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第 7 期                   周世兴,等:  全叶青兰花的挥发油成分分析及其除草活性检测                                   ·1353·


                   [3]
            中药材 。药理研究表明,全叶青兰中主要含黄酮                             蒸气蒸馏 4 h,收集蒸馏出来的挥发油,并加入无水
            苷类,还含木犀草素、甾醇、内酯化合物、皂苷、                             硫酸钠进行干燥,将干燥后的收集物加入到旋蒸瓶
            酸性树脂等,具有明显的平喘、止咳、祛痰、消炎                             中旋转蒸发,得到有特殊气味的淡黄色挥发油。
            抗菌作用     [3-5] 。                                   1.2.2    全叶青兰花精油提取得率的计算
                 青兰属植物含丰富的挥发油成分,其中以香青                                 青兰花挥发油产油率/%=V/W  100
            兰的研究最多,并已形成规模化种植                 [6-9] 。多种青兰       其中,V:所得精油的体积(mL);W:青兰花干重
            属植物的挥发油都具有抑菌、抗氧化、镇咳平喘及                             (g)。
            抗病毒等作用       [8-14] 。全叶青兰的挥发油提取及主成                 1.2.3    全叶青兰花挥发油成分的分析鉴定
            分研究较少,刘建英等           [15] 利用顶空固相微萃取结合                  采用 GC/MS 法对青兰花挥发油成分进行分析
            色谱质谱技术分析了全叶青兰中挥发性成分的组成                             鉴定:Agilent  DB-5MS 毛细管柱(30 m×0.25 mm×
            和含量,但水蒸气蒸馏法提取全叶青兰挥发性成分                             0.25 μm),载气为氦气,流速 1 mL/min,运用程序
            的相关文献研究还鲜见报道。与其他提取方法相比,                            升温模式,起始温度为 60 ℃保持 5 min,以 3 ℃/min
            水蒸气蒸馏法具有设备成本低、操作简单、条件简                             的速率程序升温至 280 ℃。进样口温度 280 ℃,进
            单且无污染(无溶剂残留)等优点,很多花挥发油的                            样量 1  μL,进样比例 50∶1;电离方式:EI,电离
            提取都采用此方法         [16] 。多种唇形科植物挥发油被研                能量:70 eV,离子源发生器温度:230  ℃,质量扫
            究具有一定的除草活性,在研究较多的百里香属                              描范围:40~800 amu,溶剂延迟 3 min。
            (Thymus)和牛至属(Origanum)植物中,其挥发                      1.2.4    全叶青兰花挥发油的植物毒活性实验
            油均表现出较强的除草活性               [17-19] 。而青兰属植物挥            运用培养皿法检测挥发油的植物毒活性,选用
            发油的除草活性还鲜见报道。                                      双子叶杂草反枝苋(Amaranthus retroflexus)及单子
                 本文利用水蒸气蒸馏法和气相色谱-质谱联用
                                                               叶杂草早熟禾( Poa annua)和 稗( Echinochloa
            法(GC-MS)对全叶青兰花的挥发性成分进行提取
                                                               crusgalli)进行活性测定。在直径 9 cm 的培养皿中
            与分析,并对其除草活性进行了检测,以期探讨将
                                                               放入一张滤纸,均匀地撒上 20 粒以质量分数 0.5%
            全叶青兰花挥发油开发为植物除草剂的潜力。
                                                               HgCl 2 消毒处理后的受试植物种子。将青兰花挥发
            1    实验部分                                          油用含质量分数 0.2%丙酮的蒸馏水溶解分别稀释
                                                               至 0.25、0.5、1、2  mL/L,在每个培养皿中各加入
            1.1    材料与仪器                                       4 mL,对照则加入 4  mL 含有等量丙酮的蒸馏水,
                 全叶青兰植株于 2018 年 7 月 8 日采集于新疆维                  每个处理重复 3 次,置于 25 ℃下黑暗培养。反枝苋
            吾尔自治区乌鲁木齐市南山小渠子附近,经度                               培养 5 d 后测量其根长苗高,早熟禾和稗在培养 7 d
            871625,纬度 435348,海拔 1683  m。样品经              后进行测量。
            中国科学院新疆生态与地理研究所标本馆鉴定,标                             1.3   数据分析
            本(编号:XJBI30003062)保存于中国科学院新疆                           GC/MS 分析所得的挥发油总离子流色谱图经
            生态与地理研究所标本馆。                                       NIST05 标准质谱库检索并参考相关文献,用 Excel
                 正己烷(色谱纯),上海阿拉丁生化科技股份有                         2013 对所得的成分进行统计分析。用单因素方差分
            限公司;无水硫酸钠,AR,天津永晟精细化工有限                            析(ANOVA)检测挥发油除草活性是否达到显著性
            公司;蒸馏水,实验室自制。
                                                               (p<0.05),并用 Fisher’s  LSD 检验进行统计学分
                 KMD 型可调控温电热套,山东鄄城华鲁电热仪                        析,所有统计分析均采用 SPSS  13 软件包进行,并
            器有限公司;圆底烧瓶、冷凝管、挥发油提取器,
                                                               运用 Excel 2013 进行作图。
            四川蜀牛玻璃仪器有限公司;IKA RV10 型旋蒸仪,
            德国 IKA 集团;Agilent  7890A-5975C 气相色谱-质              2   结果与讨论
            谱联用仪,DB-5MS 毛细管柱(30  m×0.25  mm×
            0.25 μm),美国安捷伦公司。                                  2.1   全叶青兰花挥发油的组成成分
            1.2    方法                                              以水蒸气 蒸馏法得 到全叶青 兰花挥发油
            1.2.1    青兰花挥发油的提取                                 0.1 mL,产油率约 0.17%。采用 GC-MS 联用法对青
                 采用水蒸气蒸馏法对青兰花挥发油进行提取:                          兰花的挥发性物质进行分析,共鉴定出 33 个化合
            将室内阴干的青兰花 60 g 加入到圆底烧瓶中,加入                         物,占挥发油总量的 95.97%。其 GC/MS 分析结果
            适量蒸馏水至刚好淹没材料,浸泡一夜后,进行水                             见表 1。
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