到 9.89 mg/L，对比可以看出，A 3 对 DPPH 自由基的
酯相中，花色苷被溶于水相中，从而有效地将花色 清除能力最强，其次是 A 4 。结果表明，花色苷粗提
苷和黄酮类物质分离开，此时花色苷中仍然含有少 液和经分离纯化得到的组分均具有较好的抗氧化
量的非花色苷的酚类物质，可以进一步阻止和减小 活性。
+
空气中的氧、光照和高温对花色苷的结构破坏，提 由图 6b 可知，ABTS 自由基的清除能力随 A 1 、
高花色苷的稳定性。A 2 经凝胶柱进一步纯化，将少 A 2 、A 3 和 A 4 质量浓度的增加而增大，且清除能力
量的非花色苷的酚类物质除去，得到两个花色苷组 明显高于 V C 。A 1 、A 2 、A 3 、A 4 和 V C 清除 ABTS +
分 A 3 和 A 4 ，经 HPLC-MS 鉴定 A 3 为飞燕草素-3-葡 自由基的 IC 50 分别为 99.38、97.21、78.19、85.54
+
萄糖苷、A 4 为矢车菊素-3-芸香糖苷。由两者的结构 和 116.73 mg/L，ABTS 自由基的清除能力大小顺序
可知，飞燕草素-3-葡萄糖苷结构中苯环上的羟基比 依次为：A 3 >A 4 >A 2 >A 1 >V C 。当样品的质量浓度超过
矢车菊素-3-芸香糖苷多一个，苯环上的羟基作为还 120 mg/L 时，A 1 、A 2 、A 3 、A 4 和 V C 的质量浓度与
+
原性羟基，羟基数目越多，花色苷的结构越易被破 ABTS 自由基 的 清除能 力 有良好 的 线性关 系
2
坏 [26] 。因此，矢车菊素-3-芸香糖苷的热稳定性优于 （R >0.98）。所以，黑加仑花色苷具有较好的抗氧
飞燕草素-3-葡萄糖苷。 化活性。
2.5 黑加仑花色苷体外抗氧化活性测定
不同纯度的黑加仑花色苷对 DPPH 自由基（a） 3 结论
+
和 ABTS 自由基（b）的清除率见图 6。
采用 HPLC-MS 鉴定黑加仑花色苷发现，黑加
仑中包含 5 种花色苷组分。黑加仑花色苷粗提液经
AB-8 大孔树脂-Sephadex LH-20 凝胶柱层析联用分
离纯化后得到两种花色苷，分别为飞燕草素-3-葡萄
糖苷和矢车菊素-3-芸香糖苷。pH 和温度均对黑加仑
花色苷热稳定性有一定的影响，pH 3.0 和温度 50 ℃
时，花色苷的热稳定性最强。黑加仑花色苷粗提取
物和分离纯化得到的组分热降解均符合一级动力学
模型，相同 pH 下，降解速率常数随温度的升高而
升高，而半衰期随温度的升高而减小。A 1 、A 2 、A 3 、
A 4 清除 DPPH 自由基的 IC 50 分别为 9.45、8.17、5.95
+
和 7.62 mg/L，而 A 1 、A 2 、A 3 、A 4 清除 ABTS 自由
基的 IC 50 分别为 99.38、97.21、78.19 和 85.54 mg/L。
分析 IC 50 数据可知，花色苷纯度越高，还原性羟基
越多，其抗氧化能力越强。研究结果表明，黑加仑
花色苷含量丰富且具有较强的抗氧化能力，作为一
种天然抗氧化剂，黑加仑花色苷具有良好的开发和
应用前景。
参考文献：

[1] Michalska A, Aneta Wojdyło, Grzegorz P Lysiak, et al. Functional
+
图 6 黑加仑花色苷对 DPPH 自由基（a）和 ABTS 自由
relationships between phytochemicals and drying conditions during
基（b）的清除率 the processing of blackcurrant pomace into powders[J]. Advanced
Fig. 6 Scavenging activities of the anthocyanins obtained Powder Technology, 2017, 28(5): 1340-1348.
+
from blackcurrant on DPPH (a) and ABTS free [2] Xia Qile (夏其乐), Chen Jianbing (陈剑兵), Gao Haiyan (郜海燕),
radicals (b) et al. Effect of sodium D-isoascorbate on the quality of blueberry
jam[J]. Food Science (食品科学), 2018, 39(2): 20-24.
由图 6a 可知，随 A 1 、A 2 、A 3 和 A 4 质量浓度的 [3] Rubinskiene M, Jasutiene I, Venskutonis P R, et al. HPLC
增加，清除 DPPH 自由基的能力逐渐增加，且清除 determination of the composition and stability of blackcurrant
anthocyanins[J]. Journal of Chromatographic Science, 2005, 43(9):
能力优于 V C 。半抑制浓度（IC 50 ）通常被用来表示
478-482.
抗氧剂对自由基的清除能力，IC 50 越小，表示其抗 [4] Jia Na (贾娜), Kong Baohua (孔保华), Liu Qian (刘骞), et al. Effect
氧化能力越强。A 1 、A 2 、A 3 、A 4 和 V C 清除 DPPH of heating temperature and time on the content and antioxidant
activity of anthocyanins from black currant[J]. Food Science(食品科
自由基的 IC 50 分别为 9.45、8.17、5.95、7.62 和 学), 2012, 33(21): 73-77.