Page 165 - 《精细化工》2021年第9期

第 9 期 于昊泽，等: 呋咱及二氢卟吩 e6 缀合物的合成及光动力抗肿瘤活性评价 ·1879·

Ⅳ的抗肿瘤活性明显优于母体化合物二氢卟吩 e6。

图 3 不同浓度的二氢卟吩 e6 和化合物Ⅳ对细胞生存率
的影响
Fig. 3 Effect of chlorin e6 and compound Ⅳ with different
concentrations on cell viability

表 1 化合物对 Hela 细胞的体外光毒性与暗毒性
Table 1 In vitro phototoxicity and dark toxicity of compounds
to Hela cells
暗毒性 IC 50/ 光毒性 IC 50/ 暗毒性 IC 50/
化合物
（μmol/L） （μmol/L） 光毒性 IC 50
二氢卟吩 e6 >100 24.19±3.30 >4.13
Ⅳ >100 1.46±0.49 >68.49

检测细胞对二氢卟吩 e6 和化合物Ⅳ的细胞摄
取率，将结果进行初步构效分析，在二氢卟吩 e6 的
2
1
15 位引入呋咱基团，保留二氢卟吩 e6 的 13 、17 3
位羧基结构后，得到化合物Ⅳ的细胞摄取率是二氢
卟吩 e6 的 33 倍。化合物Ⅳ细胞摄取率的提高可能

图 2 二氢卟吩 e6 和化合物Ⅳ的光漂白速率（a）；化合 与化合物分子脂水分配系数的改善有关。结合图 3
物Ⅳ的光稳定性测试（b）；MB、二氢卟吩 e6 和化 和表 1 中数据，在相同给药浓度下，化合物Ⅳ的细
合物Ⅳ的相对吸光度与照射时间的关系（c） 胞生存率比二氢卟吩 e6 更低，说明化合物Ⅳ光动力活
Fig. 2 Photobleaching rate of chlorin e6 and compound Ⅳ 性的提高也与化合物Ⅳ的细胞摄取率提高有关。
(a); light stability test of compoundⅣ(b); relationship 2.4 细胞内 NO、ROS、GSH 的含量
between relative absorbance of MB, chlorin e6 and
compound Ⅳ and irradiation time (c) 为了进一步评价呋咱 NO 供体结构的引入对化
合物Ⅳ光敏活性增强的影响，对细胞内 NO、ROS
2.3 细胞摄取率与细胞毒性 含量进行检测，结果见图 4。由图 4 可知，经化合
对二氢卟吩 e6 及化合物Ⅳ的细胞暗毒性和光 物Ⅳ诱导的细胞内 NO 水平约为对照组（该组不加
毒性进行了评价，结果见图 3 和表 1。图 3 显示， 化合物，只有细胞）的 2.3 倍，ROS 水平约为对照
2
暴露于低光剂量（1.7 J/cm ）下，当二氢卟吩 e6 的 组的 36 倍，约为二氢卟吩 e6 诱导组的 1.3 倍。结
浓度为 33 μmol/L 时，细胞存活率为 44%，而当化 果表明，呋咱 NO 供体的引入的确能提高细胞内 NO
合物Ⅳ的浓度为 33 μmol/L 时，细胞存活率为 4%， 的浓度，而且细胞内总 ROS 浓度增高可能与供体释
即对 Hela 细胞的增殖抑制率为 96%。当二氢卟吩 放 NO 的能力有关。同时，GSH 作为一种细胞内重
e6 和化合物Ⅳ的浓度低于 0.1 μmol/L 时，细胞存活 要的抗氧化剂，会消耗 ROS 从而降低 PDT 的功效。
率均接近 100%，抗肿瘤效果不明显。说明药物浓度 此外，NO 也是促进细胞内 GSH 代谢的有效分子 [41] 。
对抗肿瘤活性具有较大影响。表 1 显示，化合物Ⅳ 因此，进一步对细胞内 GSH 的含量变化进行检测，
和二氢卟吩 e6 均显示出极低的暗毒性〔半数抑制浓 结果见图 4。由图 4 可知，化合物Ⅳ可以显著降低
度（IC 50 ）>100 μmol/L〕。在光照条件下，二氢卟 细胞内 GSH 水平，与二氢卟吩 e6 相比，使用化合
吩 e6 的 IC 50 值是化合物Ⅳ的约 20 倍，说明化合物 物Ⅳ时，细胞内 GSH 浓度水平降低了约 26%，氧化