Page 154 - 精细化工2019年第9期
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·1882·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 36 卷

            仅影响花色苷得率，而且会对花色苷生理活性产生                             学提供。
                           [6]
            影响。严红光等 利用 OSE、UAE 和 MAE 法 3 种                         Agilent  1260 高效液相色谱-布鲁克质谱联用
            提取方式从兔眼蓝莓中提取花色苷。结果表明，采                             仪，美国 Agilent 公司；LAMBDA35 型紫外-可见分
                                                [7]
            用 MAE 法提取花色苷效果最好。朱璐等 和郑时莲                          光光度计，美国 Perkin Elmer 公司；CEM MARS-X
              [8]
            等 同样研究上述 3 种提取方式分别对紫薯花色苷                           微波溶剂萃取系统，美国 CEM 公司；XY-S650CT
            和茄子皮花色苷抗氧化活性的影响。研究表明，                              台式恒温超声波提取机，上海析宇仪器有限公司；
            MAE 法获得的花色苷具有最强抗氧化活性。Zhou                          HZQ-F 全温振荡培养箱，哈尔滨市东联电子技术开
              [9]
            等 研究发现，不同提取方式获得的蓝靛果花色苷                             发有限公司。
            能显著影响免疫细胞因子水平，从而影响癌细胞凋                             1.2   方法
            亡。Wang 等    [10] 采用 OSE 法从黑莓、蓝莓、草莓和                1.2.1    OSE 法提取 BP 中花色苷工艺优化
            越橘中获得花色苷提取物，探究不同来源花色苷抗                                 单因素实验：以 2.00000.0005  g  BP 样品为对
            氧化活性和抑制肝脏病变功效。结果表明，黑莓提                             象，体积分数 60%乙醇作为提取溶剂，本实验设定
            取物表现出更强的抗氧化活性和有效抑制肝脏疾病                             提取温度 30、40、50*、60、70 ℃ 5 个水平；提取
            病变发生。由此可见，不同提取方法对同种原料产                             时间 1、2、3*、4 和 5 h 5 个水平；料液比 1∶10、
            生不同的提取效果和生理活性，而同种方法对不同                             1∶20、1∶30*、1∶40 和 1∶50 g/mL 5 个水平，考
            原料产生的效果也不同，因此，需要进一步探究提                             察 3 个因素对 BP 花色苷含量的影响（*表示当考察
            取方式对花色苷含量和生理活性的影响。                                 其他参数对 BP 花色苷含量影响时，用*标记的因素
                 蓝莓含有丰富的活性成分，具有很高的医学和                          保持恒定水平，下同）。
                                                                                                 3
            营养价值，其酸度和甜度适中，因此，适合于加工                                 依据单因素实验结果，设计 L 9 (3 )正交实验，
            果汁和果酒。在加工生产过程中形成的副产物果渣，                            因素水平编码如表 1 所示。

            内部含有大量花色苷等活性成分。果渣通常被遗弃，                            表 1  OSE 法提取 BP 中花色苷的 L 9 (3 )正交实验因素及
                                                                                              3
            造成环境污染和资源浪费。蓝莓果渣（Blueberry                              水平
            pomace，BP）作为活性成分的重要来源，可以通过                         Table 1    Factors and levels of orthogonal tests for extraction
                                                                      of anthocyanins from BP by OSE
            适当的提取方式将其回收，提高蓝莓附加值。花色
                                                                                       因素
            苷是 BP 中主要的活性成分之一，独特的结构使其具                           水平
                                                                       提取温度/℃        提取时间/h      料液比/(g/mL)
            有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病和防衰老等功效                   [11-12] 。目
                                                                  1        40           2           1∶20
            前，虽然对蓝莓花色苷提取方法和生理活性研究较
                                                                  2        50           3           1∶30
            多，但关于全面比较不同提取方式对花色苷组分及
                                                                  3        60           4           1∶40
            其提取物抗肿瘤活性影响方面的报道有限。因此，
            本文采用 OSE 法、MAE 法和 UAE 法提取 BP 花色                    1.2.2    MAE 法提取 BP 中花色苷工艺优化
            苷，探究 BP 花色苷最佳提取工艺，并对比花色苷                               单因素实验：以 2.00000.0005  g  BP 样品为对
            组分及其提取物抗肿瘤活性，以期探究不同提取方                             象，体积分数 60%乙醇为提取溶剂，本实验设定微
            法与抗肿瘤活性的关系，为花色苷深度开发提供理                             波功率 100、200、300*、400、500 W 5 个水平；提
                                                               取时间 30、40、50*、60 和 70 s 5 个水平；料液比
            论依据。
                                                               1∶10、1∶20、1∶30*、1∶40 和 1∶50  g/mL  5 个
            1   实验部分                                           水平，考察 3 个因素对 BP 花色苷含量的影响。
                                                                                                 3
                                                                   依据单因素实验结果，设计 L 9 (3 )正交实验，
            1.1   材料、试剂与仪器                                     因素水平编码如表 2 所示。
                 BP 是蓝莓饮料的副产物，哈尔滨五国城饮料有
                                                                                              3
                                                               表 2  MAE 法提取 BP 中花色苷的 L 9 (3 )正交实验因素及
            限公司。BP 置于真空冷冻干燥机冻干 48 h，用粉碎
                                                                    水平
            机进行粉碎，过 40 目筛，制成 BP 粉，避光密封保
                                                               Table 2    Factors and levels of orthogonal tests for extraction
            存在 4 ℃冰箱中备用。                                              of anthocyanins from BP by MAE
                 甲酸、乙腈、甲醇、乙醇，色谱纯，美国 Fisher                                             因素
                                                                水平
            公司；磷酸盐缓冲液（PBS）、MTT 和 DMEM 完全                               微波功率/W        微波时间/s      料液比/(g/mL)
            培养基，北京索莱宝科技有限公司；二甲基亚砜                                 1       200           40          1∶20
            （DMSO），分析纯，上海莱昂生物科技有限公司；                              2       300           50          1∶30
            HepG2 肝癌细胞和 A549 肺癌细胞，哈尔滨医科大                          3       400           60          1∶40
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