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第 7 期                          张璟琳，等:  树苔浸膏中关键气味活性化合物                                   ·1389·


                                        表 1    树苔浸膏中挥发性成分的 GC-MS 分析条件
                                 Table 1    GC-MS analysis conditions of volatilities in treemoss extracts
                    型号                                            实验条件
                                            HP-5MS 毛细管柱（30 m × 0.25 mm, 0.25 μm）；初温 50 ℃，以 5 ℃/min 升至 140 ℃，保
                               气相色谱条件       持 5 min，再以 10 ℃/min 升至 240 ℃，保持 5 min，最后以 20 ℃/min 升至 300 ℃，保持
             TRACE1310-ISQ LT               10 min；分流比 100︰1，载气（He）流速 1.0 mL/min
             GC-MS
                                            EI 源，电子能量 70  eV，离子源温度 250  ℃，传输线温度 280  ℃，质量扫描范围 m/Z
                               质谱条件
                                            35~450，全扫描
                                            TG-WAX 毛细管柱（30 m × 0.25 mm, 0.25 μm）；初温 50  ℃，以 5  ℃/min 升至 140  ℃，
                               气相色谱条件       保持 1 min，再以 5 ℃/min 升至 210  ℃，保持 5 min，再以 10  ℃/min 升至 230  ℃，保持
             TRACE ULTRA-DSQⅡ               10 min；分流比 100︰1，载气（He）流速 1.0 mL/min。
             GC-MS
                                            EI 源，电子能量 70  eV，离子源温度 250  ℃，传输线温度 240  ℃，质量扫描范围 m/Z
                               质谱条件
                                            35~450，全扫描

            1.2.3    定性方法                                      加入到 2.000 g 树苔浸膏样品中，经 SAFE 处理后，
                 采用 NIST14 谱库检索、标准品比对、双柱保                      浓缩液定容至 2.0 mL，进样量 1.0 μL。
            留指数、嗅闻香气特征进行定性。                                        对 21 种 FD 因子较高的化合物进行定量分析，
                 保留指数（retention index，RI）定性：在相同                以待定量化合物与对应内标化合物的质量浓度之比
            色谱条件下，分别将样品与正构烷烃（C 5 ~C 40 ）前                      为横坐标，以待定量化合物与内标化合物峰面积之
            后进样进行分析，通过计算公式（1）计算出保留指                            比为纵坐标，建立内标标准曲线，然后通过标准曲
            数，并与文献数据做对比，将绝对值相差 10 以内的                          线计算浸膏中香味活性成分的含量。
            确定为同一化合物。                                              其余香气活性化合物采用半定量分析， 根据内标
                                        tt                    物的质量浓度，内标物的峰面积与目标物的峰面积
                        RI 100n    100  n          （1）
                                       t n 1  t   n          计算出目标物质的相对浓度，计算方法如公式（2）：
            式中：n 和 n+1 分别为未知化合物流出前后正构烷                                          =  IS  ×A / A IS       （2）
            烃碳原子数；t 为未知化合物保留时间；t n 和 t n+1 为                   式中： 为目标物质的质量浓度，μg/g  ； IS 为内标
            相应正构烷烃的保留时间（t n <t<t n+1 ）。                        物的质量浓度，μg/g；A 为目标物质的峰面积；A IS
            1.2.4    香气活性成分分析                                  为内标物的峰面积。
                 采用嗅闻仪（GC-O）和香气提取物稀释分析                         1.2.6    OAV 的计算
            （AEDA）对树苔浸膏中的活性成分进行分析，具                                根据公式（3）计算化合物的 OAV 值。
            体分析条件和操作过程如下。                                                      OAV   C i  / OT          （3）
                                                                                           i
                 色 谱条件：色 谱柱及升温 条件同 1.2.2 中                     式中：C i 为化合物的质量浓度，μg/g；OT i 为该化合
            HP-5MS 毛细管柱的升温程序，不分流进样，载气                          物在水中的阈值，μg/g。
            （N 2 ）流速 1.0 mL/min，进样量 1.0 μL。样品经进                2    结果与讨论
            样口解析后，经 GC 色谱柱分离后，分别进入 FID
            检测器和嗅闻检测器，分流比为 1︰2。                                2.1    树苔浸膏中挥发性成分定性分析结果
                 嗅闻仪条件：接口温度 200 ℃，加热线温度                            样品经 SPME 或 SAFE 处理，分别经过两种不
            250 ℃，氮气输出流量 15 mL/min。3 个评价员在嗅                    同极性的毛细管柱进行分离，进入质谱进行分析，
            闻口记录所闻到的香味特征和保留时间。                                 同时 SAFE 处理后的结果经 GC-O 分析。二者所得
                 AEDA 分析：样品通过乙醚和正己烷（体积比                        结果通过 NIST 谱库比对、保留指数比对、标准品
            1∶1）以 V(样品)∶V(混合溶剂)=1∶3、1∶9、1∶                     比对，嗅闻香气特征进行定性分析，所得树苔浸膏
            27……，逐级进行稀释，稀释后的液体依次进 GC-O                         中挥发性成分定性分析结果如表 2 所示。
            分析，直到嗅闻人员嗅闻不到任何化合物的气味为                                 由表 2 可知，S1 和 S2 经 SPME 和 SAFE 两种
            止，FD 因子为每个化合物的最高稀释倍数。                              前处理共鉴定出 102 种化合物，S1 和 S2 分别鉴定
            1.2.5    定量分析                                      出 89 种和 84 种化合物，在 S1 中，含量最高的依次
                 在进行 SAFE 处理前，分别将内标物 100 μL 苯                  为酯类 42 种，芳香类 17 种，醇类 12 种；在 S2 中，
            甲酸乙酯（1.028 μg/L 溶解于正戊烷中），300 μL 邻                  含量最高的依次为酯类 47 种，芳香类 14 种，烯类
            苯二甲酸二异丁酯（1.072  μg/L 溶解于正戊烷中）                      9 种。此结果表明，树苔浸膏中主要的挥发性成分
            和 100 μL 1,3-二氯苯（1.017 g/L 溶解于正戊烷中）                为 酯类、 芳香 类、醇 类和 烯类。 两种 样品的
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