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第 7 期 周世兴,等: 全叶青兰花的挥发油成分分析及其除草活性检测 ·1353·
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中药材 。药理研究表明,全叶青兰中主要含黄酮 蒸气蒸馏 4 h,收集蒸馏出来的挥发油,并加入无水
苷类,还含木犀草素、甾醇、内酯化合物、皂苷、 硫酸钠进行干燥,将干燥后的收集物加入到旋蒸瓶
酸性树脂等,具有明显的平喘、止咳、祛痰、消炎 中旋转蒸发,得到有特殊气味的淡黄色挥发油。
抗菌作用 [3-5] 。 1.2.2 全叶青兰花精油提取得率的计算
青兰属植物含丰富的挥发油成分,其中以香青 青兰花挥发油产油率/%=V/W 100
兰的研究最多,并已形成规模化种植 [6-9] 。多种青兰 其中,V:所得精油的体积(mL);W:青兰花干重
属植物的挥发油都具有抑菌、抗氧化、镇咳平喘及 (g)。
抗病毒等作用 [8-14] 。全叶青兰的挥发油提取及主成 1.2.3 全叶青兰花挥发油成分的分析鉴定
分研究较少,刘建英等 [15] 利用顶空固相微萃取结合 采用 GC/MS 法对青兰花挥发油成分进行分析
色谱质谱技术分析了全叶青兰中挥发性成分的组成 鉴定:Agilent DB-5MS 毛细管柱(30 m×0.25 mm×
和含量,但水蒸气蒸馏法提取全叶青兰挥发性成分 0.25 μm),载气为氦气,流速 1 mL/min,运用程序
的相关文献研究还鲜见报道。与其他提取方法相比, 升温模式,起始温度为 60 ℃保持 5 min,以 3 ℃/min
水蒸气蒸馏法具有设备成本低、操作简单、条件简 的速率程序升温至 280 ℃。进样口温度 280 ℃,进
单且无污染(无溶剂残留)等优点,很多花挥发油的 样量 1 μL,进样比例 50∶1;电离方式:EI,电离
提取都采用此方法 [16] 。多种唇形科植物挥发油被研 能量:70 eV,离子源发生器温度:230 ℃,质量扫
究具有一定的除草活性,在研究较多的百里香属 描范围:40~800 amu,溶剂延迟 3 min。
(Thymus)和牛至属(Origanum)植物中,其挥发 1.2.4 全叶青兰花挥发油的植物毒活性实验
油均表现出较强的除草活性 [17-19] 。而青兰属植物挥 运用培养皿法检测挥发油的植物毒活性,选用
发油的除草活性还鲜见报道。 双子叶杂草反枝苋(Amaranthus retroflexus)及单子
本文利用水蒸气蒸馏法和气相色谱-质谱联用
叶杂草早熟禾( Poa annua)和 稗( Echinochloa
法(GC-MS)对全叶青兰花的挥发性成分进行提取
crusgalli)进行活性测定。在直径 9 cm 的培养皿中
与分析,并对其除草活性进行了检测,以期探讨将
放入一张滤纸,均匀地撒上 20 粒以质量分数 0.5%
全叶青兰花挥发油开发为植物除草剂的潜力。
HgCl 2 消毒处理后的受试植物种子。将青兰花挥发
1 实验部分 油用含质量分数 0.2%丙酮的蒸馏水溶解分别稀释
至 0.25、0.5、1、2 mL/L,在每个培养皿中各加入
1.1 材料与仪器 4 mL,对照则加入 4 mL 含有等量丙酮的蒸馏水,
全叶青兰植株于 2018 年 7 月 8 日采集于新疆维 每个处理重复 3 次,置于 25 ℃下黑暗培养。反枝苋
吾尔自治区乌鲁木齐市南山小渠子附近,经度 培养 5 d 后测量其根长苗高,早熟禾和稗在培养 7 d
871625,纬度 435348,海拔 1683 m。样品经 后进行测量。
中国科学院新疆生态与地理研究所标本馆鉴定,标 1.3 数据分析
本(编号:XJBI30003062)保存于中国科学院新疆 GC/MS 分析所得的挥发油总离子流色谱图经
生态与地理研究所标本馆。 NIST05 标准质谱库检索并参考相关文献,用 Excel
正己烷(色谱纯),上海阿拉丁生化科技股份有 2013 对所得的成分进行统计分析。用单因素方差分
限公司;无水硫酸钠,AR,天津永晟精细化工有限 析(ANOVA)检测挥发油除草活性是否达到显著性
公司;蒸馏水,实验室自制。
(p<0.05),并用 Fisher’s LSD 检验进行统计学分
KMD 型可调控温电热套,山东鄄城华鲁电热仪 析,所有统计分析均采用 SPSS 13 软件包进行,并
器有限公司;圆底烧瓶、冷凝管、挥发油提取器,
运用 Excel 2013 进行作图。
四川蜀牛玻璃仪器有限公司;IKA RV10 型旋蒸仪,
德国 IKA 集团;Agilent 7890A-5975C 气相色谱-质 2 结果与讨论
谱联用仪,DB-5MS 毛细管柱(30 m×0.25 mm×
0.25 μm),美国安捷伦公司。 2.1 全叶青兰花挥发油的组成成分
1.2 方法 以水蒸气 蒸馏法得 到全叶青 兰花挥发油
1.2.1 青兰花挥发油的提取 0.1 mL,产油率约 0.17%。采用 GC-MS 联用法对青
采用水蒸气蒸馏法对青兰花挥发油进行提取: 兰花的挥发性物质进行分析,共鉴定出 33 个化合
将室内阴干的青兰花 60 g 加入到圆底烧瓶中,加入 物,占挥发油总量的 95.97%。其 GC/MS 分析结果
适量蒸馏水至刚好淹没材料,浸泡一夜后,进行水 见表 1。