Page 181 - 《精细化工》2020年第7期

第 7 期 张晓平，等: 吡嗪-唑联芳化合物的合成及其抗氧化性能 ·1463·

二甲基吡嗪-N-氧化物Ⅰ（0.62 g，5 mmol）、唑 溶液，振荡混匀后，在 100 ℃水浴中加热 15 min，
化合物Ⅱa（6 mmol）、无水氯化铁（2.44 g，15 mmol）、 速冷至室温，加入 1.5 mL 正丁醇充分振荡萃取
300~400 目硅胶（2.44 g）和无水 1,2-二氯乙烷 TBARS，离心分层后，测定正丁醇层在 535 nm 波
（50 mL），氮气（体积分数 98%以上）保护下， 长处的吸光度。
100 ℃加热回流 8 h。反应结束后，将反应混合液冷 1.3.2 化合物抑制 HO•和 GS•引发的 DNA 氧化反应
却至室温，之后转移至单口烧瓶中，旋蒸，得到粉 测试
末固体；并以 V（石油醚）∶V（乙酸乙酯）=10∶1 采用文献[16]方法对化合物抑制 HO•引发的
混合溶液作洗脱剂，采用 300~400 目硅胶进行柱层 DNA 氧化反应进行测试。在含有 2.0 g/L DNA、
析分离，通过薄层层析法（TLC）检测流出液，收 4.0 mmol/L H 2 O 2 及 2.0 mmol/L TCHQ 体系中，加入
集含目标化合物的洗脱液，旋蒸，干燥后得到白色 待测化合物，使待测化合物终浓度为 200 mol/L。
吡嗪-唑联芳化合物Ⅲa。按照上述方法可合成化 充分混匀后取 2 mL 加入到试管，放入 37 ℃恒温水
合物Ⅲb 和Ⅲc。 浴槽中。30 min 后取出，冷却至室温，依次加入
2-（3,6-二甲基吡嗪-2-基）唑（Ⅲa）：白色固 1.0 mL TBA 溶液和 1.0 mL TCA 溶液，振荡混匀后，
体 0.57 g，产率 65%，薄层层析法测得比移值（R f）= 在 100 ℃水浴中加热 30 min，速冷至室温，加入
1
0.62，m.p. 134~136 ℃; HNMR (400 MHz, CDCl 3 ), 1.5 mL 正丁醇充分振荡萃取 TBARS，离心分层后，
δ: 8.43 (s, 1H, Pyrazine-H), 7.87 (d, J = 0.4 Hz, 1H, 测定正丁醇层在 535 nm 波长处的吸光度值。
Oxazole-H), 7.38 (d, J = 0.4 Hz, 1H, Oxazole-H), 2.96 采用 文献方法 [16] 对化 合物抑 制 GS•引发 的
13
(s, 3H, CH 3 ), 2.65 (s, 3H, CH 3 ); CNMR (100 MHz,
CDCl 3 ), δ: 159.5, 150.6, 150.2, 144.0, 139.9, 139.2, DNA 氧化反应进行测试。在含有 2.0 g/L DNA、
+
128.8, 23.3, 21.2; HRMS (ESI) [M+H] ，m/Z：实测值 5.0 mmol/L CuSO 4 及 3.0 mmol/L GSH 体系中，加入
（计算值）：176.0824（176.0824）。 待测化合物，使待测化合物终浓度为 200 mol/L。
2-（3,6-二甲基吡嗪-2-基）苯并唑（Ⅲb）： 充分混匀后取 2 mL 加入到试管，放入 37 ℃恒温水
白色固体 0.81 g，产率 72%，R f = 0.61，m.p. 167~169 ℃; 浴槽中，90 min 后取出，冷却至室温，依次加入
1 HNMR (400 MHz, CDCl 3 ), δ: 8.50 (s, 1H, 1.0 mL EDTA 溶液、1.0 mL TBA 溶液和 1.0 mL TCA
Pyrazine-H), 7.87 (dd, J = 6.5, J = 1.7 Hz, 1H, ArH), 溶液，振荡混匀后，在 100 ℃水浴中加热 30 min，
7.71 (dd, J = 6.5, J = 1.7 Hz, 1H, ArH), 7.47~7.39 (m, 速冷却至室温，加入 1.5 mL 正丁醇充分振荡萃取
