Page 166 - 《精细化工》2020年第2期

·368· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷

溶液、α-酸-甲苯溶液、β-酸-甲苯溶液和六氢 β-酸- 法分析，且两者的吸收波长相差较大，番茄红素在
甲苯溶液，避光保存，使用时用甲苯稀释至需要的 可见光区有吸收 [31] ，啤酒花成分在紫外光区有吸收 [32] ，
质量浓度。 互相间没有干扰。为方便观测，稳定性实验均以体
1.2.2 DPPH 不同溶剂体系稳定性的测定 系中番茄红素及啤酒花各成分的吸光度值变化率
准确称取 0.0100 g DPPH 3 份，分别用甲苯、甲 （吸光度值的变化率/%=不同测试时间下样品的吸
醇和乙酸乙酯溶解并定容于 250 mL 容量瓶中，得 光度值/样品初始吸光度值×100）进行评价，其值越
40 mg/L DPPH 溶液；对 DPPH 溶液进行全波长扫描， 高说明稳定性越好。各样品的检测波长确定如下：
确定溶液的最大吸收波长为 517 nm，每隔 2 h 测其 番茄红素 484 nm、α-酸 325 nm、啤酒花浸膏、β-酸、
吸光度值，共测 10 h，考察 DPPH 在不同溶剂中的 六氢 β-酸均为 322 nm。
稳定性。 1.2.5.2 温度对稳定性的影响
1.2.3 DPPH•清除能力评价 考察不同温度（25、50、70 ℃）对复配体系稳
1.2.3.1 单一样品体系 定性的影响。将配制的复配液放置于水浴锅中，设
参考文献[19]方法，准确移取 1 mL 各样品溶液 置不同温度，每间隔 2 h 测定 1 次样品的吸光度值，
于试管中，分别加入 3 mL DPPH-甲苯溶液，立即混 共监测 10 h，稳定性以复配样品中活性成分的吸光
匀，避光反应 50 min；用甲苯调零后，在 517 nm 波 度值变化率为指标。
长处测定溶液的吸光度。考虑到样品的颜色可能对 1.2.5.3 紫外线照射对稳定性的影响
吸光度值有影响，易造成结果误差，因此，将 1 mL 考察紫外线照射对复配体系稳定性的影响，将
样品溶于 3 mL 甲苯溶液作为参比溶液。由下式计算 配制的复配液放置紫外灯（30 W）下照射，每间隔
实验清除率（ESC）： 2 h 测定 1 次样品的吸光度值，共监测 10 h，稳定性
A  (A  A ) 以复配样品中活性成分的吸光度值变化率为指标。
ESC / %  0 i j  100 （1）
A 0 1.3 统计分析
式中：A 0 为未加样品液的 DPPH-甲苯溶液的吸光度； 所有数据均采用 3 次平行测定，数据的处理与
A i 为加样后 DPPH-甲苯溶液的吸光度；A j 为参比溶 统计分析结果都是采用 Microsoft Excel 2010 或
液的吸光度。 Origin 8.6 软件处理，结果均以平均值±标准偏差表
1.2.3.2 番茄红素与啤酒花活性成分的复配体系 示（n≥3）。
由单一样品溶液清除 DPPH 的活性-剂量关系可
2 结果与讨论
获得各样品的 IC 50 值，并以此作为参考，选择番茄
红素的质量浓度 4 mg/L 为基准，按照一定质量比配 2.1 DPPH 在不同溶剂中的稳定性
制番茄红素与啤酒花活性成分的复配溶液，如 4 mg/L DPPH•清除实验通常以甲醇或乙醇为溶剂，但
的番茄红素-甲苯溶液 1 mL 与 6 mg/L 的酒花浸膏- 由于番茄红素难溶于甲醇或乙醇，其在乙酸乙酯和
甲苯溶液 1 mL 相复配，则番茄红素与酒花浸膏两者 甲苯中的溶解度较好，因而，首先比较了 DPPH 在
质量比为 2∶3。对不同复配体系清除 DPPH•能力进 甲苯、甲醇和乙酸乙酯中的稳定性。吸光度值可定量
行测定，由公式（1）计算得出 ESC。 分析物质含量的变化，随着时间的延长，吸光度会下
1.2.4 复配体系抗氧化协同系数（SE）的计算 降，说明含量发生变化，可进一步反映出物质的稳定
SE 取决于各体系得到 ESC 与理论计算的清除 性。图1为DPPH在不同溶剂体系的吸光度变化曲线。
率（TSC）之间的比值 [19] ，即：
ESC
SE = （2）
TSC
TSC 的计算公式如下：
TSC/% = (ESC 1 +ESC 2 )－(ESC 1 ×ESC 2 )/100 （3）
式中：ESC 1 、ESC 2 分别为番茄红素和啤酒花活性成
分单一溶液的实验清除率/%。当协同系数>1，说明
复配液之间有一定的协同作用；当协同系数<1，说
明没有明显的协同效果。
1.2.5 复配体系稳定性的测定

1.2.5.1 番茄红素及啤酒花活性成分的吸光度值 图 1 DPPH 在不同溶剂中的吸光度变化曲线
番茄红素和啤酒花各成分的含量均采用吸光度 Fig. 1 Absorption curves of DPPH in different solvent systems