2H, ArH), 3.08 (s, 3H, CH 3 ), 2.70 (s, 3H, CH 3 );
13 TBARS，离心分层后，测定正丁醇层在 535 nm 波
CNMR (100 MHz, CDCl 3 ), δ: 160.3, 151.6, 151.0,
150.6, 144.7, 141.7, 139.3, 126.3, 124.9, 120.9, 111.3, 长处的吸光度值。
+
23.7, 21.3; HRMS (ESI) [M+H] ，m/Z：实测值（计 1.4 还原自由基性能测试
+
算值）：226.0980（226.0986）。 1.4.1 化合物捕获 ABTS •性能测试
+
2-（3,6-二甲基吡嗪-2-基）-5-甲基苯并唑（Ⅲc）： 按照文献[17]方法对化合物捕获 ABTS •性能进
白色固体 0.88 g，产率 74%，R f = 0.61，m.p. 181~ 183 ℃; 行测试。首先，称取 5.0 mg ABTS 和 1.5 mg K 2 S 2 O 8
1 HNMR (400 MHz, CDCl 3 ), δ: 8.48 (s, 1H, 加入 2 mL 容量瓶中，加蒸馏水定容后，在室温暗处
Pyrazine-H), 7.66 (s, 1H, ArH), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 放置 24 h，颜色变为深蓝。之后转移至 100 mL 容量
1H, ArH), 7.24 (dd, J = 8.4, J = 1.0 Hz, 1H, ArH),
3.06 (s, 3H, CH 3 ), 2.69 (s, 3H, CH 3 ), 2.51 (s, 3H, CH 3 ); 瓶中，以无水乙醇定容，并在 30 ℃恒温水浴中放
+
13 CNMR (100 MHz, CDCl 3 ), δ: 160.4, 151.5, 150.9, 置 30 min，得到 ABTS •乙醇溶液。移取 1.9 mL
+
148.9, 144.6, 142.0, 139.4, 134.8, 127.5, 120.7, 110.6, ABTS •乙醇溶液和 0.1 mL 浓度为 1 mmol/L 待测化
+
23.7, 21.5, 21.3; HRMS (ESI) [M+H] ，m/Z：实测值 合物储备液加入试管中，使待测化合物终浓度为
（计算值）：240.1489（240.1437）。 50 mol/L，迅速混匀，并记录 0~1800 s 最大吸收波
1.3 抗氧化活性测试 长（734 nm）处吸光度值（A）随时间的衰减曲线。
1.3.1 化合物抑制 AAPH 引发的 DNA 氧化反应测试 1.4.2 化合物捕获 DPPH•性能测试
采用文献[16]方法对化合物抑制 AAPH 引发的 按照文献[17]方法对化合物捕获 DPPH•性能进
DNA 氧化反应进行测试。在含有 2.0 g/L DNA 和 行测试。首先，称取 4.0 mg DPPH•，加入 20 mL 烧
40.0 mmol/L AAPH 体系中，加入待测化合物，分别 杯中，以少量无水乙醇溶解，之后转移至 100 mL
配成 100、200、300 和 400 μmol/L 的目标化合物混 容量瓶中，以无水乙醇定容，得到 DPPH•乙醇溶液。
合液，充分混匀后分装入 7 只试管中，每只 2 mL， 移取 1.9 mL 的 DPPH•乙醇溶液和 0.1 mL 浓度为
此为 1 组，共计 3 组，总数为 84 只试管，同时放入 2 mmol/L 待测化合物储备液加入试管中，使待测化
37 ℃恒温水浴槽中。之后，每隔 2 h 取出 1 组，速 合物终浓度为 100 mol/L，迅速混匀，并记录
冷至室温，依次加入 1.0 mL TBA 溶液和 1.0 mL TCA 0~1800 s 最大吸收波长（517 nm）处吸光度值（A）